Культура моноцитов как модель для тестирования фармацевтических композиций in vitro

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Целью исследования являлось изучение иммунотропных эффектов фармацевтической композиции на основе метаболитов пробиотического штамма и растительных компонентов различного происхождения на моноциты человека in vitro. Авторами предложен экзометаболит Saccharomyces boulardii (S. boulardii) как основа всех предлагаемых составов для регенерации эпителиоцитов человека. В состав смесей входили экстракт зверобоя и масло кориандра. Эффективность полученных фармацевтических средств оценивали на моноцитах взрослого человека. Мононуклеарные клетки (МНК) выделяли методом градиентного центрифугирования. Моноциты высевали в 24-луночные планшеты, сокультивировали с исследуемыми композициями (опыт) и без добавления композиций (контроль). Для идентификации поверхностных маркеров линии моноцитов/макрофагов использовались моноклональные антитела. Фенотипический анализ моноцитов проводили с помощью проточного цитофлуориметра CytoFLEX. Характеристика фенотипа M2 проводилась с использованием антител CD204, CD163 и CD206, тогда как фенотип M1 исследовался с использованием антител CD80 и CD86. Экспериментально доказано, что сокультивирование с экстрактом зверобоя индуцировало культивируемые моноциты к приобретению фенотипа M1, при этом наблюдалось достоверное повышение экспрессии всех поверхностных маркеров для TLR4 CD80 и CD86. Экспрессию маркеров фенотипа М2 по сравнению с нестимулированными клетками, экстракт кориандра напротив, достоверно подавлял. Процентное соотношение моноцитов M2-фенотипа CD204+, CD206+, CD163+ было увеличено после совместного культивирования как с маслом, так и после сокультивирования с метаболитами S. boulardii для всех исследуемых маркеров. Воздействие масла кориандра, так и смеси №1 значительно снизило экспрессию генов всех маркеров M1: TLR4, CD80, CD86. Понижающий эффект экспрессии маркеров M1 сохранялся после добавления метаболитов S. boulardii только для TLR4 и CD 86 по сравнению с контролем. Субпопуляция моноцитов фенотипа TLR4+, CD204+, CD206+, CD163+, коэкспрессирующие маркеры поляризации M1 и M2 выявлены при сокультивировании со смесями как 2, так и 3. Процент гибридных TLR4+М2-моноцитов был значительно выше в смеси 2 по сравнению со смесью 3 (p < 0,001 и p < 0,05 соответственно). Таким образом, различные исследуемые смеси вызывают поляризацию моноцитов в М1/M2 в зависимости от состава композиции, что позволит рекомендовать к использованию в косметологии и, возможно, лечебной практике в зависимости от этиологии заболевания.

Об авторах

Марина Викторовна Николенко

ФГБОУ ВО «Тюменский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

Автор, ответственный за переписку.
Email: nikolenko-marina@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-1099-0656

д.б.н., профессор кафедры микробиологии, заведующая лабораторией микробиома, регенеративной медицины и клеточных технологий

Россия, г. Тюмень

Елена Геннадьевна Костоломова

ФГБОУ ВО «Тюменский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

Email: lenakost@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0237-5522

к.б.н., доцент кафедры микробиологии

Россия, г. Тюмень

Дарья Сергеевна Сивкова

ФГБОУ ВО «Тюменский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

Email: dasivkova@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0006-5672-4608

ассистент кафедры микробиологии, младший научный сотрудник лаборатории микробиома, регенеративной медицины и клеточных технологий

Россия, г. Тюмень

Анастасия Ивановна Борисенок

ФГБОУ ВО «Тюменский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

Email: Borisenok_A@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-7388-9141

к.фарм.н., доцент кафедры микробиологии

Россия, г. Тюмень

Наталья Викторовна Барышникова

ФГБОУ ВО «Тюменский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

Email: barnv7600@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-6458-4920

старший преподаватель кафедры микробиологии

Россия, г. Тюмень

Ольга Ивановна Малишевская

ФГБОУ ВО «Тюменский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

Email: olgaivan1988@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-8709-5281

к.фарм.н., доцент кафедры фармацевтических дисциплин

Россия, г. Тюмень

Екатерина Михайловна Васева

ФГБОУ ВО «Тюменский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

Email: yuga-21@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-5556-3180

к.фарм.н., доцент кафедры фармацевтических дисциплин

Россия, г. Тюмень

Юлия Сергеевна Приходько

ФГБОУ ВО «Тюменский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

Email: 2690-1998@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5553-4814

ассистент кафедры фармацевтических дисциплин

Россия, г. Тюмень

Список литературы

  1. Барышникова Н.В., Васева Е.М., Сивкова Д.С., Борисенок А.И., Малишевская О.И., Приходько Ю.С., Николенко М.В. Влияние композиционного состава на основе экзометаболитов Saccharomyces boulardii в отношении патогенных и персистентных свойств грибов рода Сandida // Российский иммунологический журнал, 2024. Т. 27, № 3. С. 493-498. [Baryshnikova N.V., Vaseva E.M., Sivkova D.S., Borisenok A.I., Malishevskaya O.I., Prikhodko Yu.S., Nikolenko M.V. The influence of a composition based on exometabolites of Saccharomyces boulardii in relation to the pathogenic and persistent properties of fungi of the genus Candida. Rossiyskiy immunologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Immunology, 2024, Vol. 27, no. 3, pp. 493-498. (In Russ.)] doi: 10.46235/1028-7221-16693-TIO.
  2. Костоломова Е.Г., Тимохина Т.Х., Перунова Н.Б., Полянских Е.Д., Сахаров Р.А., Комарова А.В. Оценка иммуномодулирующей активности Bifidobacterium bifidum 791 на модели клеток врожденного и адаптивного иммунитета в эксперименте in vitro // Российский иммунологический журнал, 2022. Т. 25, № 2. С. 213-218. Kostolomova E.G., Timokhina T.Kh., Perunova N.B., Polyanskikh E.D., Sakharov R.A., Komarova A.V. In vitro evaluation of immunomodulatory activity of Bifidobacterium bifidum 791 in the cell model of innate and adaptive immunity. Rossiyskiy immunologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Immunology, 2022, Vol. 25, no. 2, pp. 213-218. (In Russ.)] doi: 10.46235/1028-7221-1133-IVE.
  3. Rath M., Müller I., Kropf P., Closs E.I., Munder M. Metabolism via arginase or nitric oxide synthase: two competing arginine pathways in macrophages. Front. Immunol., 2014. Vol. 5, 532. doi: 10.3389/fimmu.2014.00532.
  4. Tuzlak S., Dejean A.S., Iannacone M., Quintana F.J., Waisman A., Ginhoux F., Korn T., Becher B. Repositioning TH cell polarization from single cytokines to complex help. Nat. Immunol., 2021, Vol. 22, no. 10, pp. 1210-1217.
  5. Fernando M.R., Reyes J.L., Iannuzzi J., Leung G., McKay D.M. The Pro-Inflammatory Cytokine, Interleukin-6, Enhances the Polarization of Alternatively Activated Macrophages. PloS One, 2014, Vol. 9, no. 4, e94188. doi: 10.1371/journal.pone.0094188.
  6. Yang J., Zhang L., Yu C., Yang X.F., Wang H. Monocyte and macrophage differentiation: circulation inflammatory monocyte as biomarker for inflammatory diseases. Biomarker Res., 2014, Vol. 2, no. 1, 1. doi: 10.1186/2050-7771-2-1.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Николенко М.В., Костоломова Е.Г., Сивкова Д.С., Борисенок А.И., Барышникова Н.В., Малишевская О.И., Васева Е.М., Приходько Ю.С., 2025

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».