Количественное определение нового производного сиднонимина в плазме крови и органах мышей c применением ВЭЖХ-МС/МС

Введение. Сиднонимины – класс гетероциклических химических соединений, обладающих широким спектром биологической активности, перспективных с точки зрения поиска и разработки новых лекарственных средств. Одним из таких соединений является кандидатная молекула BBP2023, представляющая собой N-(этоксикарбонил)-3-(4 метилгексан-2-ил)сиднонимин. Установлено, что BBP2023 накапливается в тканях головного мозга лабораторных животных и вызывает церебральный сосудорасширяющий эффект, что позволяет рассматривать данное соединение в качестве перспективного лекарственного средства, используемого для лечения нарушений мозгового кровообращения.

Цель исследования – разработка и валидация биоаналитической методики определения нового производного сиднонимина в различных тканях лабораторных мышей с целью дальнейшего применения в исследованиях экспериментальной фармакокинетики.

Материал и методы. Количественное определение BBP2023 в плазме крови и гомогенатах органов мышей проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В основе пробоподготовки биоматериала применяли метод осаждения белков метанолом. Хроматографическое разделение выполняли смесью деионизированной воды и ацетонитрила в градиентном режиме на колонке Zorbax Eclipse XDB-C18 4,6×50 мм, 5 мкм. Детектирование осуществляли в режиме MRM.

Результаты. В результате проведенного эксперимента разработана методика пробоподготовки биологического материала мышей, подобраны оптимальные условия хроматографирования и детектирования исследуемого соединения. Биоаналитическая методика валидирована по следующим показателям: селективность, матричный эффект, степень извлечения, перенос пробы, линейность калибровочного диапазона, нижний предел количественного определения, внутри- и межсерийная точность и прецизионность, фактор разбавления, а также стабильность аналита и внутреннего стандарта на этапах анализа.

Выводы. В результате проведенного эксперимента разработана методика количественного определения нового производного сиднонимина BBP2023 в плазме крови и внутренних органах мышей. Аналитический диапазон методики составил от 5 до 5000 нг/мл для плазмы крови и от 25 до 25000 нг/г для печени, почек, сердца, легких, головного мозга, селезенки, скелетных мышц и жировой ткани. Биоаналитическая методика полностью соответствует валидационным требованиям и может быть использована при выполнении аналитической части экспериментального исследования фармакокинетики BBP2023, включая оценку распределения изучаемого соединения по органам и тканям.