Антигенная и иммуногенная активность вирусоподобных частиц на основе рекомбинантных главных капсидных белков вирусов геморрагической болезни кроликов (Caliciviridae: Lagovirus) геногрупп GI1, GI2

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Вирусная геморрагическая болезнь кроликов (ГКБ) – остро протекающее высококонтагиозное заболевание, возбудителями которого являются патогенные лаговирусы геногрупп GI1 и GI2. Антитела к главному капсидному белку (Vp60) вируса ГБК являются протективными.

Цель работы – оценка антигенной и иммуногенной активности вирусоподобных частиц (ВпЧ) на основе рекомбинантных главных капсидных белков вируса ГБК геногрупп GI1 и GI2 (recVP60-GI1 и recVP60-GI2).

Материалы и методы. Полученные в бакуловирусной системе экспрессии recVP60-GI1 и recVP60-GI2 исследовали методом электронной микроскопии и вводили клинически здоровым кроликам в возрасте 1,5–3 месяца в дозе 50 мкг. На 21-й день после иммунизации кроликов заражали вирулентными штаммами вируса ГБК «Воронежский-87» и «Тула» в дозе 103 ЛД50, а сыворотки крови исследовали в ИФА на наличие антител к вирусу ГБК.

Результаты. В культуре клеток Нi-5 получены recVP60-GI1 и recVP60-GI2, обладающие гемагглютинирующей активностью и формирующие ВпЧ размером 30–40 нм. На 21-е сутки после введения ВпЧ у кроликов выявляли специфические антитела к вирусу ГБК с титром 1 : 200–1 : 800. Иммуногенная активность ВпЧ recVP60-GI1 составила 90 и 40%, а ВпЧ recVP60-GI2 – 30 и 100% после контрольного заражения вирусом ГБК 1-го и 2-го генотипа соответственно при 100% иммуногенности их смеси.

Обсуждение. ВпЧ из recVP60-GI1 и recVP60-GI2 обладают гемагглютинирующей, антигенной и иммуногенной активностью, что свидетельствует о возможности их использования в качестве компонентов препаратов для специфической профилактики ВГБК у кроликов. Результаты контрольного заражения показали необходимость наличия в составе вакцины антигена обоих генотипов вируса ГБК.

Заключение. RecVP60-GI1 и recVP60-GI2 образуют ВпЧ, обладающие гемагглютинирующей и антигенной активностью, и защищают животных при контрольном заражении вирулентными штаммами вируса ГБК генотипов GI1 и GI2 на уровне 90–100%.

Об авторах

Алексей Николаевич Мухин

ООО «Ветбиохим»

Автор, ответственный за переписку.
Email: amuhin@yahoo.com
ORCID iD: 0000-0001-7008-5212

кандидат биологических наук, главный научный сотрудник

Россия, 105120, г. Москва

Константин Петрович Алексеев

ООО «Ветбиохим»

Email: kalekseev@hotmail.com
ORCID iD: 0000-0001-9536-3127

кандидат биологических наук, старший научный сотрудник

Россия, 105120, г. Москва

Антон Геннадьевич Южаков

ФГБНУ «Федеральный научный центр – Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук»

Email: anton_oskol@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0426-9678

кандидат биологических наук, заведующий лабораторией

Россия, 109428, г. Москва

Екатерина Валерьевна Селезнева

ООО «Ветбиохим»

Email: selja07@rambler.ru
ORCID iD: 0000-0002-5592-2948

микробиолог отдела контроля качества

Россия, 105120, г. Москва

Анна Сергеевна Москвина

АНО «Научно-исследовательский институт диагностики и профилактики болезней человека и животных»

Email: annamoskvina17@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-4542-8196

кандидат биологических наук, старший научный сотрудник

Россия, 123098, г. Москва

Олег Анатольевич Верховский

АНО «Научно-исследовательский институт диагностики и профилактики болезней человека и животных»

Email: info@dpri.com
ORCID iD: 0000-0003-0784-9341

доктор биологических наук, профессор, президент

Россия, 123098, г. Москва

Тарас Иванович Алипер

ООО «Ветбиохим»

Email: coronavirusr@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-2696-1363

доктор биологических наук, профессор, директор по науке и инновациям

Россия, 105120, г. Москва

Список литературы

  1. Liu S.J., Xue H.P., Pu B.Q., Quian N.H. A new viral disease in rabbits. Anim. Husb. Vet. Med. 1984; 16(6): 253–5.
  2. Mitro S., Krauss H. Rabbit hemorrhagic disease: a review with special reference to its epizootiology. Eur. J. Epidemiol. 1993; 9(1): 70–8. https://doi.org/10.1007/bf00463093
  3. Puggioni G., Cavadini P., Maestrale C., Scivoli R., Botti G., Ligios C., et al. The new French 2010 Rabbit Hemorrhagic Disease Virus causes an RHD-like disease in the Sardinian Cape hare (Lepus capensis mediterraneus). Vet. Res. 2013; 44(1): 96. https://doi.org/10.1186/1297-9716-44-96
  4. Abrantes J., Lopes A.M., Dalton K.P., Melo P., Correia J.J., Ramada M., et al. New variant of rabbit hemorrhagic disease virus, Portugal, 2012-2013. Emerg. Infect. Dis. 2013; 19(11): 1900–1902. https://doi.org/10.3201/eid1911.130908
  5. Dalton K.P., Nicieza I., Abrantes J., Esteves P.J., Parra F. Spread of new variant RHDV in domestic rabbits on the Iberian Peninsula. Vet. Microbiol. 2014; 169(1-2): 67–73. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2013.12.015
  6. Duarte M., Henriques M., Barros S.C., Fagulha T., Ramos F., Luis T., et al. Detection of RHDV variant 2 in domestic rabbits in Azores. Vet. Rec. 2015; 176(19): 499–500. https://doi.org/10.1136/vr.h2402
  7. OIE. Rabbit Haemorrhagic Disease. USA; 2020. Available at: https://www.oie.int/wahis_2/public/wahid.php/Reviewreport/Review?page_refer=MapEventSummary&reportid=34728
  8. Le Pendu J., Abrantes J., Bertagnoli S., Guitton J.S., Le Gall-Reculé G., Lopes A.M., et al. Proposal for a unified classification system and nomenclature of lagoviruses. J. Gen. Virol. 2017; 98(7): 1658–66. https://doi.org/10.1099/jgv.0.000840
  9. Мухин А.Н., Южаков А.Г., Селезнева Е.В., Дроздова Е.И., Верховский О.А., Алипер Т.И. Вспышка заболевания, вызванная вирусом геморрагической болезни кроликов 2-го генотипа на территории РФ. Аграрная наука. 2021; (4): 25–7. https://doi.org/10.32634/0869-8155-2021-348-4-25-27 EDN: https://www.elibrary.ru/ynmqnh
  10. Burmakina G., Malogolovkina N., Lunitsin A., Titov I., Tsybanov S., Malogolovkin A. Comparative analysis of rabbit hemorrhagic disease virus strains originating from outbreaks in the Russian Federation. Arch. Virol. 2016; 161(7): 1973–9. https://doi.org/10.1007/s00705-016-2864-1
  11. ФГБНУ ФИЦВиМ. Третий случай обнаружения вируса геморрагической болезни кроликов нового типа – ВГБК-2 в Российской Федерации. Available at: https://ficvim.ru/2019/02/tretij-sluchaj-obnaruzheniya-virusa-gemorragicheskoj-bolezni-krolikov-novogo-tipa-vgbk-2-v-rossijskoj-federacii/ (in Russian)
  12. Le Gall-Recule G., Lavazza A., Marchandeau S., Bertagnoli S., Zwingelstein F., Cavadini P., et al. Emergence of a new lagovirus related to Rabbit haemorrhagic disease virus. Vet. Res. 2013; 44(1): 81. https://doi.org/10.1186/1297-9716-44-81
  13. Peacock D., Kovaliski J., Sinclair R., Mutze G., Iannella A., Capucci L. RHDV2 overcoming RHDV immunity in wild rabbits (Oryctolagus cuniculus) in Australia. Vet. Rec. 2017; 180(11): 280. https://doi.org/10.1136/vr.104135
  14. Власова Н.Н., Власов Н.А., Алексеев К.П. Конструирование плазмидного вектора, экспрессирующего VP60 вируса геморрагической болезни кроликов. Ветеринария. 2006; (11): 53–5. https://www.elibrary.ru/hvjxut
  15. Gromadzka B., Szewczyk B., Konopa G., Fitzner A., Kesy A. Recombinant VP60 in the form of virion-like particles as a potential vaccine against rabbit hemorrhagic disease virus. Acta Biochim. Pol. 2006; 53(2): 371–6.
  16. Guo H., Zhu J., Tan Y., Li C., Chen Z., Sun S., et al. Self-assembly of virus-like particles of rabbit hemorrhagic disease virus capsid protein expressed in Escherichia coli and their immunogenicity in rabbits. Antiviral Res. 2016; 131: 85–91. https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2016.04.011
  17. López-Vidal J., Gómez-Sebastián S., Bárcena J., Nuñez Mdel C., Martínez-Alonso D., Dudognon B., et al. Improved production efficiency of virus-like particles by the baculovirus expression vector system. PLoS One. 2015; 10(10): e0140039. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0140039
  18. Qi R., Miao Q., Zhu J., Tang J., Tang A., Wang X., et al. Construction and immunogenicity of novel bivalent virus-like particles bearing VP60 genes of classic RHDV(GI.1) and RHDV2(GI.2). Vet. Microbiol. 2020; 240: 108529. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2019.108529
  19. Алексеев К.П., Москвина А.С., Верховский О.А., Селезнева Е.В., Черных О.Ю., Мухин А.Н. Получение рекомбинантного капсидного белка VP60 вируса геморрагической болезни кроликов и изучение его антигенной и иммуногенной активности. Ветеринария Кубани. 2020; (5): 34–7. https://doi.org/10.33861/2071-8020-2020-5-34-37 EDN: https://www.elibrary.ru/vxzgjm
  20. Selezneva E.V., Mukhin A.N., Ezdakova I.Yu., Verkhovsky O.A., Aliper T.I. The application of recombinant Vp60-based ELISA for haemorrhagic disease virus antibody detection to vaccination against RHD. AIP Conf. Proc. 2022; 2467: 070028-1–070028-5. https://doi.org/10.1063/5.0092529
  21. Pawlikowska M., Hukowska-Szematowicz B., Deptuła W. Phylogenetic analysis of selected strains of Rabbit haemorrhagic disease virus on the basis of N-terminal fragment of the gene encoding structural protein VP60. Bull. Vet. Inst. Pulawy. 2010; 54: 129–33.
  22. Dalton K.P., Arnal J.L., Benito A.A., Chacón G., Martín Alonso J.M., Parra F. Conventional and real time RT-PCR assays for the detection and differentiation of variant rabbit hemorrhagic disease virus (RHDVb) and its recombinants. J. Virol. Methods. 2018; 251: 118–22. https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2017.10.009

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. Электронно-микроскопическое изображение вирусоподбных частиц recVP60.

Скачать (742KB)

© Мухин А.Н., Алексеев К.П., Южаков А.Г., Селезнева Е.В., Москвина А.С., Верховский О.А., Алипер Т.И., 2023

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».