Опыт продленного культивирования эмбрионов человека in vitro в питательной среде с эндометрием. Пилотное исследование

Обоснование. В настоящее время представление о начальных этапах эмбриогенеза человека ограничено периодом от стадии зиготы до стадии бластоцисты. Основным способом изучения имплантации и постимплантационного периода является создание моделей взаимодействия эмбриона и эндометрия in vitro, максимально точно имитирующих обозначенные процессы in vivo. На данный момент не существует модели, отражающей одновременно два процесса: взаимодействие эмбриона с субстратом, повторяющее многие аспекты нормальной имплантации, и раннее постимплантационное развитие прикрепленного эмбриона. Создание такой релевантной модели позволит изучать процессы имплантации и раннего постимплантационного развития в комплексе.

Цель исследования — оценить жизнеспособность и потенциал к развитию эмбрионов человека со стадии бластоцисты (6-го дня развития) при их длительном сокультивировании с эндометрием в питательной среде, предназначенной для культивирования до стадии бластоцисты.

Материалы и методы. Эмбрионы, полученные в результате применения вспомогательных репродуктивных технологий, культивировали с 6-го дня (со стадии бластоцисты) до 14-го дня развития в питательной среде, предназначенной для культивирования до стадии бластоцисты, в присутствии эндометрия. На 14-й день развития эмбрионы и фрагменты эндометрия сначала оценивали под инвертированным микроскопом с использованием модуляционного контраста Хоффмана, затем переносили в специальную форму и заливали парафином для приготовления цитоблоков. Из полученных блоков изготавливали срезы, окрашивали их гематоксилином и эозином и проводили морфологическую оценку полученных препаратов.

Результаты. В случае 1 при визуальной оценке на 14-й день культивирования в питательной среде с эндометрием зафиксирован жизнеспособный развивающийся эмбрион без признаков деградации. По данным гистологического исследования, фрагмент эндометрия соответствовал секреторной фазе цикла. При морфологической оценке концептуса детектированы клетки трофобласта. В случае 2 при визуальной оценке на 14-й день культивирования в питательной среде с эндометрием зафиксирован жизнеспособный эмбрион без признаков деградации, находящийся в непосредственном контакте с эндометриальным компонентом. По данным гистологического исследования, визуализируется фрагмент поверхностного (люминального) эпителия секреторного эндометрия. При морфологической оценке эмбриона детектированы клетки трофобласта.

Заключение. Полученные данные свидетельствуют о способности эмбриона к дальнейшему развитию с 6-го дня (со стадии бластоцисты) до 14-го дня развития в питательной среде, предназначенной для культивирования до стадии бластоцисты, в присутствии эндометриального компонента. Образец может служить экспериментальной моделью как для оценки рецептивности эндометрия in vitro, так и для изучения межклеточных взаимодействий в процессе имплантации.