Диагностическое и прогностическое значение биохимических маркеров эндотелиальной дисфункции у пациентов с дисциркуляторной энцефалопатией, перенесших COVID-19

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Цереброваскулярные заболевания и COVID-19 являются коморбидными состояниями. Эндотелиальная дисфункция – один из патогенетических механизмов развития цереброваскулярных заболеваний и COVID-19. Лабораторным отображением эндотелиальной дисфункции служит изменение уровня биохимических маркеров дисфункции эндотелия в сыворотке крови пациентов.

Цель – изучение диагностического и прогностического значения биохимических маркеров эндотелиальной дисфункции у пациентов с дисциркуляторной энцефалопатией (ДЭ), перенесших COVID-19.

Материал и методы. За период с 01.03.2022 по 31.05.22 было обследовано 172 пациента, в том числе 137 (79,6%) женщин и 35 (20,4%) мужчин, перенесших COVID-19, которые проходит обследование на базе поликлиники № 2 Центральной клинической медико-санитарной части им. заслуженного врача России В.А. Егорова г. Ульяновска. Среднее время от момента заболевания COVID-19 до осмотра составило 4,8 мес. ДЭ не была выявлена у 6% пациентов, перенесших COVID-19, I стадия ДЭ имелась у 45%, II стадия – у 27%, III стадия – у 22% участников. Забор крови был проведен однократно в период обследования. В сыворотке крови исследовались уровни васкулоэндотелиального фактора роста (VEGFA), интерлейкинов 6, 10, 18, фактора некроза опухоли-альфа, моноцитарного хемотаксического белка 1. Для проверки гипотезы о различии выборок групп больных использовался U-критерий Манна–Уитни. Для всех видов статистического анализа различия считались достоверными при достигнутом уровне значимости p <0,05.

Результаты. По данным нашего исследования, с увеличением возраста пациентов, перенесших COVID-19, и стадии ДЭ нарастал уровень VEGFA в сыворотке крови (p <0,05).

Заключение. Из изученных цитокинов прогностическую роль в качестве маркера эндотелиальной дисфункции показал VEGFA. Его высокий уровень в сыворотке крови ассоциирован с возрастом больных ДЭ, перенесших COVID-19, и со стадией ДЭ у них.

Об авторах

Виктор Владимирович Машин

ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Автор, ответственный за переписку.
Email: victor_mashin@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-0085-3727

д.м.н., профессор, зав кафедрой неврологии, нейрохирургии и медицинской реабилитации

Россия, Ульяновск

Динара Ришатовна Долгова

ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Email: dolgova.dinara@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-5475-7031

к.б.н., доцент кафедры физиологии и патофизиологии, директор Научно-исследовательского медико-биологического центра

Россия, Ульяновск

Людмила Анатольевна Белова

ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Email: labelova@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9585-5604

д.м.н., профессор, декан медицинского факультета Института медицины, экологии и физической культуры

Россия, Ульяновск

Елена Юрьевна Котова

ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Email: ko-tovatv@mail.ru
ORCID iD: 0009-0004-2293-3183

к.м.н., доцент кафедры неврологии, нейрохирургии и медицинской реабилитации

Россия, Ульяновск

Ландыш Раилевна Круглова

ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Email: lali.04@bk.ru
ORCID iD: 0009-0008-9665-6915

аспирант кафедры неврологии, нейрохирургии и медицинской реабилитации

Россия, Ульяновск

Анастасия Павловна Статенина

ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Email: nastya.statenina@mail.ru

студентка медицинского факультета им. Т.З. Биктимирова Института медицины, экологии и физической культуры (группа ЛД-О-19/3)

Россия, Ульяновск

Андрей Александрович Козин

ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Email: supervaclove@gmail.ru

студент медицинского факультета им. Т.З. Биктимирова Института медицины, экологии и физической культуры (группа ЛД-О-17/6)

Россия, Ульяновск

Румия Рамильевна Исрафилова

ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Email: israfilovarr@gmail.ru

студентка медицинского факультета им. Т.З. Биктимирова Института медицины, экологии и физической культуры (группа ЛД-О-18/9)

Россия, Ульяновск

Дарья Константиновна Мартынова

ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Email: martynova.daria2000@yandex.ru

студентка медицинского факультета им. Т.З. Биктимирова Института медицины, экологии и физической культуры (группа ЛД-О-18/11)

Россия, Ульяновск

Список литературы

  1. Inciardi R.M Cardiac involvement in a patient with coronavirus disease 2019 (COVID-19). JAMA Cardiol. 2020; 5(7): 819–24. https://dx.doi.org/10.1001/jamacardio.2020.1096.
  2. Huang C., Wang Y., Li X. et al. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet. 2020; 395(10223): 497–506. https://dx.doi.org/10.1016/S0140-6736(20)30183-5.
  3. Mao L., Jin H., Wang M. et al. Neurologic manifestations of hospitalized patients with coronavirus disease 2019 in Wuhan, China. JAMA Neurol. 2020; 77(6): 683–90. https://dx.doi.org/10.1001/jamaneurol.2020.1127.
  4. Wang D., Hu B., Hu C. et al. Clinical characteristics of 138 hospitalized patients with 2019 novel coronavirus-infected pneumonia in Wuhan, China. JAMA. 2020; 323(11): 1061–69. https://dx.doi.org/10.1001/jama.2020.1585. Erratum in: JAMA. 2021; 325(11): 1113.
  5. Garrigues E., Janvier P., Kherabi Y. et al. Post-discharge persistent symptoms and health-related quality of life after hospitalization for COVID-19. J Infect. 2020; 81(6): e4–e6. https://dx.doi.org/10.1016/j.jinf.2020.08.029.
  6. Bourgonje A.R., Abdulle A.E., Timens W. et al. Angiotensinconverting enzyme 2 (ACE2), SARS-CoV-2 and the pathophysiology of coronavirus disease 2019 (COVID-19). J Pathol. 2020; 251(3): 228–48. https://dx.doi.org/10.1002/path.5471.
  7. Barrantes F.J. Central nervous system targets and routes for SARS-CoV-2: Current views and new hypotheses. ACS Chem Neurosci. 2020; 11(18): 2793–803. https://dx.doi.org/10.1021/acschemneuro.0c00434.
  8. Brann D.H., Tsukahara T., Weinreb C. et al. Non-neuronal expression of SARS-CoV-2 entry genes in the olfactory system suggests mechanisms underlying COVID-19-associated anosmia. SciAdv. 2020; 6(31): eabc5801. https://dx.doi.org/10.1126/sciadv.abc5801.
  9. Pezzini A., Padovani A. Lifting the mask on neurological manifestations of COVID-19. Nat Rev Neurol. 2020; 16(11): 636–44. https://dx.doi.org/10.1038/s41582-020-0398-3.
  10. Jose R.J., Manuel A. COVID-19 cytokine storm: The interplay between inflammation and coagulation. Lancet Respir Med. 2020; 8(6): e46–47. https://dx.doi.org/10.1016/S2213-2600(20)30216-2.
  11. Верткин А.Л., Авдеев С.Н., Ройтман Е.В. с соавт. Вопросы лечения COVID-19 с позиции коррекции эндотелиопатии и профилактики тромботических осложнений. Согласованная позиция экспертов. Профилактическая медицина. 2021; 24(4): 45–51. [Vertkin A.L., Avdeev S.N., Roitman E.V. et al. Questions of COVID-19 treatment from the position of correction of endotheliopathy and prevention of thrombotic complications. Coordinated position of experts. Profilakticheskaya meditsina = Preventive Medicine. 2021; 24(4): 45–51 (In Russ.)]. https://dx.doi.org/10.17116/profmed20212404145. EDN: MYILVR.
  12. Mehta P., McAuley D.F., Brown M. et al. COVID-19: Consider cytokine storm syndromes and immunosuppression. Lancet. 2020; 395(10229): 1033–34. https://dx.doi.org/10.1016/S0140-6736(20)30628-0.
  13. Бобкова С.С., Жуков А.А., Проценко Д.Н. с соавт. Критический анализ концепции «цитокиновой бури» у пациентов с новой коронавирусной инфекцией COVID-19. Обзор литературы. Вестник интенсивной терапии им. А.И. Салтанова. 2021; (1): 57–68. [Bobkova S.S., Zhukov A.A., Protsenko D.N. et al. Critical analysis of «cytokine storm» concept in patients with new coronavirus infection COVID-19. Literature review. Vestnik intensivnoy terapii imeni A.I. Saltanova = A.I. Saltanov Bulletin of Intensive Care. 2021; (1): 57–68 (In Russ.)]. https://dx.doi.org/10.21320/1818-474X-2021-1-57-68. EDN: APFKIT.
  14. Liu Y., Zhang C., Huang F. et al. Elevated plasma level of selective cytokines in COVID-19 patients reflect viral load and lung injury. Natl Sci Rev. 2020; 7(6): 1003–11. https://dx.doi.org/10.1093/nsr/nwaa037.
  15. Liu Jing, Li S., Liu Jia et al. Longitudinal characteristics of lymphocyte responses and cytokine profiles in the peripheral blood of SARS-CoV-2 infected patients. EBioMedicine. 2020; 55: 102763. https://dx.doi.org/10.1016/j.ebiom.2020.102763.
  16. Al-Faraj H.A.M.H., Al-Hasnawi A.T.N., Al-Mamori M.A.A. Elevated serum levels of MCP-1 and IP-10 chemokines in patients with COVID-19 infection. NeuroQuantology. 2022; 20(6): 6769–79.
  17. Гришаева А.А., Понежева Ж.Б., Чанышев М.Д. с соавт. Состояние цитокиновой системы у больных с тяжелой формой COVID- 19. Лечащий врач. 2021; (6): 48–51. [Grishaeva A.A., Ponezheva Zh.B., Chanyshev M.D. et al. The state of the cytokine system in patients with severe COVID-19. Lechashchiy vrach = Attending Physician. 2021; (6): 48–51 (In Russ.)]. https://dx.doi.org/10.51793/OS.2021.24.6.010. EDN: QXGEAQ.
  18. Chen Y., Wang J., Liu C. et al. IP-10 and MCP-1 as biomarkers associated with disease severity of COVID-19. Mol Med. 2020; 26(1): 97. https://dx.doi.org/10.1186/s10020-020-00230-x.
  19. Han H., Ma Q., Li C. et al. Profiling serum cytokines in COVID-19 patients reveals IL-6 and IL-10 are disease severity predictors. Emerg Microbes Infect. 2020; 9(1): 1123–30. https://dx.doi.org/10.1080/22221751.2020.1770129.
  20. Del Valle D.M., KimSchulze S., Huang H. et al. An inflammatory cytokine signature pre-dicts COVID19 severity and survival. Nat Med. 2020; 26(10): 1636–43. https://dx.doi.org/10.1038/s41591-020-1051-9.
  21. Liu Y., Chen D., Hou J. et al. An intercorrelated cytokine network identified at the center of cytokine storm predicted COVID-19 prognosis. Cytokine. 2021; 138: 155365. https://dx.doi.org/10.1016/j.cyto.2020.155365.
  22. Chen G., Wu D.I., Guo W. et al. Clinical and immunological features of severe and moderate coronavirus disease 2019. J Clin Invest. 2020; 130(5): 2620–29. https://dx.doi.org/10.1172/JCI137244.
  23. Herold T., Jurinovic V., Arnreich C. et al. Elevated levels of IL-6 and CRP predict the need for mechanical ventilation in COVID-19. J Allergy Clin Immunol. 2020; 146(1): 128–36.e4. https://dx.doi.org/10.1016/j.jaci.2020.05.008.
  24. Ruan Q., Yang K., Wang W. et al. Clinical predictors of mortality due to COVID-19 based on an analysis of data of 150 patients from Wuhan, China. Intensive Care Med. 2020; 46(5): 846–48. https://dx.doi.org/10.1007/s00134-020-05991.
  25. Chen G., Wu D., Guo W. et al. Clinical and immunologic features in severe and moderate coronavirus disease 2019. J Clin Invest. 2020; 130(5): 2620–29. https://dx.doi.org/10.1172/JCI137244.
  26. Zhu Z., Cai T., Fan L. et al. Clinical value of immune-inflammatory parameters to assess the severity of coronavirus disease 2019. Int J Infect Dis. 2020; 95:332–39. https://dx.doi.org/10.1016/j.ijid.2020.04.041
  27. Wan S, Yi Q, Fan S, et al. Relationships among lymphocyte subsets, cytokines, and the pulmonary inflammation index in coronavirus (COVID-19) infected patients. Br J Haematol. 2020; 189(3): 428–37. https://dx.doi.org/10.1111/bjh.16659.
  28. Popa C., Netea M.G., van Riel P.L.C.M. et al. The role of TNF-α in chronic inflammato-ry conditions, intermediary metabolism, and cardiovascular risk. J. Lipid Res. 2007; 48(4): 751–62. https://dx.doi.org/10.1194/jlr.R600021-JLR200.
  29. Долгополов И.С., Менткевич Г.Л., Рыков М.Ю., Чичановская Л.В. Неврологические нарушения у пациентов с long COVID синдромом и методы клеточной терапии для их коррекции: обзор литературы. Сеченовский вестник. 2021; 12(3): 56–67. [Dolgopolov I.S., Mentkevich G.L., Rykov M.Y., Chichanovskaya L.V. Neurological disorders in patients with long COVID syndrome and methods of cell therapy for their correction: literature review. Sechenovskiy vestnik = Bulletin of Sechenov University. 2021; 12(3): 56–67 (In Russ.)]. https://dx.doi.org/10.47093/2218-7332.2021.12.3.56-67. EDN: LDAZRR.
  30. Mao L., Jin H., Wang M., et al. Neurologic manifestations of hospitalized patients with coronavirus disease 2019 in Wuhan, China. JAMA Neurol. 2020; 77(6): 683–90. https://dx.doi.org/10.1001/jamaneurol.2020.1127.
  31. Guan W.J., Ni Z.Y., Hu Y. et al. Clinical characteristics of coronavirus disease 2019 in China. N Engl J Med. 2020; 382(18): 1708–20. https://dx.doi.org/10.1056/NEJMoa2002032.
  32. Carfi A., Bernabei R., Landi F.; Gemelli Against COVID-19 Post-Acute Care Study Group. Persistent symptoms in patients after acute COVID-19. JAMA. 2020; 324(6): 603–5. https://dx.doi.org/10.1001/jama.2020.12603.
  33. Nath A. Long-Haul COVID. Neurology. 2020; 95(13): 559–60. https://dx.doi.org/10.1212/WNL.0000000000010640.
  34. Blanco-Melo D., Nilsson-Payant B.E., Liu W.-C. et al. Imbalanced host response to SARS-CoV-2 drives development of COVID-19. Cell. 2020; 181(5): 1036–45.e9. https://dx.doi.org/10.1016/j.cell.2020.04.026
  35. Beck H., Plate K.H. Angiogenesis after cerebral ischemia. Acta Neuropathol. 2009; 117(5): 481–96. https://dx.doi.org/10.1007/s00401-009-0483-6.
  36. Конопля А.И., Ласков В.Б., Шульгинова А.А. Иммунные и оксидантные нарушения у больных с хронической ишемией мозга и их коррекция. Журнал неврологии и психиатрии им. C.C. Корсакова. 2015; 115(11): 28–32. [Konoplya A.I., Laskov V.B., Shulginova A.A. Immune and oxidative disorders in patients with chronic brain ischemia and their correction. Zhurnal nevrologii i psikhiatrii imeni S.S. Korsakova = S.S. Korsakov Journal of Neurology and Psychiatry. 2015; 115(11): 28–32 (In Russ.)]. https://dx.doi.org/10.17116/jnevro201511511128-32. EDN: VHCXBP.
  37. Shinohara T., Takahashi N., Okada N. et al. Interleukin-6 as an independent predictor of future cardiovascular events in patients with type-2 diabetes without structural heart disease. J Clin Exp Cardiology. 2012; 3(9): 209. https://dx.doi.org/10.4172/2155-9880.1000209.
  38. Danesh J., Kaptoge S., Mann A.G. et al. Long-term interleukin-6 levels and subsequent risk of coronary heart disease: Two new prospective studies and a systematic review. PLoS Med. 2008; 5(4): 78. https://dx.doi.org/10.1371/journal.pmed.0050078.
  39. Tehrani D.M., Gardin J.M., Yanez D. et al. Impact of inflammatory biomarkers on relation of high density lipoproteincholesterol with incident coronary heart disease: Cardiovascular health study. Atherosclerosis. 2013; 231(2): 246–51. https://dx.doi.org/10.1016/j.atherosclerosis.2013.08.036.
  40. Березовская Г.А., Ганюков В.И., Карпенко М.А. Рестеноз и тромбоз внутри стента: патогенетические механизмы развития и прогностические маркеры. Российский кардиологический журнал. 2012; 17(6): 91–95. [Berezovskaya G. A., Ganyukov V.I., Karpenko M.A. Restenosis and thrombosis inside the stent: pathogenetic mechanisms of development and prognostic markers. Rossiyskiy kardiologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Cardiology. 2012; 17(6): 91–95 (In Russ.)]. https://dx.doi.org/10.15829/1560-4071-2012-6-91-95. EDN: PJOIDF.
  41. Naber C.K., Frey U.H., Oldenburg O. et al. Relevance of the NOS3 T-786C and Glu298Asp variants in the endothelial nitric oxide synthase gene for cholinergic and adrenergic coronary vasomotore responses in man. Basic Res Cardiol. 2005; 100(5): 453–60. https://dx.doi.org/10.1007/s00395-005-0530-y.
  42. Куба А.А., Никонова Ю.М., Феликсова О.М. с соавт. Ассоциация генетического полиморфизма гена эндотелиальной синтазы оксида азота с сердечно-сосудистой патологией. Современные проблемы науки и образования. 2015; (3): 19. [Kuba A.A., Nikonova N.M., Feliksova O.M. et al. Association of genetic polymorphism of endothelial nitric oxide synthase gene with cardio-vascular pathology. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya = Modern Problems of Science and Education. 2015; (3): 19 (In Russ.)]. EDN: TYSGSJ.
  43. Dosenko V.E., Zagoriy V.Y., Haytovich N.V. et al. Allelic polymorphism of endothelial NO-synthase gene and its functional manifestations. Acta Biochim Pol. 2006; 53(2): 299–302.
  44. Yaghoubi A.R., Khaki-Khatibi F. T-786C single-nucleotide polymorphism (SNP) of endothelial nitric oxide synthase gene and serum level of vascular endothelial relaxant factor (VERF) in nondiabetic patients with coronary artery disease. African J Biotechnol. 2012; 11(93): 15945–49.
  45. Cruz-Gonzalez I., Corra E., Sanchez-Ledesma M. et al. Association between -T786C NOS3 polymorphism and resistant hypertension: A prospective cohort study. BMC Cardiovasc Disord. 2009; 9: 35. https://dx.doi.org/10.1186/1471-2261-9-35.
  46. Страмбовская Н.Н., Витковский Ю.А., Смоляков Ю.Н. с соавт. Ишемический инсульт – заболевание с высокой степенью генетической предрасположенности. Забайкальский медицинский вестник. 2019; (1): 91–101. [Strambovskaya N.N., Vitkovsky Yu.A., Smolyakov Yu.N. et al. Ischemic stroke – a disease with a high degree of genetic predisposition. Zabaykal’skiy meditsinskiy vestnik = Transbaikal Medical Bulletin. 2019; (1): 91–101 (In Russ.)]. https://dx.doi.org/10.52485/19986173_2019_1_91. EDN: AXSBMR.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Зависимость уровня васкулоэндотелиального фактора роста, интерлейкинов 6,10,18, фактора некроза опухоли-альфа, моноцитарного хемотаксического белка 1 (пг/мл) в сыворотке крови исследованных пациентов от срока давности перенесенного COVID-19

Скачать (231KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Зависимость уровня васкулоэндотелиального фактора роста, интерлейкинов 6,10, 18, фактора некроза опухоли-альфа, моноцитарного хемотаксического белка 1 (пг/мл) в сыворотке крови пациентов от степени тяжести COVID-19

Скачать (272KB)
Метаданные
4. Рис. 3. График регрессионной функции, характеризующий зависимость показателя «возраст» от показателя «васкулоэндотелиальный фактор роста (VEGFA)»

Скачать (276KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Уровень васкулоэндотелиального фактора роста (VEGFA; пг/мл) в сыворотке крови пациентов, перенесших COVID-19, в зависимости от степени артериальной гипертензии

Скачать (138KB)
Метаданные
6. Рис. 5. Уровень васкулоэндотелиального фактора роста (VEGFA; пг/мл) в сыворотке крови пациентов, перенесших COVID-19, в зависимости от наличия и стадий дисциркуляторной энцефалопатии

Скачать (147KB)
Метаданные
7. Рис. 6. Частота встречаемости SNP гена NOS3 786Т/С у пациентов с дисциркуляторной энцефалопатией

Скачать (215KB)
Метаданные

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».