ВЛИЯНИЕ НАНОЧАСТИЦ ИЗ ПОЛИМОЛОЧНОЙ КИСЛОТЫ НА ИММУНОГЕННОСТЬ СВЯЗАННОГО С НИМИ БЕЛКА

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Исследовали иммуногенные свойства белков, связанных с полимерными биодеградабельными наногранулами. Описан способ получения сферических наногранул размером 20 мкм путем полимеризации молочной кислоты, а также оптимальный способ их поверхностной активации. Активированные наногранулы использованы для ковалентного связывания модельного белка слияния, содержащего последовательности β2-микроглобулина человека и зеленого флуоресцентного белка. Показано, что наногранулы способны связывать 3 мкг белка на 1 мг полимера. По данным конфокальной микроскопии и электрофореза, белок прочно сорбируется на поверхности гранул. Мышей линии F1 (CBA x C57BL) внутрибрюшинно иммунизировали наногранулами, модифицированными белком слияния, а также эквивалентной смесью немодифицированных наногранул и свободного белка слияния. Кровь забирали через 2 недели после трехкратной внутрибрюшинной иммунизации. Уровень антител к модельному белку определяли в сыворотке крови мышей при помощи иммуноферментного анализа. Опытная и контрольная группы включали по 39 животных. Достоверность полученных результатов оценивали при помощи критерия Манна–Уитни. Показано, что средний уровень антител в контрольной группе в 1,8 раза превышал таковой в опытной группе. Разница оказалась достоверной (p < 0,004). Обсуждается значимость полученных результатов для создания ловушек, способных связывать вирусные частицы в крови и обеспечивать иммунный ответ.

Об авторах

Д. С. Поляков

ФГБНУ Институт экспериментальной медицины;
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова;
ФГБОУ ВО Санкт-Петербургский государственный университет

Автор, ответственный за переписку.
Email: ravendoctor@mail.ru

к.м.н., научный сотрудник отдела молекулярной генетики ФГБНУ Институт экспериментальной медицины, 197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, 12;

ассистент кафедры медицинской генетики;

научный сотрудник межкафедральной лаборатории биомедицинской химии Института химии

Россия

О. И. Антимонова

ФГБНУ Институт экспериментальной медицины

Email: fake@neicon.ru

младший научный сотрудник и аспирант отдела молекулярной генетики,

Санкт-Петербург

Россия

Р. Г. Сахабеев

ФГБНУ Институт экспериментальной медицины

Email: fake@neicon.ru

аспирант отдела молекулярной генетики,

Санкт-Петербург

Россия

Н. А. Грудинина

ФГБНУ Институт экспериментальной медицины

Email: fake@neicon.ru

к.б.н., старший научный сотрудник отдела молекулярной генетики,

Санкт-Петербург

Россия

А. Е. Ходова

ФГБОУ ВО Санкт-Петербургский государственный университет

Email: fake@neicon.ru

студентка 6-го курса магистратуры,

Санкт-Петербург

Россия

Е. С. Синицына

ФГБОУ ВО Санкт-Петербургский государственный университет;
ФГБУН Институт высокомолекулярных соединений РАН

Email: fake@neicon.ru

к.х.н., научный сотрудник межкафедральной лаборатории биомедицинской химии Института химии;

научный сотрудник лаборатории полимерных сорбентов и носителей для биотехнологии,

Санкт-Петербург

Россия

В. А. Коржиков-Влах

ФГБОУ ВО Санкт-Петербургский государственный университет

Email: fake@neicon.ru

к.х.н., доцент межкафедральной лаборатории биомедицинской химии Института химии,

Санкт-Петербург

Россия

Т. Б. Тенникова

ФГБОУ ВО Санкт-Петербургский государственный университет

Email: fake@neicon.ru

д.х.н., профессор, главный научный сотрудник, зав. межкафедральной лаборатории биомедицинской химии Института химии,

Санкт-Петербург

Россия

М. М. Шавловский

ФГБНУ Институт экспериментальной медицины;
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова

Email: fake@neicon.ru

д.м.н., профессор, зав. лабораторией молекулярной генетики человека отдела молекулярной генетики;

профессор кафедры медицинской генетики,

Санкт-Петербург

Россия

Список литературы

  1. Антимонова О.И., Грудинина Н.А., Егоров В.В., Поляков Д.С., Ильин В.В., Шавловский М.М. Взаимодействие красителя конго красный с фибриллами лизоцима, бета-2-микроглобулина и транстиретина // Цитология. 2016. Т. 58, № 2. С. 156–163. [Antimonova O.I., Grudinina N.A., Egorov V.V., Polyakov D.S., Iljin V.V., Shavlovsky M.M. Interaction of the dye congo red with fibrils of lysozyme, beta-2-microglobulin and transthyretin. Tsitologiya = Cell and Tissue Biology, 2016, vol. 58, no. 2, pp. 156–163. (In Russ.)]
  2. Иванов А.В., Кузякин А.О., Кочетков С.Н. Молекулярная биология вируса гепатита С // Успехи биологической химии. 2005. Т. 45. С. 37—86. [Ivanov A.V., Kuzyakin A.O., Kochetkov S.N. Molecular biology of hepatitis C virus. Uspekhi Biologicheskoi Khimii = Biological Chemistry Reviews, 2005, vol. 45, pp. 37—86. (In Russ.)]
  3. Поляков Д.С., Грудинина Н.А., Соловьев К.В., Егоров В.В., Сироткин А.К., Алейникова Т.Д., Тотолян Арег А., Шавловский М.М. Бета-2-микроглобулиновый амилоидоз: фибриллогенез природного и рекомбинантных бета-2-микроглобулинов человека // Медицинский академический журнал. 2010. Т. 10, № 2. С. 40–49. [Poyakov D.S., Grudinina N.A., Solovyov K.V., Egorov V.V., Sirotkin A.K., Aleinicova T.D., Totolian Areg A., Shavlovsky M.M. Bela-2-microglobuline amyloidosis: fibrillogenesis of natural and recombinant human beta-2-microglobulines. Meditsinskii akademicheskii zhurnal = Medical Aсademical Journal, 2010, vol. 10, no. 2, pp. 40–49. (In Russ.)]
  4. Поляков Д.С., Грудинина Н.А., Соловьев К.В., Егоров В.В., Сироткин А.К., Алейникова Т.Д., Тотолян Арег А., Шавловский М.М. Получение рекомбинантного β2-микроглобулина человека и его фибриллогенез при низких и нейтральных значениях рН // Молекулярная медицина. 2011. № 2. С. 36–39. [Polyakov D.S., Grudinina N.A., Solovyov K.V., Egorov V.V., Sirotkin A.K., Aleinikova T.D., Totolian Areg A., Shavlovsky M.M. Production of recombinant human β2-microglobulin and its amyloid fibril formation at acidic and neutral pH. Molekulyarnaya meditsina = Molecular Medicine, 2011, no. 2, pp. 36–39. (In Russ.)]
  5. Поляков Д.С., Сахабеев Р.Г., Шавловский М.М. Частичная денатурация рекомбинантного белка для его аффинного выделения // Прикладная биохимия и микробиология. 2016. Т. 52, № 1. С. 122–127. [Polyakov D.S., Sakhabeyev R.G., Shavlovsky M.M. Partial denaturation of recombinant protein for affinity purification. Prikladnaya biokhimiya i mikrobiologiya = Applied Biochemistry and Microbiology, 2016, vol. 52, no. 1, pp. 122–127. (In Russ.)]
  6. Поляков Д.С., Тотолян Арег А., Шавловский М.М. Получение природного бета-2-микроглобулина человека // Молекулярная медицина. 2010. № 6. С. 39–43. [Polyakov D.S., Totolian Areg A., Shavlovsky M.M. Isolation of native human β-2-microglobulin. Molekulyarnaya meditsina = Molecular Medicine, 2010, no. 6, pp. 39–43. (In Russ.)]
  7. Поляков Д.С., Шавловский М.М. Молекулярные основы β2-микроглобулинового амилоидоза // Медицинский академический журнал. 2014. Т. 14, № 1. С. 24–41. [Polyakov D.S., Shavlovsky M.M. Molecular basis of β2-microglobulin amyloidosis. Meditsinskii akademicheskii zhurnal = Medical Aсademical Journal, 2014, vol. 14, no. 1, pp. 24–41. (In Russ.)]
  8. Berka U., Hamann M.V., Lindemann D. Early events in foamy virus — host interaction and intracellular trafficking. Viruses, 2013, vol. 5, pp. 1055–1074.
  9. Bulina M.E., Chudakov D.M., Mudrik N.N., Lukyanov K.A. Interconversion of anthozoa GFP-like fluorescent and non-fluorescent proteins by mutagenesis. BMC Biochem., 2002, vol. 3, p. 7.
  10. Chong C.S., Cao M., Wong W.W., Fischer K.P., Addison W.R., Kwon G.S., Tyrrell D.L., Samuel J. Enhancement of T helper type 1 immune responses against hepatitis B virus core antigen by PLGA nanoparticle vaccine delivery. J. Control Release, 2005, no. 102 (1), pp. 85–99. doi: 10.1016/j.jconrel.2004.09.014
  11. Korzhikov V., Averianov I., Litvinchuk E., Tennikova T. Polyester-based microparticles of different hydrophobicity: the patterns of lipophilic drug entrapment and release. J. Microencapsul., 2016, vol. 33 (3), pp. 199–208. doi: 10.3109/02652048.2016.1144818
  12. Solovyov K.V., Kern A.M., Grudinina N.A., Aleynikova T.D., Polyakov D.S., Morozova I.V., Shavlovsky M.M. Genetic structures and conditions of their expression, which allow receiving native recombinant proteins with high output. Int. J. Biomed., 2012, vol. 2, iss. 1, pp. 45–49.
  13. Solovyov K.V., Polyakov D.S., Grudinina N.A., Egorov V.V., Morozova I.V., Aleynikova T.D., Shavlovsky M.M. Expression in E. coli and purification of the fibrillogenic fusion proteins TTR-sfGFP and β2M-sfGFP. Prep. Biochem. Biotechnol., 2011, vol. 41, iss. 4, pp. 337–349.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Поляков Д.С., Антимонова О.И., Сахабеев Р.Г., Грудинина Н.А., Ходова А.Е., Синицына Е.С., Коржиков-Влах В.А., Тенникова Т.Б., Шавловский М.М., 2017

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».