Synthesis of Phosphoisosteres of Amyloid Dipeptide Components

Capa

Citar

Texto integral

Resumo

A simple and effective method was proposed for the synthesis of new phosphinic peptides in free form, structural isosteres of the dipeptide components of beta-amyloid (Aβ42), potential inhibitors of zinc-metalloproteinases.

Texto integral

ВВЕДЕНИЕ

Одним из наиболее плодотворных подходов к поиску физиологически активных веществ является фосфорная модификация природных аминокислот и пептидов. Замена пептидной NHС (О) связи в молекуле дипептида метиленфосфорильным СH2P (O) (OH) фрагментом приводит к образованию α-аминофосфиновых кислот – фосфиновых пептидов, связывающих в молекуле две аминокислотные компоненты с помощью Zn-хелатирующей кислой фосфиновой функции, которая имитирует природную пептидную связь с тетракоординированным атомом углерода в переходном состоянии пептидного гидролиза [1–4]. Поэтому образующиеся фосфиновые пептиды, структурные изостеры пептидов, являются мощными ингибиторами Zn-металлопротеиназ, вовлеченных в разнообразные биологические процессы [5–8]. В этой связи развитие синтетических методов модификации природной пептидной молекулы является актуальным.

В настоящей работе в качестве объекта для фосфиновой модификации предложен бета-амилоид Aβ42, который считают ключевым пептидом в патогенезе болезни Альцгеймера, усиливающим олигомеризацию и образование так называемых амилоидных бляшек, состоящих из скоплений пептида, свернутых в виде бета-складки [9–15]. В данной работе предложен метод синтеза новых фосфоизостеров N- и С-терминальных дипептидных компонент амилоида, аспартилаланина (Aβ1-2) и изолейцилаланина (Aβ41-42) соответственно. Интересно отметить, что амилоид Aβ42 отличается от амилоида Aβ40 наличием этой последней дипептидной составляющей (Aβ41-42), при этом в литературе отсутствуют данные об участии Aβ40 в процессах олигомеризации и образовании амилоидных бляшек. В работе также осуществлен синтез фосфоизостеров некоторых дипептидных компонент середины полипептидной цепочки амилоида Aβ42: валилфенилаланина (Aβ18-19) фенилаланилфенилаланина (Aβ19-20), фенилаланилаланина (Aβ20-21) валилглицина (Aβ24-25 и Aβ36-37) и глицилглицина (Aβ37-38). Необходимо отметить, что ранее нами были синтезированы фосфиновые изостеры дипептидных компонент амилоида: изолейцилглицина (Aβ32-33) и глициллейцина (Aβ33-34) [16].

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В работе предложен простой и эффективный метод синтеза свободных α-аминофосфиновых кислот – пептидов 1а–ж (схема 1). Использована трехкомпонентная карбаматная версия реакции Кабачника–Филдса в среде ацетилхлорида без выделения образующихся N-защищенных фосфиновых пептидов 2 в индивидуальном виде (схема 1). В этом случае в качестве N-компоненты синтеза использовали водорастворимые метил- и этилкарбаматы 3, которые вводили в реакционную сферу в небольшом избытке с целью наиболее полного расходования альдегида 4 и фосфонистой кислоты 5 в процессе реакции, а также с целью удаления непрореагировавших соединений в процессе обработки реакционной смеси. В предложенной N+PC процедуре использованы фосфонистые карбоновые кислоты 5, использование которых более эффективно в сравнении с фосфонистыми карбоновыми эфирами по причине генерирования in situ в условиях реакции высоко реакционного нуклеофильного интермедиата, смешанного фосфокарбонового ангидрида – фосфолактона 6 (схема 1) [17]. В свою очередь, электрофильной компонентой, непосредственно участвующей в образовании фосфор-углеродной связи, является ацилиминиевый катион 7, генерируемый in situ в условиях кислого катализа из соответствующего диалкил алкилиденбискарбамата 8, как было нами показано раннее [18–20]. Последний является относительно стабильным интермедиатом реакции, легко образующимся из соответствующих алкилкарбамата 3 и карбонильного соединения 4 в условиях реакции (схема 1) [18–20].

 

Схема 1

 

Синтез фосфинового изостера глицилглицина 1е (Aβ37-38) осуществлен путем двухкомпонентной версии реакции с использованием в качестве электрофильной компоненты предварительно синтезированного диэтилметиленбискарбамата 9 (схема 1), совмещающего в молекуле амино- и карбонильную (формальдегид) компоненты.

Образующиеся N-метилоксикарбонил- и N-этилоксикарбонилзащищенные пептиды 2а–ж (Alk = Me, Et) без выделения подвергали кислотному гидролизу и получали искомые пептиды 1а–ж в свободной форме (схема 1). Контроль за ходом реакции проводили с помощью ЯМР 31P спектроскопии. Предложенный подход достаточно эффективен для получения свободных фосфиновых пептидов в укрупненных масштабах, которые могут быть использованы для дальнейших пептидных построений.

Кроме того, синтез N-защищенных фосфиновых пептидов 2а [изостер дипептидной компоненты AspAla (Aβ1-2)] и 2в [изостер дипептидной компоненты PhePhe (Aβ19-20)] осуществлен в более мягких условиях в соответствии с N+PC процедурой амидоалкилирования фосфонистых кислот 5 (R = Me и Bn) с участием соответствующих алкилкарбаматов 3 (Alk = Me и Bn) и альдегидов 4 [R2 = EtOC(O)CH2 и Bn] в среде уксусного ангидрида в условиях кислого катализа, осуществляемого трифторуксусной кислотой (TFA) (схема 1) [17–20]. Последующий кислотный гидролиз N-защищенных пептидов 2а и 2в также позволил получить фосфиновые пептиды 1а и 1в в свободной форме, физико-химические и спектральные данные которых значительно не отличались от данных для пептидов 1а и 1в, полученных более простым методом, описанным выше.

Строение целевых N-защищенных фосфиновых пептидов 2а, в и пептидов в свободной форме аминофосфиновых кислот 1а–ж определяется природой заместителей R1 и R2 (R3) в соответствующих С- и N-компонентах образующегося фосфинового дипептида. В работе использованы фосфонистые карбоновые кислоты 5, содержащие структурный изостер глицина (R1 = H) (5a), аланина (R1 = Me) (5б) и фенилаланина (R1 = Bn) (5в).

ВЫВОДЫ

Таким образом, предложена простая и эффективная методика синтеза новых аминофосфиновых кислот в свободной форме – фосфоизостеров дипептидных компонент бета-амилоида Aβ42.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Спектры ЯМР 1H, 31P{1H} и 13С{1H} снимали на Фурье-спектрометре Bruker DPX-200 и Bruker Avance III 500, при необходимости проводили DEPT 13С{1H} ЯМР эксперимент. Ход реакций контролировали с помощью спектроскопии ЯМР 31Р и (или) ТСХ. Все соединения, для которых приведены спектральные и аналитические данные, гомогенны по данным ТСХ. Аналитическую тонкослойную хроматографию проводили на покрытых диоксидом кремния алюминиевых пластинах (силикагель Силуфол-254) с использованием УФ света в качестве визуализирующего агента (254 нм) и пламени для контроля визуализации, а также на пластинках Alufol с использованием раствора нингидрина для анализа аминокислот. Для ионообменной хроматографии использовали катиониты Purolite C100E (H+) или Dowex 50WX8-200 (H+). Температуру плавления определяли на приборе Boetius PHMK или в блоке в открытом стеклянном капилляре. Для фосфиновых пептидов 1а–ж в свободной форме и N-защищенных фосфиновых пептидов 2a и 2в получены масс-спектры высокого разрешения (HRMS) в отрицательной форме с использованием масс-спектрометра Orbitrap Exactive (Thermofisher Scientific).

Получение фосфонистых карбоновых кислот 5 осуществляли в соответствии с ранее опубликованными методиками [18–20].

Диэтилметиленбискарбамат (9). Смесь диэтоксиметана (0.05 моль), 2 экв. этилкарбамата (0.10 моль) и 2 экв. трифторуксусной кислоты (0.10 моль) в растворе уксусного ангидрида (15–17 мл) перемешивали при комнатной температуре, затем реакционную смесь упаривали, остаток распределяли между хлороформом (30 мл) и водой (10 мл). Органическую фазу дополнительно промывали водой (10 мл), сушили сульфатом натрия и упаривали в вакууме. Остаток кристаллизовали из диэтилового эфира. Выход 5.3 г (56%), белые кристаллы, т. пл. 122–123°C. Спектр ЯМР 1H (CDCl3), δ, м. д.: 1.22 т (6H, CH3, 3JНH 7.1 Гц), 4.10 к (4H, CH2O, 3JНH 7.1 Гц), 4.47 т (2H, NCH2, 3JНH 6.6 Гц), 5.40–5.95 м (2H, NH). Спектр ЯМР 13C{1H} (CDCl3), δC, м. д.: 14.4 (CH3), 47.9 (NCH2), 61.0 (OCH2), 156.9 (C=O). Найдено,%: C 43.92, 43.83; H 7.56, 7.70; N 14.66, 14.53. C7H14N2O4. Вычислено,%: C 44.20; H 7.42; N 14.73.

Общая методика синтеза свободных фосфиновых пептидов 1а–ж. К перемешиваемому раствору 5 ммоль соответствующей фосфонистой кислоты 5 и 6.0 ммоль метил- или этилкарбамата в растворе 20 мл охлажденного до ~5°C ацетилхлорида добавляли по каплям 5.2–5.5 ммоль соответствующего альдегида 4. Образовавшуюся смесь перемешивали при постепенном самонагревании до комнатной температуры. По завершении реакции смесь разбавляли 10 мл хлористого метилена и упаривали в вакууме. Маслообразный остаток распределяли между этилацетатом и водой (25 и 10 мл), органический слой дополнительно промывали водой (2×10 мл) и упаривали в вакууме. Остаток, согласно данным ЯМР 1Н и 31Р, представлял собой N-метилоксикарбонил- или N-этилоксикарбонилзащищенную фосфиновую кислоту 2а–ж (δP 51–55 м. д.). Его кипятили в 25–30 мл 6 н. HCl в течение ~10 ч. Если органический остаток содержал исходную фосфонистую кислоту 5 (δP 25–35 м. д., обычно не более 10%), реакционную массу после кислотного гидролиза подвергали ионообменной хроматографии на катионите (H+) (элюент – Н2О–1 н. HCl). Элюат с положительной реакцией на нингидрин упаривали в вакууме. Образующиеся в результате гидролиза или хроматографии гидрохлориды аминокислот 1а–ж растворяли в водном спирте и обрабатывали избытком окиси пропилена. Свободные аминофосфиновые кислоты 1а–ж кристаллизовали из спирта или из смеси спирт–диэтиловый эфир. Фосфиновые пептиды 1a–ж представляли собой белые кристаллические вещества.

В случае синтеза фосфинового пептида 1а (изостер AspAla, дипептидной компоненты Aβ1-2) этоксикарбонилуксусный альдегид вводили в реакцию в виде раствора 5.5 ммоль диэтилацеталя этоксикарбонилуксусного адьдегида в смеси 1 мл уксусного ангидрида и 1 мл TFA после перемешивания этого раствора в течение 10–15 мин. Далее синтез проводили согласно общей процедуре.

В случае синтеза фосфинового пептида 1е (изостера GlyGly, дипептидной компоненты Aβ37-38) к перемешиваемому раствору 5 ммоль соответствующей фосфонистой кислоты 5 (R1 = H) в растворе 20 мл охлажденного до ~5°C ацетилхлорида порциями добавляли 5.5–6.0 ммоль предварительно синтезированного диэтилметиленбискарбамата 9. Затем синтез проводили в соответствии с общей процедурой.

1-Амино-2-гидроксикарбонилэтил-2′-(гидроксикарбонил) пропилфосфиновая кислота (1а). Выход 47%, т. пл. 125–128°C, Rf ~ 0.1 (i-BuOH:AcOH:H2O = 20:5:3). Cпектр ЯМР 1H (D2O + DCl), δ, м. д.: 1.21 д (3H, CH3, 3JНН 7.0 Гц), 1.52–1.80 м (1H, РСН2), 1.95–2.20 м (1Н, РСН2), 2.50–2.93 м (3Н, CH2СOOH + CHCOOH), 3.40–3.68 м (1H, PCHN). Спектр ЯМР 13С {1H} (D2O + DCl), δC, м. д.: 18.2* д (СН3, 3JРС 5.1 Гц), 18.8 д (СН3, 3JРС 7.3 Гц), 29.5* д (РСН2, 1JРС 91.1 Гц), 31.7 д (РСН2, 1JРС 95.9 Гц), 32.0 д [CHC (O), 2JРС 6.2 Гц], 33.2* [CH2C (O)], 34.3 [CH2C (O)], 46.9 д (PCHN, 1JРС 92.6 Гц), 173.9 д [CH2C (O), 3JРС 11.7 Гц], 180.4 д [CHC (O), 3JРС 8.1 Гц]. Здесь и далее звездочкой отмечены соответствующие сигналы минорной формы, диастереомера или конформера. Спектр ЯМР 31Р{1H} (D2O + DCl): δР 32.9 м. д. Масс-спектр (HRMS ESI/Q-TOF), m/z: 238.0490 [M – H]– (вычислено для C7H13NO6P–: 238.0481). Найдено, %: C 34.88; H 6.21; N 6.07. C7H14NO6P. Вычислено, %: С 35.15; H 5.90; N 5.86.

1-Aмино-2-метилпропил-2′-гидроксикарбонил-2′-бензилэтилфосфиновая кислота (1б). Выход 63%, т. пл. 115–117°C, Rf ~ 0.2 (i-BuOH:AcOH:H2O = 20:4:3). Cпектр ЯМР 1H (D2O), δ, м. д.: 0.82 д (3H, CH3, 3JHH 6.2 Гц), 0.88 д (3H, CH3, 3JHH 6.6 Гц), 1.44–1.70 м (1H, CHСH3), 1.72–2.10 м (2H, PCH2), 2.27–2.60 м (1Н, CHCOOH), 2.65–2.77 м (2Н, СН2Ph), 2.75–2.98 м (1H, PCHN), 7.02–7.90 м (5Н, Ph). Спектр ЯМР 13С{1H} (D2O), δC, м. д.: 16.6 д (СН3, 3JРС 3.3 Гц), 16.8* д (СН3, 3JРС 3.3 Гц), 21.0 д (СН3, 3JРС 11.1 Гц), 21.1* д (СН3, 3JРС 10.7 Гц), 27.2* и 27.5 (СНСН3), 31.1 д (РСН2, 1JРС 85.9 Гц), 39.9 д (СН2Ph, 3JРС 6.6 Гц), 40.1* д (СН2Ph, 3JРС 8.8 Гц), 45.3 д (СНСООН, 3JРС 1.8 Гц), 45.5* д (СНСООН, 3JРС 2.2 Гц), 54.9* д (РСНN, 1JРС 96.2 Гц), 55.6 д (РСНN, 1JРС 95.8 Гц), 126.2, 128.4, 129.0, 140.3 (Ar), 183.4* д (C=O, 3JРС 7.4 Гц), 183.5 д (C=O, 3JРС 8.5 Гц). Спектр ЯМР 31Р{1H} (D2O): δР 35.9 м. д. Найдено, %: C 55.88; H 7.67; N 4.57. C14H22NO4P. Вычислено, %: С 56.18; H 7.41; N 4.68.

1-Амино-2-фенилэтил-2′-гидроксикарбонил-2′-бензилэтилфосфиновая кислота (1в). Выход 57%, т. пл. 148–150°C, Rf ~ 0.25 (i-BuOH:AcOH:H2O = 4:1:1). Cпектр ЯМР 1H (D2O + NaOD, pH ~ 10), δ, м. д.: 1.43–1.77 м (1H, РСН2), 1.80–2.10 м (1Н, РСН2), 2.24–2.51 м (1Н, СHCOOH), 2.58–2.95 м (4Н, PhСН2), 2.95–3.17 м (1Н, PCHN). Спектр ЯМР 13С{1H} (D2O + NaOD, pH ~ 10), δC, м. д.: 30.0* д (РСН2, 1JРС 88.7 Гц), 30.1 д (РСН2, 1JРС 88.2 Гц), 35.4* и 36.1 (PhCH2), 40.0*, 40.1, 40.2* (CHCOOH), 45.2 д (РhСН2, 2JРС 3.3 Гц), 45.3 д (РhСН2, 2JРС 2.9 Гц), 52.3* д (PCHN, 1JРС 95.8 Гц), 52.7 д (PCHN, 1JРС 95.8 Гц), 126.2*, 126.3*, 126.4, 126.8*, 128.4*, 128.5*, 128.6, 128.8, 128.9, 129.1*, 129.2, 129.4, 129.5, 138.8, 138.9, 139.0 (СH-Ar), 140.3 д (С-Ar, 3JРС 10.0 Гц), 183.4 д (С=O, 3JРС 8.1 Гц). Спектр ЯМР 31Р{1H} (D2O + NaOD, pH ~ 10), δР, м. д.: 41.1*, 43.4, 43.9*. Масс-спектр (HRMS ESI/Q-TOF), m/z: 346.1216 [M – H]– (вычислено для C18H21NO4P–: 346.1208). Найдено, %: C 61.90; H 6.53; Р 9.07. C18H22NO4P. Вычислено, %: С 62.24; H 6.38; P 8.92.

1-Амино-2-фенилэтил-2′-гидроксикарбонилпропилфосфиновая кислота (1г). Выход 60%, т. пл. 165–166°C, Rf ~ 0.15 (BuOH:AcOH:H2O = 20:5:3). Cпектр ЯМР 1H (D2O), δ, м. д.: 0.97 д (3H, CH3, 3JНН 7.0 Гц), 1.40–1.65 м (1H, РСН2), 1.75–2.00 м (1Н, РСН2), 2.40–2.85 м (2H, PhCH2), 2.92–3.13 м (1Н, CHCOOH), 3.37–3.69 м (1H, PCHN), 6.95–7.25 м (5H, Ph). Спектр ЯМР 13С{1H} (D2O), δC, м. д.: 18.5* д (СН3, 3JРС 6.2 Гц), 18.7 д (СН3, 3JРС 6.6 Гц), 30.8 д (РСН2, 1JРС 92.9 Гц), 33.2* и 33.3 (PhCH2), 33.8 (CHCOOH), 51.2 (PCHN, 1JРС 94.0 Гц), 128.1, 129.4, 129.5 (СH-Ar), 134.7 д (C-Ar, 3JРС 8.4 Гц), 179.5 д (C=O, 3JРС 7.3 Гц). Спектр ЯМР 31Р{1H} (D2O): δР 41.8 м. д. Масс-спектр (HRMS ESI/Q-TOF), m/z: 270.0900 [M – H]– (вычислено для C12H17NO4P–: 270.0901). Найдено, %: C 52.87; H 6.80; N 5.07. C12H18NO4P. Вычислено, %: С 53.14; H 6.69; N5.16.

1-Амино-2-метилпропил-2′-(гидроксикарбонил)этилфосфиновая кислота (1д). Выход 52%, т. пл. 184–186°C, Rf ~ 0.1 (i-BuOH:AcOH:H2O = 4:1:1). Cпектр ЯМР 1H (D2O), δ, м. д.: 0.99 д (3H, CH3, 3JНН 7.9 Гц), 1.03 д (3H, CH3, 3JНН 7.3 Гц), 1.75–2.00 м (2H, PCH2), 2.10–2.30 м (1H, CH), 2.40–2.65 м (2H, CH2), 2.80–3.20 м (1H, CHN). Спектр ЯМР 13С{1H} (D2O), δC, м. д.: 17.9 д (СН3, 3JРС 5.1 Гц), 20.1 д (3JРС 6.2 Гц), 24.4 д (1JРС 95.9 Гц), 26.8, 26.9, 55.7 д (1JРС 91.5 Гц), 177.5 д (C=O, 3JРС 15.0 Гц). Спектр ЯМР 31Р{1H} (D2O): δР 34.7 м. д. Масс-спектр (HRMS ESI/Q-TOF), m/z: 208.0730 [M – H]– (вычислено для C7H15NO4P–: 208.0733). Найдено, %: C 39.90; H 7.88; P 6.48. C7H16NO4P. Вычислено, %: С 40.19; H 7.71; N 6.70.

Аминометил-2′-гидроксикарбонилэтилфосфиновая кислота (1е). Выход 59%, т. пл. 137‒138°С, Rf ~ 0.1 (BuOH:AcOH:H2O = 4:2:1). Cпектр ЯМР 1H (D2O), δ, м. д.: 1.75–2.00 м (2Н, PCH2), 2.42–2.63 [2H, CH2C(O)], 3.02 д (2Н, NCH2, 2JPН 9.8 Гц). Cпектр ЯМР 13C{1H} (D2O), δC, м. д.: 24.1 д (PCH2C, 1JPC.97.3 Гц), 26.9 д (PCH2C, 2JPC 3.3 Гц), 37.4 д (PCH2N, 1JPC 93.7 Гц), 177.1 д (C=O, 3JPC 13.5 Гц). Спектр ЯМР 31Р{1H} (D2O): δP 35.6 м. д. Масс-спектр (HRMS ESI), m/z: 166.0275 [M – H]– (вычислено для C4H9NO4P: 166.0269).

1-Амино-2-метилбутил-2′-гидроксикарбонилпропилфосфиновая кислота (1ж). Выход 56%, т. пл. 135‒137°С, Rf ~ 0.20 (BuOH:AcOH:H2O = 4:2:1). Cпектр ЯМР 1H (D2O), δ, м. д.: 0.84 т (3Н, СН3, 3JHH 7.0 Гц), 0.97 д (3Н, СН3, 3JHH 7.1 Гц), 1.02* д (3Н, СН3, 3JHH 7.1 Гц), 1.21 д (3Н, СН3, 3JHH 7.1 Гц), 1.28–1.45 м (1Н, РСН2), 1.45–1.80 м (2Н, РСН2 + СНСН2СН3), 1.83–2.18 м (2Н, СН2СН3), 2.68–2.88 м (1Н, CHCOOH), 2.95–3.20 (1H, CHN). Cпектр ЯМР 13C{1H} (D2O), δC, м. д.: 10.4* и 10.7 (СН3СН2), 14.0 д (СН3СН, 3JPC 3.3 Гц), 14.1 д (СН3СН, 3JPC 3.3 Гц), 15.7*д (СН3СН, 3JPC 3.6 Гц), 15.8*д (СН3СН, 3JPC 3.7 Гц), 18.4*д (СН3СНСOOH, 3JPC 3.7 Гц) и 18.6 д (СН3СНСOOH, 3JPC 3.7 Гц), 24.5*д (СН2СН3, 3JPC 4.8 Гц), 24.6*д (СН2СН3, 3JPC 4.8 Гц), 26.7 д (СН2СН3, 3JPC 8.5 Гц), 32.1 д (PCH2, 1JPC 94.0 Гц) и 32.4* д (PCH2, 1JPC 93.6 Гц) и 32.6*д (PCH2, 1JPC ~ 95 Гц, часть дублета перекрывается интенсивным сигналом СН3СНСН), 32.8* и 33.5 (СН3СНСН), 33.9 д (СН3СНСOOH, 2JPC 4.1 Гц), 53.5* д (PCHN, 1JPC 93.2 Гц), 53.7 д (PCHN, 1JPC 92.5 Гц), 55.1* д (PCHN, 1JPC 92.1 Гц), 55.2 д (PCHN, 1JPC 91.4 Гц), 180.4 д (C=O, 3JPC 8.5 Гц). Спектр ЯМР 31Р{1H} (D2O): δP 34.9 м. д. Масс-спектр (HRMS ESI/Q-TOF), m/z: 236.1057 [M – H]– (вычислено для C9H19NO4P–: 236.1057). Найдено, %: C 45.27; H 8.78; N 6.08. C9H20NO4P. Вычислено, %: С 45.57; H 8.50; N 5.90.

Общая методика синтеза N-защищенных фосфиновых пептидов 2а и 2в. К перемешиваемой смеси 5 ммоль метил- или бензилкарбамата 3 и 5 ммоль соответствующей фосфонистой кислоты 5б (R1 = Me) или 5в (R1 = Bn) в растворе 15 мл уксусного ангидрида при комнатной температуре добавляли по каплям раствор 5.5 ммоль диэтилацеталя этоксикарбонилуксусного адьдегида в смеси 1 мл уксусного ангидрида и 1 мл трифторуксусно кислоты после перемешивания этого раствора в течение 10–15 мин в случае синтеза фосфинового пептида 2а или 5.5 ммоль фенилуксусного альдегида в случае синтеза N-бензилоксикарбонил-защищенного фосфинового пептида 2в. По завершении реакции смесь упаривали в вакууме, остаток растворяли в 4–5 мл хлористого метилена и промывали водой (3×1 мл). Органическую фазу упаривали и остаток кристаллизовали из диэтилового эфира или смеси диэтиловый эфир–петролейный эфир (40–70). N-Защищенные пептиды 2а и 2в представляли собой белые кристаллические вещества.

Гидролиз N-защищенных фосфиновых пептидов 2а и 2в в 6 н. HCl позволил получить фосфиновые пептиды 1а и 1в в свободной форме, константы и спектральные данные которых значительно не отличались от данных для этих пептидов, полученных в соответствии с более простой процедурой без выделения пептидов 2.

1-(N-Метилоксикарбонил) амино-2-этилоксикарбонилэтил-2′-гидроксикарбонилпропилфосфиновая кислота (2а). Выход 45%, т. пл. 97–99°С, Rf ~ 0.25 (CHCl3‒i-PrOH–AcOH, 10:1:1). Cпектр ЯМР 1H (CDCl3 + 1–2 капли TFA), δ, м. д.: 1.25 т (3Н, СН3, 3JHH 7.1 Гц), 1.40 д (3Н, СН3, 3JHH 7.1 Гц), 1.80–2.20 м (1Н, РСН2), 2.25–2.63 м (1Н, РСН2), 2.55–3.40 м [3H, CH2C(O) + CHC(O)], 3.76 c и 3.84*c (3Н, CH3O), 4.22 к (2Н, CH2O), 4.45–4.70 м (PCHN), 6.11 уш. д и 6.67* уш. д (1H, NH, 3JРH 8.8, 3JРH 9.3* Гц). Cпектр ЯМР 13C{1H} (CDCl3 + 1–2 капли TFA), δC, м. д.: 13.5 (СН3СН2), 18.6* д (СН3СН, 3JPC 12.2 Гц), 18.9 д (СН3СН, 3JPC 12.5 Гц), 29.0* д (PCH2, 1JPC 94.7 Гц), 29.3 д (PCH2, 1JPC 91.8 Гц), 33.8 (CH2COO), 34.0 (CHCOO), 47.1 д (PCHN, 1JPC 103.9 Гц), 47.7* д (PCHN, 1JPC 102.8 Гц), 53.8 и 54.4* (СН3О), 63.2 (СН2О), 158.2 (NС=О), 172.9 (CH2OC=O), 181.6 (COOH). Спектр ЯМР 31Р{1H} (CDCl3 + 1–2 капли TFA), δP, м. д.: 55.2*, 56.0. Масс-спектр (HRMS ESI/Q-TOF), m/z: 324.0856 [M – H]– (вычислено для C11H19NO8P–: 324.0854). Найдено, %: C 40.33; H 6.38; Р 9.68. C11H20NO8P. Вычислено, %: С 40.62; H 6.20; P 9.52.

1-(N-Бензилоксикарбонил) амино-2-фенилэтил-2′-гидроксикарбонил-2′-бензилэтилфосфиновая кислота (2в). Выход 53%, т. пл. 147–150°С, Rf ~ 0.20 (CHCl3‒i-PrOH–AcOH, 8:1:1). Cпектр ЯМР 1H (ДМСО-d6 + 1–2 капли TFA), δ, м. д.: 1.00–1.25 м (1H, РСН2), 1.65–2.00 м (1Н, РСН2), 2.60–3.15 м (4Н, PhСН2), 3.35–3.70 м (1Н, СHCOOH), 3.75–4.10 (1H, PCHN), 4.76–5.17 м (СH2O), 6.82–7.77 м (16Н, 3Ph + NH). Cпектр ЯМР 13C{1H} (ДМСО-d6 + 1–2 капли TFA), δC, м. д.: 24.5 (PhCH2), 24.8* д (PCH2, 1JPC 88.9 Гц), 28.2 д (PCH2, 1JPC 88.6 Гц), 33.1 (PhCH2), 41.7 42.0* (PCH2CH), 52.2* д (PCHN, 1JPC 104.7 Гц), 52.8 д (PCHN, 1JPC 104.7 Гц), 65.3*, 65.5 (PhCH2О), 126.6, 127.4, 128.0, 128.5, 129.3, 137.5, 138.5, 139.0 (Ar), 156.3 (NCO), 157.0* (NCO), 175.1* д (СОО, 3JPC 9.2 Гц), 175.5 д (СОО, 3JPC 7.3 Гц). Спектр ЯМР 31Р{1H} (ДМСО-d6), δP, м. д.: 45.8, 51.7*, 52.5*. Масс-спектр (HRMS ESI/Q-TOF), m/z: 480.1580 [M – H]– (вычислено для C26H27NO6P–: 480.1581). Найдено, %: C 64.33; H 6.08; Р 6.65. C26H28NO6P. Вычислено, %: С 64.86; H 5.86; P 6.43.

ФИНАНСОВАЯ ПОДДЕРЖКА

Работа выполнена при частичной финансовой поддержке Российского научного фонда (грант № 23-23-00158). ЯМР спектральные исследования проводили с использованием оборудования многопользовательского аналитического отдела Федерального исследовательского центра проблем химической физики и медицинской химии РАН.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

×

Sobre autores

S. Golovash

Institute of Physiologically Active Compounds, Federal Research Center of Problems of Chemical Physics and Medicinal Chemistry of the Russian Academy of Sciences

Email: rvalery@dio.ru
Rússia, Chernogolovka

D. Ivanov

Institute of Physiologically Active Compounds, Federal Research Center of Problems of Chemical Physics and Medicinal Chemistry of the Russian Academy of Sciences

Email: rvalery@dio.ru
Rússia, Chernogolovka

A. Borodachev

Institute of Physiologically Active Compounds, Federal Research Center of Problems of Chemical Physics and Medicinal Chemistry of the Russian Academy of Sciences

Email: rvalery@dio.ru
ORCID ID: 0000-0002-3458-5129
Rússia, Chernogolovka

V. Shestov

Institute of Physiologically Active Compounds, Federal Research Center of Problems of Chemical Physics and Medicinal Chemistry of the Russian Academy of Sciences

Email: rvalery@dio.ru
Rússia, Chernogolovka

M. Dmitriev

Institute of Physiologically Active Compounds, Federal Research Center of Problems of Chemical Physics and Medicinal Chemistry of the Russian Academy of Sciences

Email: rvalery@dio.ru
ORCID ID: 0000-0001-8870-195X
Rússia, Chernogolovka

V. Ragulin

Institute of Physiologically Active Compounds, Federal Research Center of Problems of Chemical Physics and Medicinal Chemistry of the Russian Academy of Sciences

Autor responsável pela correspondência
Email: rvalery@dio.ru
ORCID ID: 0000-0002-3967-1034
Rússia, Chernogolovka

Bibliografia

  1. Collinsova M., Jiracek J. // Curr. Med. Chem. 2000. Vol. 7. N 6. P. 629. doi: 10.2174/0929867003374831
  2. Dive V., Georgiadis D., Matziari M., Makaritis A., Beau F., Cuniasse P., Yiotakis A. // Cell. Mol. Life Sci. 2004. Vol. 61. P. 2010. doi: 10.1007/s00018-004-4050-y
  3. Mucha A. // Molecules. 2012. Vol. 17. P. 13530. doi: 10.3390/molecules171113530
  4. Georgiadis D., Dive V. // Top. Curr. Chem. 2015. Vol. 360. P. 1. doi: 10.1007/128_2014_571
  5. Zinc Metalloproteases in Health and Disease // Ed. N.M. Hooper. London: Taylor and Francis, 1996. P. 153.
  6. Hori M., Nishida K. // Cardiovasc. Res. 2009. Vol. 81. N 3. P. 457. doi: 10.1093/cvr/cvn335
  7. Whittaker M., Ayscough A. // Celltransmissions. 2001. Vol. 17. N 1. P. 3.
  8. Pirad B., Matter H. // J. Med. Chem. 2006. Vol. 49. N 1. P. 51. doi: 10.1021/jm050363f
  9. Dafnis I., Argyri L., Chroni A. // Neuroscience. 2018. Vol. 394. P. 144. doi: 10.1016/j.neuroscience.2018.10.026
  10. Sun X., Chen W.-D., Wang Y.-D. // Front. Pharmacol. 2015. Vol. 6. P. 1. doi: 10.3389/fphar.2015.00221
  11. Xiong Z.M., Kitagawa K., Nishiuchi Y., Kimura T., Nakamura T., Inagaki C. // Life Sci. 2009. Vol. 84. P. 132. doi: 10.1016/j.lfs.2008.11.011
  12. Xiong Z.M., Kitagawa K., Nishiuchi Y., Kimura T., Inagaki C. // Neurosci. Lett. 2007. Vol. 419. N 3. P. 247. doi: 10.1016/j.neulet.2007.04.022
  13. Musiek E.S., Holtzman D.M. // Neuroscience. 2015. Vol. 18. P. 800. doi: 10.1038/nn.4018
  14. Dafnis I., Argyri L., Sagnou M., Tzinia A., Tsilibary E.C., Stratikos E., Chroni A. // Sci Rep. 2016. Vol. 6. P. 30654. doi: 10.1038/srep30654
  15. Argyri L., Dafnis I., Theodossiou T.A., Gantz D., Stratikos E., Chroni A. // J. Biol. Chem. 2014. Vol. 289. P.12931. doi: 10.1074/jbc.M113.538124
  16. Дмитриев М.Э., Рагулин В.В. // ЖОХ. 2015. Т. 85. Вып. 9. С. 1511; Dmitriev M.E., Ragulin V.V. // Russ. J. Gen. Chem. 2015. Vol. 85. N 9. P. 2091. doi: 10.1134/S1070363215090121
  17. Dmitriev M.E., Golovash S.R., Borodachev A.V., Ragulin V.V. // J. Org. Chem. 2021. Vol. 86. N 1. P.593. doi: 10.1021/acs.joc.0c02259
  18. Rozhko L.F., Ragulin V.V. // Amino Acids. 2005. Vol. 29. P.139. doi: 10.1007/s00726-005-0194-9
  19. Dmitriev M.E., Ragulin V.V. // Tetrahedron Lett. 2010. Vol. 51. N 19. P. 2613. doi: 10.1016/j.tetlet.2010.03.020
  20. Dmitriev M.E., Ragulin V.V. // Tetrahedron Lett. 2012. Vol. 53. N 13. P. 1634. doi: 10.1016/j.tetlet.2012.01.094

Arquivos suplementares

Arquivos suplementares
Ação
1. JATS XML
Baixar
2. Scheme 1

Baixar (394KB)
Metadados

Declaração de direitos autorais © Russian Academy of Sciences, 2024

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».