ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯТ-КЛЕТОЧНОЙ КЛОНАЛЬНОСТИ


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования. При дифференциальной диагностике реактивной Т-клеточной пролиферации
и опухолевой важно подтвердить клональность Т-клеток. Классические методы гистологии
и иммунофенотипирования не позволяют оценить Т-клеточную клональность. Мы приводим
наш опыт определения Т-клеточной клональности по реаранжировкам у-цепи Т-клеточного
рецептора (TCRy).
Материалы и методы. Определение Т-клеточной клональности по реаранжировкам у-цепи
Т-клеточного рецептора проводилось при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим
анализом конформационного полиморфизма одноцепочечных продуктов (SSCP).
Обследовали 20 здоровых (доноров), 28 больных с Т-клеточными опухолями и 26 с различными
не Т-клеточными опухолями и реактивными процессами.
Результаты. Выявляемость Т-клеточной клональности у больных с доказанными Т-клеточными
лимфомами составила 82% (23/28), при этом у всех здоровых (доноров) продемонстрирован
поликлональный характер реаранжировок TCRy. Чувствительность метода составила
2,5, 7 и 10% для костного мозга, селезенки и периферической крови соответственно.
Заключение. Метод ПЦР-SSCP для TCRy является хорошим дополнением к классическим цитологическим,
гистологическим и иммунофенотипическим методам в диагностике Т-клеточных
лимфатических опухолей.

Об авторах

Ю В Сидорова

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Е А Никитин

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

М Пекло

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Т Н Власик

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Р С Самойлова

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

С К Кравченко

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

А Л Меликян

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Ю Е Виноградова

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

А В Пивник

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

А Б Судариков

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Список литературы

  1. Воробьев А. И., Кременецкая А. М., Харазшивили Д. Опухоли лимфатической системы. Гематол. и трансфузиол 2000; 3: 1-14.
  2. WHO. Classification of neoplasms of the hematopoietic amlymphoid tissues / Harris N. L., Jaffe E. S., Diebold J. et al Airlie House, Virginia 1997.
  3. Никитин E. А., Левина E. А., Судариков А. Б. Роль молекулярных методов в диагностике и мониторинге лимфопролиферативных заболеваний. Гематол. и трансфузиол 2001; 3: 19-26.
  4. Signoretti S., Murphy M., Cangi M. G. et al. Detection of clonal T-cell receptor у gene rearrangements in paraffm-embeddectissue by polymerase chain reaction and nonradioactive singlestrand conformational polymorphism analysis. Am. J. Pathol 1999; 154 (1): 67-75.
  5. Rezuke W. N., Abernathy E. C., Tsongalis G. J. Molecular diagnosis of B- and T-cell lymphomas: fundamental principles and clinical applications. Clin. Chem. 1997; 43 (10): 1814- 1823.
  6. Arber D. A. Molecular diagnostic approach to non-Hodgkin'slymphoma. J. Mol. Diagn. 2000; 2 (4): 178-190.
  7. Arber D. A., Braziel R. M., Bagg A., Bijwaard К. Е. Evaluation of T cell receptor testing in limphoid neoplasms. Results of a Multicenter study of 29 extracted DNA and paraffin-embedded samples. Ibid. 2001; 3 (4): 133-140.
  8. Cabras A. D., Kremer M., Schulz S. et al. Quality assessment in diagnostic molecular pathology: experience from a German- Austrian-Swiss multicenter trial. Virchows Arch. 2000; 437 (1): 46-51.
  9. Greiner Т. С. Advances in molecular hematopathology: T-cell receptor у and bcl-2 genes. Am. J. Pathol. 1999; 154 (1): 7- 10.
  10. Mainl M. K., Casorati G., Dellabona P. et al. T-cell clonality in immune responses. Immunol. Today 1999; 20 (6): 262-266.
  11. Callan M. F., Steven N., Krausa P. et al. Large clonal expansions of CD8+ T cells in acute infectious mononucleosis. Nat. Med. 1996; 2 (8): 906-911.
  12. Southern E. Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis. J. Mol. Biol. 1975; 98: 503-517.
  13. Langerok A. W., Wolvers-Tettero I. L. M., van Dongen J. J. M. Detection of T cell receptor beta (TCRB) gene rearrangement pattern in T-cell malignancies by Southern blot analysis. Leukemia 1999; 13: 965-974.
  14. Moreau E. J., Langerak A. W., van Gastel-Mol E. J. et al. Easy detection of all TCRG gene rearrangements by Southern blotanalysis: recommendations for optimal results. Ibid. 1620- 1626.
  15. Greiner T. C., Raffeld M., Lutz С. et al. Analysis of T-cell receptor-gamma gene rearrangements by denaturing gradient gelelectrophoresis of GC-clamped polymerase chain reaction products', correlation with tumor-specific sequences. Am. J. Pathol. 1995; 146: 46-55.
  16. Orita M., Iwahana H., Kanazawa H. et al. Detection of polymorphism by human DNA by gel electrophoresis as singlestrand conformation polymorphism. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1989; 86 (8): 209-214.
  17. Lynas C., Howe D. Simple, reliable detection of T cell clones by PCR-L1S-SSCP analysis of TCRy rearrangement. Mol. Cell. Probes 1998; 12: 41-48.
  18. Lefranc M.-P., Lefranc G. The T cell receptor facts book. London: Academic Press; 2001.
  19. Breit T. M., Wolvers-Tettero L. M., Hahlen K. et. al. Extensive junctional diversity of gamma delta T-cell receptors expressed by T-cell acute lymphoblastic leukemias: implications for the detection of minimal residual disease. Leukemia 1992; 6 (2): 169-170.
  20. Kneba M., Bolz I., Linke B. et al. Characterization of clonespecific rearrangement T-cell receptor gamma-chain genes in lymphomas and leukemias by the polymerase chain reaction and DNA sequencing. Blood 1994; 84 (2): 574-581.
  21. Theodorou I., Delfau Larue M. H., Bigorgne C. et al. Cutaneous T-cell infiltrates: analysis of T-cell receptor gamma gene rearrangement by polymerase chain reaction and denaturing gradient gel electrophoresis. Blood 1995; 86: 305-310.
  22. Dippel E., Assaf C., Hummel M. et al. Clonal T-cell receptor gamma-chain gene rearrangement by PCR-based GeneScan analysis in advanced cutaneous T-cell lymphoma: a critical evaluation. J. Pathol. 1999; 188: 146.
  23. Klemke С. D., Dippel E., Dembinski A. et al. Clonal T cell receptor gamma-chain gene rearrangement by PCR-based GeneScan analysis in the skin and blood of patients with parapsoriasis and early-stage mycosis fungoides. Ibid. 2002; 197 (3): 348-354.
  24. Theriault C., Galoin S., Valmary S. et al. PCR analysis of immunoglobulin Heavy chain (IgH) and TcR-gamma chain generearrangements in the diagnosis of lymphoproliferative disorders: Results of study of 525 cases. Mod. Pathol. 2000; 13 (12): 1269-1279.
  25. Miwa H., Nosaka Т., Kita K. et al. Immunogenotypes of lymphoid malignancies; the rearrangement of T cell receptor beta chain gene can occur before the gamma chain gene rearrangement. Jpn J. Cancer Res. 1988; 79 (4):484-490.
  26. Asou N., Matsuoka M., Hattori T. et al. T cell gamma gene rearrangements in hematologic neoplasms. Blood 1987; 69 (3): 968-970.
  27. Szczepanski Т., Langerak A. W., Wolvers-Tetero I. L. M. et al. Immunoglobulin and T cell receptor gene rearrangement pattern in acute lymphoblastic leukemia are less mature in adults than in children: implications for selection of PCR targets for detection of minimal residual disease. Leukemia 1998; 12: 1081-1088.
  28. Fodinger M., Winkler K., Mannhalter C., Chott A. Combined polymerase chain reaction approach for clonality detection in lymphoid neoplasms. Diagn. Mol. Pathol. 1999; 8 (2): 80-91.
  29. Wickham C. L., Lynas C., Ellard S. Detection of clonal T cell populations by high resolution PCR using fluorescently labelled nucleotides, evaluation using conventional LIS-SSCP. J. Clin. Mol. Pathol. 2000; 53: 150-154.
  30. Dippel E., Klemke D., Hummel M. et al. T-cell clonality of undetermined significance. Blood 2001; 98 (1): 247-248.
  31. Posnett D. N., Sinha R., Kabak S., Russo С. Clonal populations of T cells in normal elderly humans: the T cell equivalent to benign monoclonal gammapathy". J. Exp. Med. 1994; 179 (2): 609-618.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО "Консилиум Медикум", 2003

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
 
 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».