Разработка протокола трансформации Lacticaseibacillus paracasei RG

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Молочнокислые бактерии, традиционно используемые в пищевой промышленности, рассматриваются в качестве платформы для создания рекомбинантных штаммов для экспрессии и доставки протективно-значимых антигенов и других биологически активных молекул в желудочно-кишечный тракт сельскохозяйственных животных и человека. Одним из препятствий для получения рекомбинантных штаммов молочнокислых бактерий является их низкая эффективность трансформации плазмидной ДНК. В качестве объекта исследований был выбран пробиотический штамм Lacticaseibacillus paracasei RG, безопасный и способный преодолевать кислотный барьер желудка. Было исследовано влияние условий выращивания, подготовки компетентных клеток и режима электропорации на эффективность трансформации L. paracasei RG вектором pTRKH2, в результате чего создан протокол эффективной трансформации L. paracasei RG рекомбинантной ДНК.

Об авторах

П. С. Дудик

ФИЦ Фундаментальные основы биотехнологии РАН

Email: polinadu05@gmail.com
Москва, 119071, Россия

Д. К. Армянинова

ФИЦ Фундаментальные основы биотехнологии РАН

Email: polinadu05@gmail.com
Москва, 119071, Россия

А. В. Гончаренко

ФИЦ Фундаментальные основы биотехнологии РАН

Автор, ответственный за переписку.
Email: polinadu05@gmail.com
Москва, 119071, Россия

Список литературы

  1. Государственная Фармакопея Российской Федерации. 13 изд. Т. 2. Капсулы ОФС. ОФС.1.7.2.0008.15. Россия: Москва, 2015.
  2. Börner R. A., Kandasamy V., Axelsen A. M., Nielsen A. T., Bosma E. F. Genome editing of lactic acid bacteria: opportunities for food, feed, pharma and biotech // FEMS Microbiol. Lett. 2019. V. 366. Art. fny291. P. 1–12. https://doi.org/10.1093/femsle/fny291
  3. LeCureux J.S., Dean G. A. Lactobacillus mucosal vaccine vectors: immune responses against bacterial and viral antigens // MSphere. 2018. V. 3. Art. e00061-18. https://doi.org/10.1128/msphere.00061-18
  4. Morovic W., Roper J., Smith A., Mukerji P., Stahl B., Caverly Rae J., Ouwehand A. C. Safety evaluation of HOWARU® Restore (Lactobacillus acidophilus NCFM, Lactobacillus paracasei Lpc-37, Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bl-04 and B. lactis Bi-07) for antibiotic resistance, genomic risk factors, and acute toxicity // Food Chem. Toxicol. 2017. V. 110. P. 316‒324. https://doi.org/10.1016/j.fct.2017.10.037
  5. Nickoloff J. A. (ed.) Electroporation protocols for microorganisms. USA, New Jersey: Humana Press, 1995. 374 p.
  6. O’Sullivan D.J., Klaenhammer T. D. High- and low-copy-number Lactococcus shuttle cloning vectors with features for clone screening // Gene. 1993. V. 137. P. 227‒231. https://doi.org/10.1016/0378-1119(93)90011-Q
  7. Palomino M. M., Allievi C. M., Prado-Acosta M., Sanchez-Rivas C., Ruzal S. M. New method for electroporation of Lactobacillus species grown in high salt // J. Microbiol. Meth. 2010. V. 83. P. 164–167. https://doi.org/10.1016/j.mimet.2010.08.017
  8. Song X., Huang H., Xiong Z., Xia Y., Wang G., Yin B., Ai L. Characterization of a cryptic plasmid isolated from Lactobacillus casei CP002616 and construction of shuttle vectors based on its replicon // J. Dairy Sci. 2018. V. 101. P. 2875–2886. https://doi.org/10.3168/jds.2017-13771
  9. Welker D. L., Hughes J.E, Steele J. L., Broadbent J. R. High efficiency electrotransformation of Lactobacillus casei // FEMS Microbiol. Lett. 2015. V. 362. P. 1‒6. https://doi.org/10.1093/femsle/fnu033
  10. Welker D. L., Crowley B. L., Evans J. B., Welker M. H., Broadbent J. R., Roberts R. F., Mills D. A. Transformation of Lactiplantibacillus plantarum and Apilactobacillus kunkeei is influenced by recipient cell growth temperature, vector replicon, and DNA methylation // J. Microbiol. Meth. 2020. V. 175. Art. 105967. https://doi.org/10.1016/J.MIMET.2020.105967
  11. Wyszyńska A., Kobierecka P., Bardowski J., Jagusztyn-Krynicka E. K. Lactic acid bacteria – 20 years exploring their potential as live vectors for mucosal vaccination // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2015. V. 99. P. 2967‒2977. https://doi.org/10.1007/S00253-015-6498-0

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Российская академия наук, 2025

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».