Preparation and properties evaluation of the recombinant analogue of birch pollen allergen Bet v 1


Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription Access

Abstract

Background. For wide introduction of the component allergy diagnostics in laboratory practice it is necessary to create methods of production, purification and verification of synthetic allergens. Major birch pollen protein Bet v 1, a representative of the superfamily PR-10, is interesting due to the high incidence of sensitization and the manifestation of cross-reactive properties. Methods. To receive a synthetic protein DNA cloning techniques were used, followed by expression in E. coli. Purification was made by metal-affinity chromatography. Evaluation of immunochemical properties was held in several tests including ELISA analysis and line-blot. Results. We have obtained high-yield bacterial strain E. coli, containing expression vector for protein Bet v 1 production. Physico-chemical and immunological properties were estimated in various test systems with the reference panel of serum. Conclusion. It was shown that the resulting synthetic analogue of protein Bet v 1 can be used to measure the presence of specific immunoglobulin E in serum samples. This allergenic component may be used for estimation of each component of the sensitization profile.

About the authors

A E Pavlov

Vega Ltd. group of Companies «Alkor Bio»; Saint-Petersburg State University

Email: apavlov@alkorbio.ru
Saint-Petersburg, Russia

N A Seylieva

Vega Ltd. group of Companies «Alkor Bio»

Saint-Petersburg, Russia

O YU Mukhortykh

Vega Ltd. group of Companies «Alkor Bio»

Saint-Petersburg, Russia

V E Stefanov

Saint-Petersburg State University

Saint-Petersburg, Russia

References

  1. Madsen C. Prevalence of food allergy: an overview. Proc. Nutr. Soc. 2005, v. 64, p. 413-417.
  2. Ebo D.G., Hagendorens M.M., Bridts C.H., Stevens W.J. In vitro diagnosis of IgE-mediated allergy: breakthroughs in the last decade. Expert. Rev. Clin. Immunol. 2012, v. 8, p. 9-11.
  3. Eriksson N.E., Ahlstedt S. Diagnosis of reaginic allergy with house dust, animal dander and pollen allergens in adult patients. V. A comparison between the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), provocation tests, skin tests and RAST Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. 1977, v 54, p. 88-95.
  4. Dolen W.K. Allergen extract standartization: reality, myth, or dream? Ann. Allergy Asthma Immunol. 1995, v. 75, p. 81-82.
  5. Ipsen H., Løwenstein H. Isolation and immunochemical characterization of the major allergen of birch pollen (Betula verrucosa). J. Allergy Clin. Immunol. 1983, v. 72, p. 150-159.
  6. Павлов А.Е., Сейлиева Н.А., Стефанов В.Е. Перспективы развития молекулярной диагностики аллергии в формате микрочипа. Клин. лаб. диагн. 2011, № 12, с. 3-7.
  7. Asturias J.A., Ibarrola I., Amat P. et al. Purified allergens vs. complete extract in the diagnosis of plane tree pollen allergy. Clin. Exp. Allergy. 2006, v. 36, p. 1505-1512.
  8. Midoro-Horiuti T., Brooks E.G., Goldblum R.M. Pathogenesis-related proteins of plants as allergens. Ann. Allergy Asthma Immunol. 2001, v. 87, p. 261-271.
  9. WHO/IUIS Allergen Nomenclature Sub-committee: [www. allergen.org]. URL: http://www.allergen.org/.
  10. Swoboda I., Jilek A., Ferreira F. et al. Isoforms of Bet v 1, the major birch pollen allergen, analyzed by liquid chromatography, mass spectrometry and cDNA cloning. J. Biol. Chem. 1995, v. 270, p. 2607-2613.
  11. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970, Aug 15, v. 227 (5259), р. 680-685.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML

Copyright (c) 2012 Pharmarus Print Media

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».