РОЛЬ ГЕНОВ RAD50 И SMARCA5 В РЕГУЛЯЦИИ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИК ЦИСПЛАТИНУ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК РАКА ЯИЧНИКАИ РАКА ГОЛОВЫ И ШЕИ


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования - оценка влияния генов RAD50 и SMARCA5 на чувствительность к цисплатину и другим ДНК-повреждающим агентам, используемым в терапии опухолевых заболеваний (5-фторурацил, олапариб), оценка роли данных генов в регуляции ответа на повреждение ДНК в клеточных линиях рака яичника (OVCAR8) и головы и шеи (SCC61, SCC25). Материал и методы. Нами была выполнена трансфекция опухолевых клеток малыми интерферирующими РНК (миРНК) («Qiagen», Германия) для осуществления нокдауна генов RAD50 и SMARCA5, а также контрольных генов. Выживаемость опухолевых клеток в присутствии и отсутствие ДНК-повреждающих агентов оценивали спектрофотометрическим методом с использованием реагента CellTiterBlue («Promega», США). Для оценки роли RAD50 и SMARCA5 в регуляции ответа на повреждение ДНК мы выполнили анализ фосфорилирования гистонового белка H2AX методом иммунофлуоресцентной микроскопии. Результаты. Нами было показано влияние генов RAD50 и SMARCA5 на выживаемость опухолевых клеток и регуляцию чувствительности к цисплатину и другим ДНК-повреждающим агентам (5-фторурацил, олапариб) в клеточных линиях рака головы и шеи (SCC61, SCC25) и рака яичника (OVCAR-8). Полученные данные указывают на роль SMARCA5 в регуляции базового уровня фосфорилирования гистонового белка H2AX в отсутствие повреждения ДНК. Заключение. Полученные нами данные характеризуют гены RAD50 и SMARCA5 как перспективные терапевтические мишени в лечении и предиктивные маркеры ответа на терапию цисплатином и другими ДНК-повреждающими препаратами у пациентов с плоскоклеточной карциномой головы и шеи и раком яичника.

Об авторах

Анна Владиславовна Гапонова

ФГАОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет»

Email: annagaponova28@gmail.com
младший научный сотрудник кафедры биохимии; 420008, г. Казань, ул. Кремлевская, д. 18 420008, г. Казань, Россия

И. Г Серебрийский

ФГАОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет»

420008, г. Казань, Россия

Р. Г Киямова

ФГАОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет»

420008, г. Казань, Россия

Список литературы

  1. Chu G. Cellular responses to cisplatin. The roles of DNA-binding proteins and DNA repair. J. Biol. Chem. 1994; 269(2): 787-90.
  2. Perez R.P. Cellular and molecular determinants of cisplatin resistance. Eur. J. Cancer. 1998; 34(10):1535-42.
  3. Johnson S.W., Perez R.P., Godwin A.K., Yeung A.T., Handel L.M., Ozols R.F., Hamilton T.C. Role of platinum-DNA adduct formation and removal in cisplatin resistance in human ovarian cancer cell lines. Biochem. Pharmacol. 1994; 47(4): 689-97.
  4. Johnson S.W., Swiggard P.A., Handel L.M., Brennan J.M., Godwin A.K., Owls R.F. et al. Relationship between platinum-DNA adduct formation and removal and cisplatin cytotoxicity in cisplatin-sensitive and -resistant human ovarian cancer cells. Cancer Res. 1994; 54(22): 5911-6.
  5. Tan D.S., Kaye S.B. Chemotherapy for patients with BRCA1 and BRCA2-mutated ovarian cancer: same or different? Am. Soc. Clin. Oncol. Educ. Book. 2015: 114-21.
  6. Kiyamova R., Kostianets O., Malyuchik S., Filonenko V., Usenko V., Gurtovyy V. et al. Identification of tumor-associated antigens from medullary breast carcinoma by a modified SEREX approach. Mol. Biotechnol. 2010; 46(2): 105-12.
  7. Kostianets О., Shyian M., Demidov S., Antoniuk S., Gout I., Filonenko V., Kiyamova R. Serological analysis of SEREX-defined medullary breasr carcinoma-associated antigens. Cancer Invest. 2012; 30(7): 519-27.
  8. Kostianets O., Antoniuk S., Filonenko V., Kiyamova R. Immunohistochemical analysis of medullary breast carcinoma autoantigens in different histological types of breast carcinomas. Diagn. Pathol. 2012; 7(1):161. doi: 10.1186/1746-1596-7-161.
  9. Bartkova J., Tommiska J., Oplustilova L., Aaltonen K., Tamminen A., Heikkinen T. et al. Aberrations of the MRE11-RAD50-NBS1 DNA damage sensor complex in human breast cancer: MRE11 as a candidate familial cancer-predisposing gene. Mol. Oncol. 2008; 2(4): 296-316.
  10. Tommiska J., Seal S., Renwick A., Barfoot R., Baskcomb L., Jayatilake H. et al. Evaluation of RAD50 in familial breast cancer predisposition. Int. J. Cancer. 2006; 118(11): 2911-6.
  11. Abuzeid W.M., Jiang X., Shi G., Wang H., Paulson D., Araki K. et al. Molecular disruption of RAD50 sensitizes human tumor cells to cisplatin-based chemotherapy. J. Clin. Invest. 2009; 119(7): 1974-85.
  12. Flores-Perez A., Rafaelli L.E., Ramírez-Torres N., Aréchaga-Ocampo E., Frías S., Sánchez S. et al. RAD50 targeting impairs DNA damage response and sensitizes human breast cancer cells to cisplatin therapy. Cancer. Biol. Ther. 2014; 15(6): 777-88.
  13. Smeenk G., Wiegant W.W., Marteijn J.A., Luijsterburg M.S., Sroczynski N., Costelloe T. et al. Poly(ADP-ribosyl)ation links the chromatin remodeler SMARCA5/SNF2H to RNF168-dependent DNA damage signaling. J. Cell. Sci. 2013; 126(4): 889-903.
  14. Xu X., Xie K., Zhang X.Q., Pridgen E.M., Park G.Y., Cui D.S. et al. Enhancing tumor cell response to chemotherapy through nanoparticle-mediated codelivery of siRNA and cisplatin prodrug. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2013; 110(46): 18638-43.
  15. Doles J., Oliver T.G., Cameron E.R., Hsu G., Jacks T., Walker G.C., Hemann M.T. Suppression of Rev3, the catalytic subunit of Pol{zeta}, sensitizes drug-resistant lung tumors to chemotherapy. Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 2010; 107(48): 20786-91.
  16. Huang K.K., Jang K.W., Kim S., Kim H.S., Kim S.M., Kwon H.J. et al. Exome sequencing reveals recurrent REV3L mutations in cisplatin-resistant squamous cell carcinoma of head and neck. Sci. Rep. 2016; 6: 19552.
  17. Sharma A., Singh K., Almasan A. Histone H2AX phosphorylation: a marker for DNA damage. Meth. Mol. Biol. 2012; 920: 613-26.
  18. Turinetto V., Giachino C. Multiple facets of histone variant H2AX: a DNA double-strand-break marker with several biological functions. Nucleic Acids Res. 2015; 43(5): 2489-98.
  19. Pabla N., Huang S., Mi Q.S., Daniel R., Dong Z. ATR-Chk2 signaling in p53 activation and DNA damage response during cisplatin-induced apoptosis. J. Biol. Chem. 2008; 283(10): 6572-83.
  20. Jackson S.P. Sensing and repairing DNA double-strand breaks. Carcinogenesis. 2002; 23(5): 687-96.
  21. Paull T.T., Rogakou E.P., Yamazaki V., Kirchgessner C.U., Gellert M., Bonner W.M. A critical role for histone H2AX in recruitment of repair factors to nuclear foci after DNA damage. Curr. Biol. 2000; 10(15): 886-95.
  22. Jin Q., Mao X., Li B., Guan S., Yao F., Jin F. Overexpression of SMARCA5 correlates with cell proliferation and migration in breast cancer. Tumour Biol. 2015; 36(3): 1895-902.
  23. Heikkinen K., Rapakko K., Karppinen S.M., Erkko H., Knuutila S., Lundán T. et al. RAD50 and NBS1 are breast cancer susceptibility genes associated with genomic instability. Carcinogenesis. 2006; 27(8): 1593-9.
  24. Wyatt M.D., Wilson D.M. Participation of DNA repair in the response to 5-fluorouracil. Cell Mol. Life Sci. 2009; 66(5): 788-99.
  25. Adamsen B.L., Kravik K.L., De Angelis P.M. DNA damage signaling in response to 5-fluorouracil in three colorectal cancer cell lines with different mismatch repair and TP53 status. Int. J. Oncol. 2011; 39(3): 673-82.
  26. Martin L.P., Hamilton T.C., Schilder R.J. Platinum resistance: the role of DNA repair pathways. Clin. Cancer Res. 2008; 14(5): 1291-5.
  27. Meehan R.S., Chen A.P. New treatment option for ovarian cancer: PARP inhibitors. Gynecol. Oncol. Res. Pract. 2016; 3: 3.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО "Эко-Вектор", 2017


 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».