Сравнение точности MALDI-ToF масс-спектрометрической идентификации штаммов Mycobacterium abscessus complex, выделенных на различных питательных средах

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Mycobacterium abscessus complex — одна из наиболее распространенных групп быстрорастущих нетуберкулезных микобактерий. Эта группа микроорганизмов все чаще становится причиной инфекций различной локализации, особенно у пациентов с муковисцидозом (МВ). Микробиологическая диагностика таких инфекций при использовании матрично активированной лазерной десорбции-ионизации с времяпролетной масс-спектрометрией (MALDI-ToF) часто затруднена из-за особенностей микобактериальных клеток, что вызывает необходимость оптимизации методики. Целью исследования стала оценка точности идентификации штаммов Mycobacterium abscessus, выделенных на универсальной хромогенной среде и на селективной среде для выделения Burkholderia cepacia complex (BCC). Материалы и методы. Для исследования было отобрано в общей сложности 64 штамма Mycobacterium abscessus. Все штаммы культивировали одновременно на универсальной хромогенной среде и на селективной среде для выделения BCC. Идентификацию выделенных микроорганизмов проводили с помощью MALDI-ToF масс-спектрометрии на приборе Microflex LT. Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием программы StatTech v.2.1.0. Результаты. Был проведен анализ корреляции между результатами идентификации и используемыми питательными средами. Анализ показал, что идентификация микобактерий, выделенных на хромогенной среде, была более точной, чем идентификация микобактерий, выделенных на среде для выделения BCC. Заключение. В ходе проведенного исследования было выявлено, что состав питательной среды влияет на точность идентификации представителей MABSc, что может учитываться при разработке протоколов оптимизации и повышения точности идентификации этой группы бактерий с помощью MALDI-ToF масс-спектрометрии. Несмотря на это, в контексте такой сложной патологии с высокой коморбидностью, как МВ, учитывая универсальность исследованной нами хромогенной среды и зачастую полимикробный характер инфекций при МВ, рационально для первичного посева исследуемого материала использовать селективные среды, в том числе среду для выделения BCC. Однако после первичного посева микобактерии можно пересевать на хромогенную среду для оценки культуральных свойств и улучшения качества видовой идентификации.

Об авторах

Д. В. Алексеев

ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Минздрава России

Email: d.a.kokorev@samsmu.ru

специалист лаборатории культуромных и протеомных исследований в микробиологии Научно-образовательного профессионального центра генетических и лабораторных технологий

Россия, г. Самара

Е. А. Каргина

ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Минздрава России

Email: d.a.kokorev@samsmu.ru

студентка 6 курса Института педиатрии

Россия, г. Самара

Даниил Андреевич Кокорев

ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: d.a.kokorev@samsmu.ru

специалист лаборатории метагеномики человека Научно-образовательного профессионального центра генетических и лабораторных технологий

Россия, г. Самара

А. М. Ковалев

ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Минздрава России

Email: d.a.kokorev@samsmu.ru

к.б.н., зав. лабораторией генетических технологий в микробиологии Научно-образовательного профессионального центра генетических и лабораторных технологий

Россия, г. Самара

Е. А. Бородулина

ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Минздрава России

Email: d.a.kokorev@samsmu.ru

д.м.н., профессор, зав. кафедрой фтизиатрии и пульмонологии

Россия, г. Самара

А. В. Лямин

ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Минздрава России

Email: d.a.kokorev@samsmu.ru

д.м.н., доцент, директор Научно-образовательного профессионального центра генетических и лабораторных технологий

Россия, г. Самара

Д. Д. Исматуллин

ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Минздрава России

Email: d.a.kokorev@samsmu.ru

к.м.н., зав. лабораторией Научно-образовательного профессионального центра генетических и лабораторных технологий

Россия, г. Самара

Список литературы

  1. Поликарпова С.В., Жилина С.В., Кондратенко О.В., Лямин А.В., Борзова Ю.В. Руководство по микробиологической диагностике инфекций дыхательных путей у пациентов с муковисцидозом. Москва–Тверь: Триада, 2019. 128 с. [Polikarpova S.V., Zhilina S.V., Kondratenko O.V. Guidelines for the microbiological diagnosis of respiratory tract infections in patients with cystic fibrosis. Moscow–Tver: Triada, 2019. 128 p. (In Russ.)]
  2. Ahmed I., Tiberi S., Farooqi J., Jabeen K., Yeboah-Manu D., Migliori G.B., Hasan R. Non-tuberculous mycobacterial infections-A neglected and emerging problem. Int. J. Infect. Dis., 2020, vol. 92S, pp. S46–S50. doi: 10.1016/j.ijid.2020.02.022
  3. Babalik A., Koç E.N., Sekerbey H.G., Dönmez G.E., Balikci A., Kilicaslan Z. Nontuberculous mycobacteria isolation from sputum specimens: A retrospective analysis of 1061 cases. Int. J. Mycobacteriol., 2023, vol. 12, no. 1, pp. 55–65. doi: 10.4103/ijmy.ijmy_10_23
  4. Belardinelli J.M., Li W., Avanzi C., Angala S.K., Lian E., Wiersma C.J., Palčeková Z., Martin K.H., Angala B., de Moura V.C.N., Kerns C., Jones V., Gonzalez-Juarrero M., Davidson R.M., Nick J.A., Borlee B.R., Jackson M. Unique features of Mycobacterium abscessus biofilms formed in synthetic cystic fibrosis medium. Front. Microbiol., 2021, no. 12: 743126. doi: 10.3389/fmicb.2021.743126
  5. Blanchard A.C., Waters V.J. Microbiology of cystic fibrosis airway disease. Semin. Respir. Crit. Care Med., 2019, vol. 40, no. 6, pp. 727–736. doi: 10.1055/s-0039-1698464
  6. Gardner A.I., McClenaghan E., Saint G., McNamara P.S., Brodlie M., Thomas M.F. Epidemiology of nontuberculous mycobacteria infection in children and young people with cystic fibrosis: analysis of UK cystic fibrosis registry. Clin. Infect. Dis., 2019, vol. 68, no. 5, pp. 731–737. doi: 10.1093/cid/ciy531
  7. Li J., Wang J., Sun H., Huo F., Shang Y., Li S. The effect of culture media dilution on recovery of rapidly growing mycobacteria. New Microbiol., 2020, vol. 43, no. 4, pp. 191–194
  8. Lyamin A.V., Ereshchenko A.A., Gusyakova O.A., Antipov V.A., Kozlov A.V., Ismatullin D.D. Application of chromogenic media for preliminary identification of acid-resistant bacteria. Int. J. Mycobacteriol., 2023, vol. 12, no. 1, pp. 49–54. doi: 10.4103/ijmy.ijmy_6_23
  9. Lyamin A.V., Ereshchenko A.A., Ismatullin D.D., Zolotov M.O., Alekseev D.V., Kayumov K.A. Evaluation of the influence of the cultivation medium on the result of identification of microorganisms from the group of acid-resistant bacteria of the order actinomycetales by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry. Int. J. Mycobacteriol., 2023, vol. 12, no. 2, pp. 157–161. doi: 10.4103/ijmy.ijmy_85_23
  10. Moore J.E., Millar B.C. Comparison of four agar media for the enumeration of the Mycobacterium abscessus complex. Int. J. Mycobacteriol., 2020, vol. 9, no. 3, pp. 289–292. doi: 10.4103/ijmy.ijmy_110_20
  11. Nick J.A., Daley C.L., Lenhart-Pendergrass P.M., Davidson R.M. Nontuberculous mycobacteria in cystic fibrosis. Curr. Opin. Pulm. Med., 2021, vol. 27, no. 6, pp. 586–592. doi: 10.1097/MCP.0000000000000816
  12. Parmar S., Tocheva E.I. The cell envelope of Mycobacterium abscessus and its role in pathogenesis. PLoS Pathog., 2023, vol. 19, no. 5: e1011318. doi: 10.1371/journal.ppat.1011318
  13. Ratnatunga C.N., Lutzky V.P., Kupz A., Doolan D.L., Reid D.W., Field M., Bell S.C., Thomson R.M., Miles J.J. The rise of non-tuberculosis mycobacterial lung disease. Front. Immunol., 2020, no. 11: 303. doi: 10.3389/fimmu.2020.00303
  14. Wang H.Y., Kuo C.H., Chung C.R., Lin W.Y., Wang Y.C., Lin T.W., Yu J.R., Lu J.J., Wu T.S. Rapid and accurate discrimination of Mycobacterium abscessus subspecies based on matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight spectrum and machine learning algorithms. Biomedicines, 2022, vol. 11, no. 1: 45. doi: 10.3390/biomedicines11010045
  15. Wetzstein N., Diricks M., Kohl T.A., Wichelhaus T.A., Andres S., Paulowski L., Schwarz C., Lewin A., Kehrmann J., Kahl B.C., Dichtl K., Hügel C., Eickmeier O., Smaczny C., Schmidt A., Zimmermann S., Nährlich L., Hafkemeyer S., Niemann S., Maurer F.P., Hogardt M. Molecular epidemiology of Mycobacterium abscessus isolates recovered from german cystic fibrosis patients. Microbiol. Spectr., 2022, vol. 10, no. 4: e0171422. doi: 10.1128/spectrum.01714-22

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рисунок. Анализ корреляции между значениями Score и используемыми питательными средами с использованием основной библиотеки (A) и Mycobacteria Library версии 4.0 (B); различия статистически значимы (p < 0,05)

Скачать (172KB)

© Алексеев Д.В., Каргина Е.А., Кокорев Д.А., Ковалев А.М., Бородулина Е.А., Лямин А.В., Исматуллин Д.Д., 2024

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».