Трансплантация эпителиального пласта слизистой оболочки полости рта в лечении дефектов роговицы при тотальной лимбально-клеточной недостаточности

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Актуальность. Регенерация эпителия роговицы происходит за счёт пролиферации и дифференцировки лимбальных эпителиальных стволовых клеток. Гибель этих клеток или повреждение их микроокружения приводит к развитию лимбально-клеточной недостаточности. При двустороннем тотальном поражении зоны лимба трансплантация аутологичных стволовых лимбальных клеток становится невозможной. В связи с этим остаётся актуальным поиск новых источников аутологичных прогениторных клеток. Одним из таких источников стали клетки слизистой оболочки полости рта.

Цель — изучить репаративный эффект буккальных клеток в составе аутологичного эпителиального пласта слизистой оболочки ротовой полости на механической модели лимбально-клеточной недостаточности.

Материалы и методы. Исследование проведено на 7 кроликах породы серая шиншилла (14 глаз). На I этапе кроликам выполняли двустороннюю тотальную лимбэктомию, механическую деэпителизацию роговицы и получали развитие фиброваскулярного паннуса. Затем забирали полнослойный лоскут слизистой оболочки щеки размерами 5 × 5 мм, обрабатывали 0,5 % раствором диспазы 12 ч при температуре 4 °С до отделения эпителиального пласта. После поверхностной кератэктомии до прозрачных слоёв на роговицы опытных глаз кроликов помещали пласт буккального эпителия и укрывали мягкой контактной линзой, а на роговицы контрольных глаз укладывали только мягкую контактную линзу, после чего выполняли временную блефарорафию на 5 сут. В послеоперационном периоде оценивали площадь деэпителизированной поверхности, неоваскуляризацию и прозрачность роговицы.

Результаты. На 7–30-е сутки на опытных и контрольных глазах отмечено сокращение площади эрозии, при этом динамика восстановительных процессов достоверно не различалась. На 60-е сутки площадь эрозии на опытных глазах была достоверно меньше, чем в контроле (р = 0,038). Рецидив эрозии на 90-е сутки отмечен на 4 контрольных и 3 опытных глазах.

Заключение. На выбранной модели лимбально-клеточной недостаточности применение пласта буккального эпителия не привело к выраженному репаративному эффекту.

Об авторах

Екатерина Валериановна Ченцова

Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней им. Гельмгольца

Email: chentsova27@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8394-1038
SPIN-код: 8191-8338

д-р мед. наук, профессор, начальник отдела травматологии и реконструктивной хирургии

Россия, Москва

Наталья Валерьевна Боровкова

Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского

Email: borovkovanv@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8897-7523
SPIN-код: 9339-2800

д-р мед. наук, заведующая отделением биотехнологий и трансфузиологии

Россия, Москва

Татьяна Валерьевна Целая

Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней им. Гельмгольца

Автор, ответственный за переписку.
Email: tatyana.tselaya@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-3013-685X

аспирант отдела травматологии и реконструктивной хирургии

Россия, Москва

Майя Викторовна Сторожева

Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского

Email: mayya.storozheva@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-1927-2404
SPIN-код: 7789-3277

научн. сотр. отделения биотехнологий и трансфузиологии

Россия, Москва

Иван Николаевич Пономарев

Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского

Email: rzam@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-2523-6939
SPIN-код: 4705-9314

канд. мед. наук, ст. научн. сотр.

Россия, Москва

Максим Сергеевич Макаров

Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского

Email: mcsimmc@yandex.ru
SPIN-код: 3543-5800

канд. биол. наук, ст. научн. сотр. отделения биотехнологий и трансфузиологии

Россия, Москва

Список литературы

  1. Davanger M., Evensen A. Role of the Pericorneal Papillary Structure in Renewal of Corneal Epithelium // Nature. 1971. Vol. 229, No. 5286. P. 560–561. doi: 10.1038/229560a0
  2. Попандопуло А.Г., Кавелина А.С., Иванова О.Н., Дрожжина Г.И. Роль лимбальных клеток в регенерации роговицы // Таврический медико-биологический вестник. 2013. T. 16, № 1–2. С. 158–160.
  3. Daniels J.T., Dart J.K., Tuft S.J., Khaw P.T. Corneal stem cells in review // Wound Repair and Regen. 2001. Vol. 9, No. 6. P. 483–494. doi: 10.1046/j.1524-475x.2001.00483.x
  4. Шевлюк Н.Н., Радченко А.В., Стадников А.А. Структурно-функциональные основы физиологической и репаративной регенерации тканей роговицы // Журнал анатомии и гистопатологии. 2019. T. 8, № 2. С. 82–90. doi: 10.18499/2225-7357-2019-8-2-82-90
  5. Николаева Л.Р., Ченцова Е.В. Лимбальная клеточная недостаточность // Вестник офтальмологии. 2006. T. 122, № 3. С. 43–47.
  6. Li W., Hayashida Y., Chen Y.-T., Tseng S.C. Niche regulation of corneal epithelial stem cells at the limbus // Cell Res. 2007. Vol. 17, No. 1. P. 26–36. doi: 10.1038/sj.cr.7310137
  7. Ramos T., Deborah S., Ahmad S. An update on ocular surface epithelial stem cells: cornea and conjunctiva // Stem Cells Int. 2015. Vol. 2015. ID601731. doi: 10.1155/2015/601731
  8. Dua H.S., Saini J.S., Azuara-Blanco A., Gupta P. Limbal stem cell deficiency: Concept, aetiology, clinical presentation, diagnosis and management // Indian J Ophthalmol. 2000. Vol. 48, No. 2. P. 83–92.
  9. Shapiro M.S., Friend J., Thoft R.A. Corneal re-epithelialization from the conjunctiva // Investig Ophthalmol Vis Sci. 1981. Vol. 21, No. 1–1. P. 135–142.
  10. Deng S.X., Sejpal K., Bakhtiari P. Presentation, diagnosis and management of limbal stem cell deficiency // Middle East Afr J Ophthalmol. 2013. Vol. 20, No. 1. P. 5–10. doi: 10.4103/0974-9233.106381
  11. Kenyon K.R., Tseng S.C. Limbal asutograft transplantation for ocular surface disorders // Ophthalmology. 1989. Vol. 96, No. 5. P. 709–723. doi: 10.1016/S0161-6420(89)32833-8
  12. Tsai R.J.-F., Tseng S.C.G. Human allograft limbal transplantation for corneal surface reconstruction // Cornea. 1994. Vol. 13, No. 5. P. 389–400. doi: 10.1097/00003226-199409000-00003
  13. Kwitko S., Marinho D., Barcaro S., et al. Allograft conjunctival transplantation for bilateral ocular surface disorders // Ophthalmology. 1995. Vol. 102, No. 7. P. 1020–1025. doi: 10.1016/S0161-6420(95)30918-9
  14. Nakamura T., Inatomi T., Sotozono C., et al. Ocular surface reconstruction using stem cell and tissue engineering // Prog Retin Eye Res. 2016. Vol. 51. P. 187–207. doi: 10.1016/j.preteyeres.2015.07.003
  15. Nakamura T., Inatomi T., Sotozono C., et al. Successful primary culture and autologous transplantation of corneal limbal epithelial cells from minimal biopsy for unilateral severe ocular surface disease // Acta Ophthalmologica Scandinavica. 2004. Vol. 82, No. 4. P. 468–471. doi: 10.1111/j.1395-3907.2004.00285.x
  16. Rama P., Matuska S., Paganoni G., et al. Limbal stem-cell therapy and long-term corneal regeneration // N Engl J Med. 2010. Vol. 363, No. 2. P. 147–155. doi: 10.1056/NEJMoa0905955
  17. Schwab I.R., Reyes M., Isseroff R.R. Successful transplantation of bioengineered tissue replacements in patients with ocular surface disease // Cornea. 2000. Vol. 19, No. 4. P. 421–426. doi: 10.1097/00003226-200007000-00003
  18. Хлопин Н.Г. Общебиологические и экспериментальные основы гистологии. Ленинград: АН СССР, 1946. 491 с.
  19. Kinoshita S., Nakamura T. Development of cultivated mucosal epithelial sheet transplantation for ocular surface reconstruction // Artificial Organs. 2004. Vol. 28, No. 1. P. 22–27. doi: 10.1111/j.1525-1594.2004.07319.x
  20. Nakamura T., Endo K.-I., Cooper L.J., et al. The successful culture and autologous transplantation of rabbit oral mucosal epithelial cells on amniotic membrane // Investig Ophthalmol Vis Sci. 2003. Vol. 44, No. 1. P. 106–116. doi: 10.1167/iovs.02-0195
  21. Nishida K., Yamato M., Hayashida Y., et al. Corneal reconstruction with tissue-engineered cell sheets composed of autologous oral mucosal epithelium // N Engl J Med. 2004. Vol. 351, No. 12. P. 1187–1196. doi: 10.1056/NEJMoa040455
  22. Inatomi T., Nakamura T., Koizumi N., et al. Midterm results on ocular surface reconstruction using cultivated autologous oral mucosal epithelial transplantation // Am J Ophthalmol. 2006. Vol. 141, No. 2. P. 267–275. doi: 10.1016/j.ajo.2005.09.003
  23. Безушко А.В., Дубовиков А.С., Куликов А.Н., и др. Модификация механической модели лимбальной недостаточности // Офтальмология. 2018. T. 15, № 1. С. 51–57. doi: 10.18008/1816-5095-2018-1-51-57
  24. Войно-Ясенецкий В.В. Разрастание и изменчивость тканей глаза при его заболеваниях и травмах. Киев: Вища школа,1979. 165 с.
  25. Inamochi A., Tomioka A., Kitamoto K., et al. Simple oral mucosal epithelial transplantation in a rabbit model // Sci Rep. 2019. Vol. 9, No. 1. ID 18088. doi: 10.1038/s41598-019-54571-7

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Глаз экспериментального животного сразу после тотальной деэпителизации и лимбэктомии

Скачать (166KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Глаз экспериментального животного на 30-е сутки после деэпителизации и лимбэктомии

Скачать (108KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Передний отрезок глаза после кератэктомии с эпителиальным пластом и мягкой контактной линзой

Скачать (133KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Буккальные клетки в составе эпителиального пласта. Увел. ×200. Витальное окрашивание трипафлавином акридиновым-оранжевым: a — эпителиальный пласт со стороны базального слоя; b — эпителиальный пласт со стороны наружного слоя эпителия; c — подлежащая соединительная ткань биоптата щеки. Клетки отсутствуют на базальной мембране

Скачать (290KB)
Метаданные
6. Рис. 5. Состояние глаз экспериментальных животных после удаления мягкой контактной линзы: a — контрольный; b — опытный. Витальное окрашивание флюоресцеином

Скачать (215KB)
Метаданные
7. Рис. 6. Состояние глаз экспериментальных животных через 7 сут после удаления мягкой контактной линзы: a — опытный; a — контрольный. Витальное окрашивание флюоресцеином

Скачать (215KB)
Метаданные
8. Рис. 7. Состояние глаз экспериментальных животных на 14-е сутки после удаления мягкой контактной линзы: a — опытный; b — контрольный. Витальное окрашивание флюоресцеином

Скачать (200KB)
Метаданные
9. Рис. 8. Состояние глаз экспериментальных животных на 30-е сутки после удаления мягкой контактной линзы: a — опытный; b — контрольный. Витальное окрашивание флюоресцеином

Скачать (199KB)
Метаданные
10. Рис. 9. Состояние глаз экспериментальных животных на 60-е сутки после удаления мягкой контактной линзы: a — опытный; b — контрольный. Витальное окрашивание флюоресцеином

Скачать (250KB)
Метаданные
11. Рис. 10. Состояние глаз экспериментальных животных на 90-е сутки после удаления мягкой контактной линзы: a — опытный; b — контрольный. Витальное окрашивание флюоресцеином

Скачать (185KB)
Метаданные

© Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Целая Т.В., Сторожева М.В., Пономарев И.Н., Макаров М.С., 2022

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».