Растворимые формы рецептора программируемой гибели клетки pd-1 и его лиганда pd-l1 при раке молочной железы

Введение. Иммунотерапия при раке молочной железы (РМЖ) не является универсальным инструментом и требует тщательного отбора пациентов для ее проведения. В случае использования ингибиторов контрольной точки иммунитета PD-1/PD-L1 порой недостаточно определения иммуногистохимического статуса опухоли и результаты экспрессии данных белков в опухолевых клетках противоречивы. В последнее десятилетие возрос интерес исследователей к растворимым формам рецептора PD-1
(sPD-1) и его лиганда PD-L1 (sPD-L1), которые можно идентифицировать в сыворотке или плазме крови онкологических больных. При этом у пациентов с различными злокачественными новообразованиями концентрации данных белков отличаются и изменяются в процессе опухолевой прогрессии, что можно использовать для мониторинга течения болезни и оценки прогноза.

Цель работы – анализ клинико-лабораторной значимости растворимых форм рецептора PD-1 и его лиганда PD-L1 в сыворотке крови больных раком молочной железы с учетом основных клинико-морфологических характеристик заболевания.

Материал и методы. Проведен анализ содержания sPD-1 и sPD-L1 в сыворотке крови 77 больных (средний возраст – 52,3 года) с впервые выявленным РМЖ в различных стадиях и у 49 здоровых женщин (средний возраст – 47,9 лет), составивших контрольную группу. Концентрации sPD-1 и sPD-L1 в сыворотке крови, полученные по стандартной методике до начала специфического лечения, определяли с помощью наборов реактивов для прямого иммуноферментного анализа «Human PD-L1 Platinum ELISA» и «Human PD-1 ELISA kit» (Affymetrix, eBioscience, США) в соответствии с инструкциями производителя. Измерения проводили на автоматическом иммуноферментном анализаторе «BEP 2000 Advance» (Siemens Healthcare Diagnostics, Германия). Статистический анализ полученных результатов выполняли с использованием GraphPad Prizm v. 10. При сравнении показателей и анализе их взаимосвязей использовали непараметрические критерии Манна–Уитни, Краскела–Уоллиса, коэффициент ранговой корреляции Спирмена. Различия считали статистически значимыми при р < 0,05.

Результаты. Показано, что медианы концентрации sPD-L1 в сыворотке крови больных РМЖ статистически значимо выше (49,2 пг/мл), чем в контроле (9,2 пг/мл) (p < 0,0001), тогда как уровень sPD-1, наоборот, статистически значимо ниже у больных РМЖ (7,5 пг/мл) по сравнению с группой контроля (47,1 пг/мл; p < 0,0001). Уровни маркеров в сыворотке крови больных односторонним и первично-множественным РМЖ не различались. Анализ диагностической значимости показал, что при концентрации sPD-1 18,1 пг/мл чувствительность и специфичность метода составляют 98% (AUC – площадь под кривой 0,998 с 95% ДИ 0,993–1,000; р < 0,0001), что указывает на перспективность дальнейшего изучения данного белка при РМЖ. Для sPD-L1 продемонстрировано, что максимальная чувствительность и специфичность теста (92 и 80% соответственно) достигается при пороговом значении 24 пг/мл (AUC – площадь под кривой 0,954 с 95% ДИ 0,923–0,985; р < 0,0001). В группе пациентов с HER2+ подтипом РМЖ содержание sPD-L1 в 2 раза выше по сравнению с другими подтипами данного заболевания и в 10 раз выше по сравнению с контрольной группой. При пороговом значении sPD-L1, равному медиане содержания в данной группе пациенток 96,2 пг/мл, чувствительность и специфичность метода составила 86 и 100% соответственно. Пациентки с данным рецепторным типом опухоли составляют самую малочисленную группу, в связи с чем полученные результаты требуют валидации на более широкой выборке. Проведенный анализ не выявил корреляций уровней изучаемых белков с клинико-морфологическими характеристиками РМЖ, за исключением прямой ассоциации между содержанием sPD-1 в сыворотке крови и пролиферативным статусом опухоли.

Выводы. Выявленные изменения в продукции растворимых форм рецептора PD-1 и его лиганда PD-L1 у больных РМЖ могут свидетельствовать об иммуногенности этих опухолей. Возможен неоднократный анализ sPD-1 и sPD-L1 в сыворотке крови больных, который может быть использован не только в диагностике этих новообразований, но и мониторинге заболевания при многократном исследовании этих биомаркеров в случае проведения иммунотерапии ингибиторами контрольной точки иммунитета PD-1/PD-L1.