Транстиретиновая амилоидная кардиомиопатия. Особенности гистологической диагностики: дизайн исследования

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Изучить особенности окраски транстиретинового амилоида разными гистохимическими красителями и оценить эффективность их использования для диагностических целей.

Материалы и методы. Материалом для исследования послужили образцы миокарда левого и правого желудочка лиц обоих полов в возрасте старше 70 лет (n=10) с иммуногистохимически верифицированным транстиретиновым амилоидозом. Препараты всех отобранных случаев были окрашены Конго красным, альциановым синим, толуидиновым синим и метиловым фиолетовым.

Результаты. В случае транстиретинового амилоидоза миокарда окраска Конго красным по чувствительности и специфичности выявления амилоида сопоставима с иммуногистохимической реакцией. Для верификации присутствия амилоида вместо поляризационной микроскопии может быть использован метод флуоресцентной микроскопии, который дает возможность более надежно определить природу конгофильных скоплений. Применение метода конфокальной микроскопии и функции спектрального разделения позволяет усилить контрастность выявления амилоида за счет элиминирования фоновой флуоресценции мышечной ткани и автофлуоресценции липофусцина. Метод окраски альциановым синим по чувствительности и специфичности обнаружения амилоида сопоставим с Конго красным. При этом он менее трудоемок и позволяет избежать ложноположительных и ложноотрицательных результатов, обусловленных особенностями финальной обработки препаратов. Толуидиновый синий и метиловый фиолетовый проявляют метахроматическое окрашивание при связывании с транстиретиновым амилоидом, что может быть обусловлено биохимическими особенностями амилоида этого типа.

Заключение. Наиболее надежным методом гистохимической диагностики транстиретинового амилоидоза является окраска Конго красным с последующим исследованием препаратов методами флуоресцентной или конфокальной микроскопии. В качестве скринингового метода в диагностических целях может быть применена окраска альциановым синим. Метахроматические красители менее эффективны для диагностики транстиретинового амилоидоза миокарда.

Об авторах

Валерия Владимировна Гусельникова

ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»

Автор, ответственный за переписку.
Email: Guselnicova.Valeriia@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-9499-8275

канд. биол. наук, ст. науч. сотр. лаб. функциональной морфологии центральной и периферической нервной системы отд. общей и частной морфологии

Россия, Санкт-Петербург

Елена Анатольевна Федорова

ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»

Email: Guselnicova.Valeriia@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-0190-885X

канд. биол. наук, науч. сотр. лаб. функциональной морфологии центральной и периферической нервной системы отд. общей и частной морфологии

Россия, Санкт-Петербург

Александра Яковлевна Гудкова

ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова» Минздрава России

Email: Guselnicova.Valeriia@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-0156-8821

д-р мед. наук, проф. каф. факультетской терапии, зав. лаб. кардиомиопатий НИИ сердечно-сосудистых заболеваний Научно-клинического исследовательского центра

Россия, Санкт-Петербург

Михаил Михайлович Шавловский

ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»

Email: Guselnicova.Valeriia@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-2119-476X

д-р мед. наук, проф., зав. лаб. молекулярной генетики человека отд. молекулярной генетики

Россия, Санкт-Петербург

Дмитрий Эдуардович Коржевский

ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»; ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова» Минздрава России

Email: Guselnicova.Valeriia@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-2456-8165

д-р. мед. наук, проф., проф. РАН, зав. лаб. функциональной морфологии центральной и периферической нервной системы отд. общей и частной морфологии, вед. науч. сотр. лаб. кардиомиопатий НИИ сердечно-сосудистых заболеваний

Россия, Санкт-Петербург; Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Narotsky DL, Castano A, Weinsaft JW, et al. Wild-type Transthyretin Cardiac Amyloidosis: Novel Insights from Advanced Imaging. Can J Cardiol. 2016;32(9):1-10. doi: 10.1016/j.cjca.2016.05.008
  2. Halatchev IG, Zheng J, Ou J. Wild-type transthyretin cardiac amyloidosis (ATTRwt-CA), previously known as senile cardiac amyloidosis: clinical presentation, diagnosis, management and emerging therapies. J Thorac Dis. 2018;10(3):2034-45. doi: 10.21037/jtd.2018.03.134
  3. Cornwell GG 3rd, Murdoch WL, Kyle RA, et al. Frequency and distribution of senile cardiovascular amyloid: a clinicopathologic correlation. Am J Med. 1983;75:618-62. doi: 10.1016/0002-9343(83)90443-6
  4. Banypersad SM, Moon JC, Whelan C, et al. Updates in cardiac amyloidosis: a review. J Am Heart Assoc. 2012;1(2):e000364. doi: 10.1161/JAHA.111.000364
  5. Полякова А.А., Семернин Е.Н., Ситникова М.Ю., и др. Транстиретиновый амилоидоз в когорте пациентов с хронической сердечной недостаточностью старческого возраста и долгожителей. Кардиология. 2018;58(S2):12-8 [Poliakova AA, Semernin EN, Sitnikova MYu, et al. Transthyretin amyloidosis in a cohort of old and very old patients with chronic heart failure. Kardiologiia. 2018;58(S2):12-8 (in Russian)]. doi: 10.18087/cardio.2390
  6. Liu PP, Smyth D. Wild-Type Transthyretin Amyloid Cardiomyopathy. A Missed Cause of Heart Failure With Preserved Ejection Fraction With Evolving Treatment Implications. Circulation. 2016;133(3):245-7. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.115.020351
  7. Рамеев В.В., Козловская Л.В., Жданова Е.А., Гудкова К.В. Кардиоренальные взаимосвязи при системном амилоидозе. Терапевтический архив. 2013;85(6):51-9 [Rameev VV, Kozlovskaia LV, Zhdanova EA, Gudkova KV. Cardiorenal links in systemic amyloidosis. Terapevticheskii Arkhiv (Ter. Arkh.). 2013;85(6):51-9 (in Russian)].
  8. Yakupova EI, Bobyleva LG, Vikhlyantsev IM, Bobylev AG. Congo Red and amyloids: history and relationship. Biosci Rep. 2019;39(1):BSR20181415. doi: 10.1042/BSR20181415
  9. Pomerance A, Slavin G, McWatt J. Experience with the sodium sulphate-Alcian Blue stain for amyloid in cardiac pathology. J Clin Pathol. 1976;29(1):22-6. doi: 10.1136/jcp.29.1.22
  10. Wolman M. Amyloid, its nature and molecular structure. Comparison of a new toluidine blue polarized light method with traditional procedures. Lab Invest. 1971;25(2):104-10.
  11. Sipe JD, Benson MD, Buxbaum JN, et al. Amyloid fibril proteins and amyloidosis: chemical identification and clinical classification International Society of Amyloidosis 2016 Nomenclature Guidelines. Amyloid. 2016;23(4):209-13. doi: 10.1080/13506129.2016.1257986
  12. Howie AJ, Owen-Casey MP. 'Apple-green birefringence' of amyloid stained by Congo red. Kidney Int. 2012;82(1):114;author reply 114. doi: 10.1038/ki.2012.89
  13. Cohen AS, Calkins E, Levene CI. Studies on experimental amyloidosis. Analysis of histology and staining reactions of caseininduced amyloidosis in the rabbit. Am J Pathol. 1959;35:971-89.
  14. Elghetany MT, Saleem A. Methods for staining amyloid in tissues: a review. Stain Technol. 1988;63(4):201-12. doi: 10.3109/10520298809107185
  15. Sridharan G, Shankar AA. Toluidine blue: A review of its chemistry and clinical utility. J Oral Maxillofac Pathol. 2012;16(2):251-5. doi: 10.4103/0973-029X.99081

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. ТТА миокарда человека. Иммуногистохимическая реакция на агрегированный ТТ, подкраска ядер гематоксилином Эрлиха: a – тотальное амилоидное поражение миокарда; b – очаговые скопления амилоида в миокарде; c, d – амилоидные скопления в стенках кровеносных сосудов миокарда. *Просвет кровеносного сосуда. Масштабный отрезок равен 100 (a–c) и 50 µm (d).

Скачать (366KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Амилоидные скопления, окрашенные Конго красным, в миокарде человека. Окраска 0,1% водным раствором Конго красного: а, b – световая микроскопия; c – флуоресцентная микроскопия; d, e – конфокальная лазерная микроскопия (spectral unmixing). Для возбуждения флуоресценции Конго красного использовали диодный лазер c длиной волны 561 нм (красный цвет), для возбуждения автофлуоресценции мышечной ткани – диодный лазер c длиной волны 488 нм. *Просвет кровеносного сосуда, головка стрелки – липофусцин в кардиомиоцитах. Масштабный отрезок равен 50 (а–d) и 100 µm (e).

Скачать (408KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Амилоидные скопления в миокарде человека, окрашенные разными гистохимическими красителями: а, b – окраска альциановым синим с подкраской пикриновой кислотой (a) или ядерным прочным красным (b). Амилоид окрашен в бирюзовый (а) или синий (b) цвет; c, d – окраска толуидиновым синим, амилоид окрашен в светло-фиолетовый цвет; e, f – окраска метиловым фиолетовым, амилоид окрашен в насыщенный фиолетовый цвет. Стрелка указывает на тучную клетку с признаками дегрануляции. *Просвет кровеносного сосуда. Масштабный отрезок равен 50 µm.

Скачать (468KB)
Метаданные

© ООО "Консилиум Медикум", 2022

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
 
 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».