Основные свойства мезенхимных стромальных клеток из костного мозга доноров: поверхностные маркеры


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования. Охарактеризовать поверхностный фенотип и выполнить цитогенетический анализ мезенхимных стромальных клеток (МСК) доноров костного мозга (КМ).
Материалы и методы. В работе проанализированы образцы КМ 11 здоровых доноров. Фенотип полученных МСК анализировали с помощью проточной цитофлюорометрии. На 1-2-м пассаже проводили хромосомный анализ.
Результаты. Поверхностный фенотип МСК был стабилен в течение 8 пассажей и соответствовал мировому стандарту для этой популяции клеток. Маркер NGFR+ обнаруживали только на первых 2 пассажах, а количество клеток СD146+ уменьшалось до 50% по мере последующих пассажей, что подтверждает утрату способности МСК к дифференцировкам в нейральном и эндотелиальном направлениях. Стабильно МСК способны дифференцироваться только в мезенхимном направлении. При выявлении хромосомных перестроек в МСК на различных этапах культивирования клональных перестроек выявлено не было ни в одном случае. Однако хромосомные аберрации были обнаружены в 3-10% метафаз на 1-м и 2-м пассажах, что может быть связано с нестабильностью хромосом в первичных культурах.
Заключение. Совокупность полученных данных позволяет считать, что проанализированные МСК соответствуют общепринятым мировым стандартам.

Об авторах

Дарья Анатольевна Свинарева

Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"

Email: svinareva@gmail.com
лаборатория физиологии кроветворения, отделение высокодозной химиотерапии гемобластозов и трансплантации костного мозга- канд. биол. наук, науч. сотр; Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"

Ирина Николаевна Шипунова

Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"

Email: iranifontova@yndex.ru
лаборатория физиологии кроветворения, отделение высокодозной химиотерапии гемобластозов и трансплантации костного мозгаканд. биол. наук, науч. сотр; Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"

Ю В Ольшанская

Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"ФГУ ФНКЦ ДГОИ Росздрава

Email: olsh@blood.ru
лаборатория физиологии кроветворения, отделение высокодозной химиотерапии гемобластозов и трансплантации костного мозгалаборатория цитогенетикиканд. мед. наук., науч. сотр; Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"ФГУ ФНКЦ ДГОИ Росздрава

Кира Сергеевна Момотюк

Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"

Email: donnadomna@mail.ru
лаборатория физиологии кроветворения, отделение высокодозной химиотерапии гемобластозов и трансплантации костного мозгаканд. мед. наук, зав. лаб; Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"

Нина Иосифовна Дризе

Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"

Email: ndrize@yandex.ru
лаборатория физиологии кроветворения, отделение высокодозной химиотерапии гемобластозов и трансплантации костного мозгад-р биол. наук, зав. лаб; Учреждение РАМН "Гематологический научный центр РАМН"

Валерий Григорьевич Савченко

НИИ трансплантации костного мозга и молекулярной гематологии УРАМН ГНЦ РАМН

Email: SVG@blood.ru
чл.-кор. РАМН, проф., д-р мед. наук, дир; НИИ трансплантации костного мозга и молекулярной гематологии УРАМН ГНЦ РАМН

Список литературы

  1. Caplan A. I. Mesenchymal stem cells. J. Orthop. Res. 1991; 9 (5): 641-650.
  2. Horwitz E. M., Le Blanc K., Dominici M. et al. Clarification of the nomenclature for MSC: The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy 2005; 7 (5): 393-395.
  3. Jorgensen C., Gordeladze J., Noel D. Tissue engineering through autologous mesenchymal stem cells. Curr. Opin. Biotechnol. 2004; 15 (5): 406-410.
  4. Caplan A. I. Osteogenesis imperfecta, rehabilitation medicine, fundamental research and mesenchymal stem cells. Connect. Tissue Res. 1995; 31 (4): S9-S14.
  5. Horwitz E. M., Prockop D. J., Fitzpatrick L. A. et al. Transplantability and therapeutic effects of bone marrow-derived mesenchymal cells in children with osteogenesis imperfecta. Nat. Med. 1999; 5 (3): 309-313.
  6. Deans R. J., Moseley A. B. Mesenchymal stem cells: biology and potential clinical uses. Exp. Hematol. 2000; 28 (8): 875- 884.
  7. Vercelli A., Mereuta O. M., Garbossa D. et al. Human mesenchymal stem cell transplantation extends survival, improves motor performance and decreases neuroinflammation in mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurobiol. Dis. 2008; 31 (3): 395-405.
  8. Tyndall A., Uccelli A. Multipotent mesenchymal stromal cells for autoimmune diseases: teaching new dogs old tricks. Bone Marrow Transplant. 2009; 43 (11): 821-828.
  9. Le Blanc K., Rasmusson I., Sundberg B. et al. Treatment of severe acute graft-versus-host disease with third party haploidentical mesenchymal stem cells. Lancet 2004; 363 (9419): 1439- 1441.
  10. Deeg H. J. How I treat refractory acute GVHD. Blood 2007; 109 (10): 4119-4126.
  11. Jones B. J., McTaggart S. J. Immunosuppression by mesenchymal stromal cells: from culture to clinic. Exp. Hematol. 2008; 36 (6): 733-741.
  12. Rosland G. V., Svendsen A., Torsvik A. et al. Long-term cultures of bone marrow-derived human mesenchymal stem cells frequently undergo spontaneous malignant transformation. Cancer Res. 2009; 69 (13): 5331-5339.
  13. Rubio D., Garcia-Castro J., Martin M. C. et al. Spontaneous human adult stem cell transformation. Cancer Res. 2005; 65 (8): 3035-3039.
  14. Wang Y., Huso D. L., Harrington J. et al. Outgrowth of a transformed cell population derived from normal human BM mesenchymal stem cell culture. Cytotherapy 2005; 7 (6): 509-519.
  15. Bernardo M. E., Zaffaroni N., Novara F. et al. Human bone marrow derived mesenchymal stem cells do not undergo transformation after long-term in vitro culture and do not exhibit telomere maintenance mechanisms. Cancer Res. 2007; 67 (19): 9142-9149.
  16. Meza-Zepeda L. A., Noer A., Dahl J. A. et al. High-resolution analysis of genetic stability of human adipose tissue stem cells cultured to senescence. J. Cell Mol. Med. 2008; 12 (2): 553- 563.
  17. Lange C., Cakiroglu F., Spiess A. N. et al. Accelerated and safe expansion of human mesenchymal stromal cells in animal serum-free medium for transplantation and regenerative medicine. J. Cell Physiol. 2007; 213 (1): 18-26.
  18. Seabright M. A rapid banding technique for human chromosomes. Lancet 1971; 2 (7731): 971-972.
  19. Dominici M., Le Blanc K., Mueller I. et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy 2006; 8 (4): 315-317.
  20. Свинарева Д. А., Петрова Т. В., Шипунова (Нифонтова) И. Н. и др. Исследование параметров дифференцировки мезенхимных стромальных клеток у здоровых доноров и больных апластической анемией. Tep. apx. 2009; 81 (7): 66-70.
  21. Sacchetti B., Funari A., Michienzi S. et al. Self-renewing osteoprogenitors in bone marrow sinusoids can organize a hematopoietic microenvironment. Cell 2007; 131 (2): 324-336.
  22. Jones E. A., Kinsey S. E., English A. et al. Isolation and characterization of bone marrow multipotential mesenchymal progenitor cells. Arthritis. Rheum. 2002; 46 (12): 3349-3360.
  23. Quirici N., Soligo D., Bossolasco P. et al. Isolation of bone marrow mesenchymal stem cells by anti-nerve growth factor receptor antibodies. Exp. Hematol. 2002; 30 (7): 783-791.
  24. Buhring H. J., Battula V. L., Treml S. et al. Novel markers for the prospective isolation of human MSC. Ann. N. Y. Acad. Sci. 2007; 1106: 262-271.
  25. Zhang Z. X., Guan L. X., Zhang K. et al. Cytogenetic analysis of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells passaged in vitro. Cell Biol. Int. 2007; 31 (6): 645-648.
  26. Mareschi K., Ferrero I., Rustichelli D. et al. Expansion of mesenchymal stem cells isolated from pediatric and adult donor bone marrow. J. Cell Biochem. 2006; 97 (4): 744-754.
  27. Little M. P. A comparison of the degree of curvature in the cancer incidence dose-response in Japanese atomic bomb survivors with that in chromosome aberrations measured in vitro. Int. J. Radiat. Biol. 2000; 76 (10): 1365-1375.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО "Консилиум Медикум", 2010

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
 
 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».