ИЗУЧЕНИЕ УЛЬТРАСТРУКТУРЫ ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОК ЛИНИИ VERO, ИНФИЦИРОВАННЫХ ВИРУСОМ БЕШЕНСТВА (RABV, LISSAVIRUS, RHABDOVIRIDAE)

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Методом атомно-силовой микроскопии (АСМ) изучены особенности влияния аттенуированного вируса бешенства штамма «Москва 3253» на морфологические параметры клеток перевиваемой линии Vero. Для подтверждения специфичности взаимодействия и определения инфекционной активности вируса бешенства использовали методы, основанные на фазово-контрастной микроскопии и иммунофлюоресценции. Получены изображения интактных и инфицированных вирусом бешенства клеток Vero в различные сроки культивирования вируса. Установлен характер изменения геометрических размеров клеток (длины, ширины, высоты) и шероховатости клеточной мембраны в зависимости от времени культивирования вируса бешенства. На протяжении наблюдения регистрировали как увеличение, так и уменьшение размеров клетки, при этом размеры инфицированной клетки превышали размеры интактной. Возрастание значений шероховатости клеточной мембраны при воздействии вируса бешенства наблюдалось в течение всего наблюдения, начиная с первых часов взаимодействия вируса с клеткой, при этом у интактных клеток Vero отмечали лишь незначительные изменения шероховатости мембраны, которые не зависели от возраста культуры. Установлена зависимость увеличения шероховатости клеточной мембраны от заражающей дозы вируса бешенства. Полученные результаты открывают перспективу разработки методического подхода к количественной оценке вируса бешенства in vitro с применением АСМ, при этом наиболее показательным параметром для учета результата представляется изменение шероховатости клеточной мембраны.

Об авторах

С. В. Генералов

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»» Роспотребнадзора

Автор, ответственный за переписку.
Email: svgeneraloff@gmail.com
Россия

П. С. Ерохин

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»» Роспотребнадзора

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Т. Ю. Красовская

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»» Роспотребнадзора

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Н. А. Осина

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»» Роспотребнадзора

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Е. Г. Абрамова

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»» Роспотребнадзора

Email: noemail@neicon.ru
Россия

А. К. Никифоров

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»» Роспотребнадзора

Email: noemail@neicon.ru
Россия

С. А. Щербакова

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»» Роспотребнадзора

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Список литературы

  1. Барышников П.И., Грязин В.Н., Зайковская А.В. Современные проблемы бешенства животных. М.: КолосС; 2007.
  2. Груздев К.Н., Недосеков В.В. Бешенство животных. М.: Аквариум; 2001.
  3. Nagarajan T., Ramya R., Sivakumar S. The mouse neutralisation test. In: Rupprecht C., Nagarajan T., eds. Current Laboratory Techniqes in Rabies Diagnosis, Research and Prevention, Vol 2. San Diego: Elsevier Academic Press; 2015: 189-98
  4. Сливко И.А., Недосеков В.В., Жестерев В.И., Горшкова Т.Ф., Курильчук Ю.Н., Анисимова Л.И. и др. Способ титрования антирабических вируснейтрализующих антител. Патент РФ 2254575; 2005.
  5. Уткин Д.В., Кузнецов О.С., Ерохин П.С., Спицын А.Н., Волох О.А., Осина Н.А. Разработка методических подходов изучения возбудителей особо опасных инфекционных болезней с использованием атомно-силовой микроскопии. Проблемы особо опасных инфекций. 2012, (2): 62-4.
  6. Уткин Д.В., Ерохин П.С., Осина Н.А., Коннов Н.П. Оценка фаголизабельности штаммов холерных вибрионов с использованием атомно-силовой микроскопии. Известия Саратовского университета. Новая серия. Серия: Химия. Биология. Экология. 2013; 13(3): 81-4.
  7. Артамонова М.Н., Потатуркина-Нестерова Н.И. Исследование топографии поверхности Bacillus subtilis в условиях гипотермии. Фундаментальные исследования. 2014; 11(5): 1035-9.
  8. Яковлева В.А., Лисицын Ф.В., Маныкин А.А., Конышева Т.А. Использование атомно-силовой микроскопии для исследования цитоморфологических признаков папилломовирусной инфекции. Вопросы вирусологии. 2009; (4): 32-6.
  9. Lee J.V., Ng M.L. A nano-view of West Nile virus-induced cellular changes during infection. J. Nanobiotechnology. 2004; 2(1): 6.
  10. Lee G., Lee S., Young J., Quan F. Nanostructural Characterization of Sf9 Cells During Virus-Like Particles Generation. Scanning. 2016; 38(6): 735-42.
  11. Moloney M., McDonnell L., O’Shea H. Atomic force microscopy analysis of enveloped and non-enveloped viral entry into, end egress from, cultured cells. Ultramicrocopy. 2004; 100: 163-9.
  12. Tiwari P.M., Eroglu E., Buyoglu-Barnum S., He Q., Willing G.A., Vig K. et al. Atomic force microscopic investigation of respiratory syncytial virus infection in Hep-2 cells. J. Microsc. 2014; 253(1): 31-41.
  13. Баркова И.П., Нагиева Ф.Г., Никулина В.Г., Лисаков А.Н. Быстрый культуральный метод для индикации антигенов вируса бешенства в инфицированных клеточных культурах. Инфекция и иммунитет. 2013; 3(4): 323-6
  14. Dacheux L., Bourhy H. Virus isolation in cell culture: the rabies tissue culture infection test. In: Rupprecht C., Nagarajan T., eds. Current Laboratory Techniqes in Rabies Diagnosis, Research and Prevention, Vol 2. San Diego: Elsevier Academic Press; 2015: 25-31

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Генералов С.В., Ерохин П.С., Красовская Т.Ю., Осина Н.А., Абрамова Е.Г., Никифоров А.К., Щербакова С.А., 2017

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».