Подходы к изучению клеточного иммунного ответа к антигенам SARS-CoV-2 на модели сирийских хомячков

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Обоснование. Пандемия, вызванная появлением вируса SARS-CoV-2 в конце 2019 г., все еще остается серьезной проблемой здравоохранения. Ввиду постоянного антигенного дрейфа возбудителя, приводящего к снижению эффективности лицензированных вакцин от COVID-19, актуальна разработка вакцин широкого спектра действия, эффективных в отношении эволюционно удаленных вариантов коронавируса. В отличие от вирусспецифических антител c достаточно узким диапазоном действия, Т-клеточное звено иммунитета обладает более широким кросс-протективным потенциалом. Сирийские хомячки — адекватная модель для доклинической оценки новых вакцинных кандидатов, поскольку эти животные не только чувствительны к новой коронавирусной инфекции, но и способны проявлять клинические симптомы заболевания. Однако тестирование Т-клеточных вакцин на хомяках осложняется отсутствием доступных реагентов и тест-систем, позволяющих адекватно оценивать уровни вирусспецифического клеточного иммунитета на вакцинацию.

Цель работы — оптимизация условий стимуляции иммунных клеток сирийских хомячков живым вирусом SARS-CoV-2 для оценки уровней вирусспецифического Т-клеточного иммунного ответа.

Материалы и методы. Интраназальное заражение животных вирусом SARS-CoV-2 с последующей стимуляцией иммунных клеток различными дозами цельного живого коронавируса и подсчетом IFNγ-продуцирующих клеток методом ELISpot.

Результаты. Показано, что стимуляция клеток селезенок и легких хомяков вирусом в дозе 0,1 ТЦИД50/клетку оптимальна для определения максимальных уровней цитокин-продуцирующих клеток у животных, зараженных SARS-CoV-2. Кроме того, стимуляция клеток цельным вирусом показала большее количество вирусспецифических клеток по сравнению с пулом перекрывающихся пептидов, соответствующих белкам S и N коронавируса.

Заключение. В целом новая методика позволит более точно оценивать иммуногенность Т-клеточных вакцин от COVID-19 в доклинических исследованиях на модели сирийских хомячков.

Об авторах

Дарья Андреевна Меженская

Институт экспериментальной медицины

Автор, ответственный за переписку.
Email: dasmez@iemspb.ru
ORCID iD: 0000-0001-6922-7682
SPIN-код: 5799-8802
Scopus Author ID: 57188763106

научный сотрудник лаборатории иммунологии и профилактики вирусных инфекций отдела вирусологии им. А.А. Смородинцева

Россия, Санкт-Петербург

Ирина Николаевна Исакова-Сивак

Институт экспериментальной медицины

Email: isakova.sivak@iemspb.ru
ORCID iD: 0000-0002-2801-1508
SPIN-код: 3469-3600
Scopus Author ID: 23973026600

д-р биол. наук, заведующая лабораторией иммунологии и профилактики вирусных инфекций отдела вирусологии им. А.А. Смородинцева

Россия, Санкт-Петербург

Лариса Георгиевна Руденко

Институт экспериментальной медицины

Email: vaccine@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0107-9959
SPIN-код: 4181-1372
Scopus Author ID: 7005033248

д-р мед. наук, профессор, заведующая отделом вирусологии им. А.А. Смородинцева

Россия, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. COVID-19 Dashboard by the Center for Systems Science and Engineering (CSSE) at Johns Hopkins University (JHU) [Электронный ресурс]. Режим доступа: https://coronavirus.jhu.edu/map.html. Дата обращения: 01.05.2022.
  2. Zheng C., Shao W., Chen X. et al. Real-world effectiveness of COVID-19 vaccines: a literature review and meta-analysis // Int. J. Infect. Dis. 2022. Vol. 114. P. 252–260. doi: 10.1016/j.ijid.2021.11.0093.
  3. Tatsi E.B., Filippatos F., Michos A. SARS-CoV-2 variants and effectiveness of vaccines: a review of current evidence // Epidemiol. Infect. 2021. Vol. 149. P. e237. doi: 10.1017/S0950268821002430
  4. Kedzierska K., Thomas P.G. Count on us: T cells in SARS-CoV-2 infection and vaccination // Cell Rep. Med. 2022. Vol. 3, No. 3. P. 100562. doi: 10.1016/j.xcrm.2022.100562
  5. Zollner A., Watschinger C., Rössler A. et al. B and T cell response to SARS-CoV-2 vaccination in health care professionals with and without previous COVID-19 // EBioMedicine. 2021. Vol. 70. P. 103539. doi: 10.1016/j.ebiom.2021.103539
  6. Abbasi J. COVID-19 vaccine focused on T-Cell response promising in early trial // JAMA. 2022. Vol. 327, No. 2. P. 115. doi: 10.1001/jama.2021.24118
  7. Cox J.H., Ferrari G., Janetzki S. Measurement of cytokine release at the single cell level using the ELISPOT assay // Methods. 2006. Vol. 38, No. 4. P. 274–282. doi: 10.1016/j.ymeth.2005.11.006
  8. Bonifacius A., Tischer-Zimmermann S., Santamorena M.M. et al. Rapid manufacturing of highly cytotoxic clinical-grade SARS-CoV-2-specific T cell products covering SARS-CoV-2 and its variants for adoptive T cell therapy // Front. Bioeng. Biotechnol. 2022. Vol. 10. P. 867042. doi: 10.3389/fbioe.2022.867042
  9. Mak W.A., Koeleman J.G.M., Ong D.S.Y. Development of an in-house SARS-CoV-2 interferon-gamma ELISpot and plate reader-free spot detection method // J. Virol. Methods. 2022. Vol. 300. P. 114398. doi: 10.1016/j.jviromet.2021.114398
  10. Matyushenko V., Kotomina T., Kudryavtsev I. et al. Conserved T-cell epitopes of respiratory syncytial virus (RSV) delivered by recombinant live attenuated influenza vaccine viruses efficiently induce RSV-specific lung-localized memory T cells and augment influenza-specific resident memory T-cell responses // Antiviral. Res. 2020. Vol. 182. P. 104864. doi: 10.1016/j.antiviral.2020.104864
  11. Fiolet T., Kherabi Y., MacDonald C.J. et al. Comparing COVID-19 vaccines for their characteristics, efficacy and effectiveness against SARS-CoV-2 and variants of concern: a narrative review // Clin. Microbiol. Infect. 2022. Vol. 28, No. 2. P. 202–221. doi: 10.1016/j.cmi.2021.10.005
  12. Martinez-Flores D., Zepeda-Cervantes J., Cruz-Reséndiz A. et al. SARS-CoV-2 vaccines based on the spike glycoprotein and implications of new viral variants // Front. Immunol. 2021. Vol. 12. P. 701501. doi: 10.3389/fimmu.2021.701501
  13. Swadling L., Maini M.K. T cells in COVID-19 – united in diversity // Nat. Immunol. 2020. Vol. 21, No. 11. P. 1307–1308. doi: 10.1038/s41590-020-0798-y
  14. Rong Y., Wang F., Liu J. et al. Clinical characteristics and risk factors of mild-to-moderate COVID-19 patients with false-negative SARS-CoV-2 nucleic acid // J. Med. Virol. 2021. Vol. 93, No. 1. P. 448–455. doi: 10.1002/jmv.26242
  15. Dai L., Gao G.F. Viral targets for vaccines against COVID-19 // Nat. Rev. Immunol. 2021. Vol. 21, No. 2. P. 73–82. doi: 10.1038/s41577-020-00480-0

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Изучение специфического ответа к антигенам SARS-CoV-2 методом ELISpot на модели сирийских хомячков: a — пример данных анализа индивидуальных лунок планшета для ELISpot с помощью прибора AID vSpot Spectrum; b — оценка количества спотов после стимуляции клеток инфицированных животных. Двукратное заражение сирийских хомячков проведено с использованием вируса SARS-CoV-2 или фосфатно-солевого буфера (PBS). Статистический анализ проводился методом двухфакторного дисперсионного анализа ANOVA с поправкой Тьюки на множественное сравнение. MOI — multiplicity of infection, множественность заражения. * p < 0,05, ** p < 0,01, *** p < 0,001, **** p < 0,0001

Скачать (352KB)
Метаданные

© Эко-Вектор, 2022



Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».