Polymorphism of microsatellite loci in populations of Caucasian rock lizards and its use for assessing the genetic diversity of Darevskia raddei

封面

如何引用文章

全文:

详细

The study of Caucasian rock lizards of the Darevskia raddei complex, represented by several subspecies, is of great interest and scientific significance in connection with their participation in interspecific hybridizations with the formation of five of the seven known unisexual (parthenogenetic) species of the genus Darevskia. Here are presented genetic parameters for populations (subspecies) of D. r. raddei and D. r. nairensis based on the analysis of the variability of 10 microsatellite loci of 230 individuals from 17 populations of Armenia and Nagorno-Karabakh. According to these parameters, D. r. raddei are characterized by greater diversity in the number of alleles and genotypes compared to D. r. nairensis. Genetic differentiation analysis showed that D. r. raddei populations are divided into two groups, one of which is genetically closer to D. r. nairensis than D. r. raddei. Analysis of the association index showed the absence of free recombination of alleles between subspecies, which indicates their isolation and the absence of crossing between individuals. Thus, based on the expanded population sample and the developed panel of microsatellite markers, new data on the population structure of D. raddei species, genetic diversity and differentiation of D. r. raddei and D. r. nairensis were obtained.

全文:

Кавказские скальные ящерицы Darevskia raddei [1] широко распространены на территории Армянского нагорья и представляют комплекс из четырёх подвидов (Darevskia raddei raddei [2], Darevskia raddei nairensis [3], Darevskia raddei vanensis [4], Darevskia raddei chaldoranensis [5]). Подвиды различаются по морфологии (фолидоз; верхняя сторона тела может иметь разнообразную окраску в коричневых тонах, полоса вдоль спины состоит из множества темных пятен, образуя сетчатый узор; брюшная сторона может быть окрашена в белые, голубые и зеленые тона), высоте обитания над уровнем моря, а также поведенческим паттерном, например способом удержания самцом самки во время спаривания. В настоящее время наиболее изученными являются подвиды D. r. nairensis и D. r. raddei, однако, несмотря на имеющиеся сведения о дивергенции данных подвидов, их таксономическое положение и степень монофилии остаются дискуссионными. Анализ аллельных вариантов ряда аллозимных локусов показал невысокий уровень генетического полиморфизма, а в ходе изучения митохондриальной ДНК было выяснено, что различные популяции D. r. raddei имеют разную степень дивергенции с D. r. nairensis. Вид D. raddei sensu lato является материнским видом для пяти из семи известных партеногенетических представителей рода Darevskia – D. rostombekowi, D. unisexualis, D. sapphirina, D. bendimahiensis и D. uzzelli [6, 7]. Для последних четырех партеновидов отцовским является вид D. valentini [8, 9]. Таким образом, изучение внутривидового разнообразия Darevskia raddei представляет интерес в связи с его участием в межвидовых гибридизациях с образованием однополых дочерних видов, а также с проблемой естественной гибридизации двуполых и дочерних однополых видов скальных ящериц в зоне симпатрии с образованием триплоидных гибридов [10, 11].

Анализ аллельных вариантов 36 аллозимных локусов из шести популяций D. r. nairensis и четырех популяций D. r. raddei также показал невысокий уровень генетического полиморфизма – половина из всех 36 локусов оказались моноаллельными [8]. В нашей предыдущей работе [12] при использовании трех тетрануклеотидных микросателлитных локусов был показан высокий уровень генетической дифференциации этих популяций. В настоящей работе для определения генетических параметров были использованы увеличенные выборки D. r. raddei и D. r. nairensis и новые, более полиморфные, ди- и тринуклеотидные микросателлитные локусы.

Материалы и методы

Сбор материала (фрагменты хвостов) проводили на территории Армении и Арцаха (Нагорного Карабаха) с 1997 г. по 2021 г. Было собрано 225 образцов D. raddei из 17 локалитетов (табл. П1). Образцы из Лчапа, Айраванка и Лчашена были объединены в одну популяцию “Лчашен”, таким образом в работе проанализировано 15 популяций D. raddei.

Работа с животными проводилась в строгом соответствии с правилами Министерства охраны природы Армении (номер разрешения 5/22.1/51043) и этического комитета Московского государственного университета (номер разрешения 24-01). После забора биоматериала ящерицы выпускались в места их обитания. Для сравнения использовали восемь ранее полученных коллекционных образцов ДНК ящериц D. valentini из локалитетов Лчашен, Тэж и Адис (табл. П1). Образцы ДНК были выделены стандартным фенольно-хлороформным методом с использованием протеиназы К.

Поиск микросателлитных локусов в геноме ящерицы D. valentini [13] проводили с использованием конвейера, включающего несколько программ и скриптов на языке Python. На первом этапе с использованием perl-скрипта MISA [14] в геноме был осуществлен поиск микросателлитных повторов с заданной длиной мономера 2 и 3 нуклеотида и с числом повторов не менее 10. Далее с использованием BedTools v2.30.0 [15] и дополнительных скриптов из генома были выбраны все последовательности, удовлетворяющие следующим критериям: 1) размер последовательностей, прилегающих к 5' и 3' концам микросателлита, составляет не менее 100 пн; 2) микросателлит и фланкирующие области не содержат N; 3) фланкирующие области не содержат повторы и последовательности, затрудняющие гибридизацию праймеров. Аналогичный поиск обнаружил ортологичные локусы в черновых геномных сборках D. unisexualis и D. raddei, что позволило использовать данные локусы для анализа внутривидового разнообразия комплекса D. raddei. Для подбора ПЦР-праймеров использовали программу Primer3 [16, 17] при заданной длине искомого продукта, включающего микросателлитый повтор не менее 100 пн, расстоянии от праймеров до микросателлита не менее 10 пн, длине праймеров 20–25 пн и температуре плавления 58–62°С. Наиболее подходящие пары праймеров были проверены на уникальность амплифицируемого продукта локальным поиском in silico в геноме D. valentini с помощью BLAST+ 2.12.0 [18]. Для молекулярно-генетического анализа (генотипирования ДНК) было отобрано 11 микросателлитных локусов (табл. П2).

ПЦР проводили в объеме 20 мкл на 50 нг ДНК с использованием набора “GenPakPCRCore” (Isogene Laboratory) согласно протоколу фирмы-производителя при следующих температурных режимах: денатурация при 94°C − 3 мин, амплификация в течениt 30 циклов (денатурация 94°C – 1 мин, отжиг 60°C – 40 с, элонгация 72°C – 30 с, последний цикл − 5 мин при 72°C). Концентрация каждого праймера составляла 0.2 мкМ. Один из праймеров для амплификации индивидуальных локусов был помечен флуоресцентным красителем по 5' концу. В табл. П2 приведены характеристики локусов и праймеров, использованных в работе. Продукты ПЦР-амплификации фракционировали в 0.8%-ном агарозном геле с последующим выделением фрагментов ДНК с помощью набора GeneJET Gel Extraction Kit (ThermoScientific). Анализ длин амплифицированных фрагментов проводили с помощью капиллярного электрофореза (фрагментный анализ) в компании “Синтол” с использованием генетического анализатора “НАНОФОР-05”. Для определения размеров амплифицированных фрагментов использовали программное обеспечение Peak Scanner v1.0 (Applied Biosystems). Каждый продукт амплификации рассматривался как биаллельный локус: гетерозиготный при наличии двух фрагментов разного размера (два пика при анализе длин амплифицированных фрагментов) и гомозиготный (один пик), если обнаруживался единственный фрагмент.

Результаты генотипирования всех локусов сведены в таблицу и конвертированы с помощью функции df2genind пакета adegenet [19, 20] в объект класса genind для последующего анализа в среде R v4.2.0 [21]. Расчеты частоты нуль-аллелей (т.е. отсутствия ПЦР-продукта вследствие мутаций в последовательностях ДНК, фланкирующих микросателлит, на которые гибридизуются праймеры, что приводит к появлению ложных гомозигот) проводились в программе Rstudio с помощью пакета PopGenReport. Оценку частот аллелей, анализ аллельного и генетического разнообразия проводили с помощью пакетов hierfstat [22], pegas [23] и poppr [24]. Степень генетической дифференциации между D. r. raddei и D. r. nairensis определяли, рассчитывая показатель FST [25] и модифицированный вариант GST Хедрика [26, 27], учитывающий тенденцию стандартного критерия GST недооценивать степень дифференциации между небольшим числом популяций.

Чтобы определить популяционно-генетическую структуру вида D. raddei на основании данных микросателлитного анализа был использован дискриминантный анализ главных компонент (DAPC) [28], реализованный в пакете adegenet [19, 20]. В качестве внешней группы была добавлена выборка D. valentini, при этом анализ проводили без учета имеющихся сведений о популяционной структуре вида. Оптимальное количество генетических кластеров в популяциях определяли с помощью алгоритма k средних (k-means), использующего байесовский информационный критерий. Далее рассчитывалась вероятность отношения конкретных особей к генетическим кластерам.

Индекс ассоциации, использующийся для оценки мультилокусного неравновесия по сцеплению, определяли с использованием пакета poppr [24, 29].

Результаты

Характеристика микросателлитных локусов

На выборке D. raddei для шести тринуклеотидных и пяти динуклеотидных локусов были получены генетические характеристики, такие как число аллелей и генотипов, наблюдаемая и ожидаемая гетерозиготность, а также выравненность (степень равномерности распределения генотипов) и индекс Симпсона (табл. 1). В качестве внешней группы была использована небольшая выборка особей вида D. valentini. Было обнаружено, что наименьшим числом аллелей и генотипов характеризуется локус sc12962, а также для этого локуса характерно наибольшее отклонение наблюдаемой гетерозиготности от ожидаемой. Это связано с неравномерным распределением аллелей в популяциях (рис. 1) и значительным количеством гомозигот по аллелям “119” и “128” (названия аллелей соответствуют размерам в парах нуклеотидов, полученных при анализе длин амплифицированных фрагментов – фрагментом анализе). Отклонения значений наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготности были выявлены по всем проанализированным локусам, в связи с этим мы предположили наличие нуль-аллелей по каждому локусу (рис. 2). Как видно из рис. 2, наиболее вероятно присутствие подобных аллелей в случае локуса sc12962. Так как изучаемые локусы характеризуются высоким уровнем полиморфизма и поскольку данные виды относятся к одному роду кавказских скальных ящериц, была проведена оценка совпадающих аллельных вариантов у проанализированных особей D. raddei (оба подвида) и D. valentini (табл. П3). Согласно полученным результатам, наибольшее число совпадающих аллелей между разными видами было выявлено по локусу sc12962. На основании полученных данных мы исключили локус sc12962 из дальнейшего анализа, и таким образом оценка внутривидового разнообразия D. raddei проводилась на основании полиморфизма десяти микросателлитных локусов.

 

Таблица 1. Генетические характеристики микросателлитных локусов на выборках D. raddei и D. valentini (238 особей)

Локус

Число аллелей

Число генотипов

1 – D

Hexp

Hobs

Evenness

sc12962

13

28

0.82

0.74

0.26

0.53

sc4525

52

134

0.99

0.96

0.79

0.81

sc1422

33

90

0.98

0.94

0.76

0.79

sc138

27

65

0.96

0.91

0.69

0.68

sc149

41

107

0.98

0.94

0.86

0.76

sc12560

51

139

0.99

0.96

0.82

0.76

sc7287

35

85

0.98

0.93

0.67

0.73

sc1872

73

148

0.99

0.97

0.71

0.86

sc4045

25

56

0.94

0.86

0.71

0.59

sc10877

56

128

0.98

0.95

0.68

0.67

sc6476

53

145

0.99

0.96

0.85

0.80

Среднее

42

102

0.96

092

0.70

0.73

Примечание. 1 – D – индекс Симпсона (Simpson inde.x); Hexp – ожидаемая гетерозиготность (Nei’s, 1978); Hobs – наблюдаемая гетерозиготность; Evenness – выравненность.

 

Рис. 1. Число гомозиготных особей по микросателлитному локусу sc12962 на выборках D. raddei и D. valentini.

 

Рис. 2. Частота нуль-аллелей по каждому локусу на выборках D. raddei и D. valentine.

 

В табл. П4 приведены генетические параметры (ожидаемая и наблюдаемая гетерозиготность по Нею, выравненность (evenness) и индекс разнообразия Симпсона (1 – D)), полученные на основании полиморфизма десяти микросателлитных локусов и характеризующие внутривидовое разнообразие D. raddei. Они различаются для D. r. raddei и D. r. nairensis: D. r. raddei характеризуется большим числом аллелей и генотипов по сравнению с D. r. nairensis, при этом среднее значение выравненности отличается незначительно. Наиболее полиморфным является локус sc1872 – 71 аллель комбинируется в 142 генотипа. Однако значение наблюдаемой гетерозиготности по этому локусу было ниже, чем для большинства локусов. Наименее полиморфным является локус sc138: 27 аллелей образуют 65 генотипов, при этом величина наблюдаемой гетерозиготности составляет 0.72.

Генетические параметры популяций D. raddei

Популяции D. raddei sensu lato характеризуются различным количеством аллелей и выявленных генотипов, однако полиморфизм для каждого локуса случаен для каждой популяции. Наибольшее число аллелей и генотипов выявлено в популяции “Ереван” (табл. П5), в то время как значение параметра выравненности генотипов в этой популяции самое низкое. Наименьшее значение наблюдаемой гетерозиготности выявлено в популяции Горис, а наибольшее – в популяции Гандзасар и соответственно наиболее близкое к значению ожидаемой гетерозиготности. Частоты аллелей и генотипов для каждой популяции послужили основой для подсчета генотипического разнообразия и генетических дистанций.

Графическое выражение внутривидовой дифференциации и популяционной структуры комплекса Darevskia raddei sensu lato на основе генетических дистанций по Нею, рассчитанных по данным полиморфизма микросателлитных локусов, представлено на рис. 3. Все популяции разделились на три группы: в одну входят популяции D. r. raddei Гегард, Горис, Егегнадзор, Каджаран и Селимский перевал (группа D. r. raddei GG); в другую – популяции D. r. raddei Зуар, Гандзасар, Тартар, Татев и Нрнадзор (группа D. r. raddei TT); в отдельную группу входят все популяции D. r. nairensis и популяция D. r. raddei Гош.

 

Рис. 3. Неукорененное филогенетическое дерево популяций D. raddei, построенное на основании генетических расстояний по Нею с бутстреп-поддержкой в 100 итераций.

 

Внутривидовую дифференциацию D. raddei оценивали с помощью параметра GST, полученного при попарном сравнении популяций. Значения данного параметра представлены в виде тепловой карты на рис. П1. Все популяции разделяются на те же популяционные группы, как и при использовании генетических дистанций по Нею. Значения GST, полученные при попарном сравнении популяции D. r. raddei Гош и популяций D. r. nairensis, варьируют в пределах от 0.31 до 0.6, а при сравнении с популяциями D. r. raddei – в пределах от 0.62 до 0.93 (рис. П1). Таким образом, в дальнейшей работе мы объединили популяцию Гош с популяциями D. r. nairensis.

В табл. 2 приведены результаты оценки внутривидовой дифференциации D. raddei с помощью параметра GST с разбиением на три группы, описанные выше. Согласно проведенной оценке группы D. r. raddei ТТ и D. r. nairensis генетически ближе друг другу, нежели группы D. r. raddei TT и D. r. raddei GG – в первом случае значение индекса GST составляет величину 0.44, во втором случае – величину 0.81. Значение параметра GST при сравнении групп D. r. raddei GG и D. r. nairensis составляет 0.65. Это может свидетельствовать о более значительной дифференциации этих групп популяций.

 

Таблица 2. Внутривидовая дифференциация D. raddei на основании генетических дистанций GST

Попарные сравнения

GST

D. r. raddei–D. r. nairensis

0.36

D. r. raddei TT–D. r.nairensis

0.44

D. r. raddei GG–D. r.nairensis

0.65

D. r. raddei GG–D. r. raddei TT

0.81

 

Оценку свободной перекомбинации аллелей в пределах подвидов D. raddei проводили с помощью стандартизированного индекса ассоциаций (rd). Значение (rd) равное 0.13 (p = 0.018) для вида D. raddei в целом (т.е. для обоих подвидов) указывает на незначительную вероятность перекомбинации аллелей между подвидами (рис. 4,а), т.е. данные подвиды изолированы и скрещивание между их особями отсутствует. Значение индекса ассоциации для подвида D. r. raddei (рис. 4,б) составляет 0.145 (p = 0.008), а для подвида D. r. nairensis – 0.106 (p = 0.001) (рис. 4,в), что может свидетельствовать о значительной обособленности популяций в пределах каждого подвида. Анализ значений индекса ассоциаций в пределах групп D. r. raddei GG и D. r. raddei TT (рис. 5,а и 5,б соответственно) показал высокую вероятность свободного скрещивания между особями популяций внутри каждой группы.

 

Рис. 4. Индекс ассоциации (rd) подвидов D. raddei. а – без разделения на подвиды; б – D. r. raddei; в – D. r. nairensis.

 

Рис. 5. Индекс ассоциации (rd) групп популяций D. r. raddei GG (а) и D. r. raddei ТТ (б).

 

Использование метода дискриминантного анализа главных компонент (DAPC) на всей выборке вида D. raddei и внешней группе D. valentini позволило определить наличие трех генетических кластеров (K = 3), соответствующих виду D. valentini (красный цвет) и подвидам D. r. raddei (желтый цвет) и D. r. nairensis (синий цвет) (рис. 6,а). При разделении подвида D. r. raddei на две группы GG и TT и соответственно увеличении числа кластеров (К = 4) популяции вида D. raddei образуют три незначительно перекрывающиеся облака, соответствующих группам популяций D. r. raddei GG, D. r. raddei TT и D. r. nairensis (рис. 6,б).

 

Рис. 6. Кластеризация особей видов D. raddei и D. valentini на основании дискриминантного анализа главных компонент. а – число кластеров К = 3; б – число кластеров К = 4.

 

Обсуждение

Изучение внутривидового полиморфизма является одной из важных проблем биоразнообразия, особенно для некоторых видов позвоночных, участвующих в сетчатой эволюции. Одним из таких видов является Darevskia raddei, структура которого, несмотря на большой объем накопленной информации, до сих пор вызывает много вопросов. Особенностью данного вида является участие в качестве материнского при образовании ряда партеногенетических видов, таким образом имеющих гибридное происхождение и соответственно гибридные кариотипы [30]. При этом популяции D. r. raddei относят к материнским для партеновида D. rostombekowi, а популяции D. r. nairensis – для партеновидов D. unisexualis и D. uzzeli [6, 7]. В этой связи особую значимость получила проблема генетической дифференциации и таксономического статуса этих популяций. В различное время популяции D. r. raddei и D. r. nairensis относили к видам, подвидам или одному виду в зависимости от характера исследования, типа генетических маркеров, ареалов изучаемых популяций [31]. Ранее при использовании трех микросателлитных локусов нами были получены высокие показатели генетической дифференциации D. r. raddei и D. r. nairensis [12]. В настоящей работе они были подтверждены на расширенной популяционной выборке особей при использовании новой панели из 10 микросателлитных локусов и свидетельствуют о глубокой дивергенции этих популяций, позволяющей разделять их на подвидовые группы. Кроме того, показано, что популяции D. r. raddei характеризуются большим разнообразием по сравнению с D. r. nairensis и в свою очередь подразделены на две группы с различным составом популяций. Это свидетельствует о сложной популяционной структуре вида D. raddei в соответствии с его значительным морфологическим и цитогенетическим разнообразием [32]. В работе впервые проведен анализ индекса ассоциаций, который показал отсутствие свободной перекомбинации аллелей между подвидами, что свидетельствует об их изоляции и отсутствии скрещивания между особями.

Значение параметра GST = 0.36 между подвидами D. r. raddei и D. r. nairensis относительно невелико (табл. 2), несмотря на высокие показатели данного параметра при попарном сравнении групп популяций D. r. raddei GG, D. r. raddei TT и D. r. nairensis. Это может быть вызвано сходной частотой аллельных вариантов в данных группах, связанной с потоком генов между популяциями до разделения на подвиды [33]. Этим может объясняться частичное перекрывание спектров при дискриминантном анализе главных компонент.

Таким образом, в настоящей работе продемонстрирована возможность использования новых микросателлитных локусов для популяционно-генетических исследований кавказских скальных ящериц. По данным полиморфизма этих локусов подтвержден высокий уровень генетической дифференциации популяций D. r. raddei и D. r. nairensis на группы подвидового статуса. Кроме этого, отсутствие свободной перекомбинации аллелей позволяет предположить и репродуктивную изоляцию подвидов D. raddei, это в совокупности с молекулярно-генетической дифференциацией свидетельствует о глубокой их дивергенции. Новые характеристики популяционной структуры вида D. raddei связаны с обнаружением двух генетически различающихся групп популяций у самого подвида D. r. raddei, одна из которых оказалась генетически ближе другому подвиду D. r. nairensis. Выявлена достоверная кластеризация особей из популяции Гош с образцами подвида D. r. nairensis. Таким образом подтверждено генетическое сходство этих групп, ранее обсуждавшееся в ряде работ [6, 34]. Ящерицы из Южной Армении разделяются на два основных кластера, где имеются видимые различия по окраске и размерным характеристкам. Все ящерицы из популяций Зуар, Гандзасар, Тартар, Татев и Нрнадзор (группа D. r. raddei TT) отличаются наличием зеленого цвета в окраске спины и брюха, ярким паттерном рисунка и крупными размерами. В кластере D. r. raddei из популяций Гегард, Горис, Егегнадзор, Каджаран и Селимский перевал (группа D. r. raddei GG) большая часть ящериц не имеет зеленого цвета в окраске, отличается наличием больше желтого цвета на брюхе и слабым рисунком вдоль хребта, а также более мелкими размерами, особенного среди самок. У большинства из них характер фолидоза преанальной области, рисунок спины и окраска не отличаются от таковых у партеногенетического дочернего вида D. rostombekowi, что наталкивает на определенные предположения о локации материнской популяции, давшей начало данному партеновиду.

Авторы выражают благодарность В.Е. Спангенбергу за помощь в сборе биологического материала.

Исследование выполнено при поддержке гранта РНФ № 19-14-00083 и с использованием приборов ЦКП ИБГ РАН.

Все применимые международные, национальные и/или институциональные принципы ухода и использования животных были соблюдены.

Авторы заявляют, что у них нет конфликта интересов.

 

Дополнительные материалы для этой статьи доступны по ссылке: doi 10.31857/S0016675824030069 для авторизованных пользователей

×

作者简介

D. Odegov

Institute of Gene Biology Russian Academy of Sciences

编辑信件的主要联系方式.
Email: irena-m@yandex.ru
俄罗斯联邦, Moscow, 117334

A. Valyaeva

Institute of Gene Biology Russian Academy of Sciences

Email: irena-m@yandex.ru
俄罗斯联邦, Moscow, 117334

M. Arakelyan

Yerevan State University

Email: irena-m@yandex.ru
亚美尼亚, Erevan, 0025

A. Ryskov

Institute of Gene Biology Russian Academy of Sciences

Email: irena-m@yandex.ru
俄罗斯联邦, Moscow, 117334

V. Korchagin

Institute of Gene Biology Russian Academy of Sciences

Email: irena-m@yandex.ru
俄罗斯联邦, Moscow, 117334

I. Martirosyan

Institute of Gene Biology Russian Academy of Sciences

Email: irena-m@yandex.ru
俄罗斯联邦, Moscow, 117334

参考

  1. Arribas O.J. Phylogeny and relationships of the mountain lizards of Europe and Near East (Archaeolacerta Merttens, 1921, sensu lato) and their relationships among the Eurasian Lacertid lizards // Rus. J. Herpetol. 1999. V. 6. № 1. P. 1–22. https://doi.org/10.30906/1026-2296-1999-6-1-1-22
  2. Boettger O. Kriechthiere der Kaukasusländer, gesammelt durch die Radde-Valentin’sche Expedition nach dem Karabagh und durch die Herren Dr. J. Valentin un P. Reibisch // Ber Senck Ges. 1892: 131−150 P.
  3. Даревский И. С. Скальные ящерицы Кавказа (Систематика, экология и филогения полиморфной группы кавказских ящериц подрода Archaeolacerta). Л.: Наука, Ленингр. отд., 1967. 214 с.
  4. Eiselt J., Schmidtle, J.F., Darevsky I.S. Untersuchungen an Felseidechsen (Lacerta saxicola-Komplex) in der östlichen Türkei. 2. Eine neue Unterart der Lacerta raddei BOETTGER, 1892 (Squamata: Sauria: Lacertidae) // Herpetozoa. 1993. V. 6. № 1/2. P. 65 – 70.
  5. Rastegar-Pouyani N., Karamiani R., Oraei H. et al. A New Subspecies of Darevskia raddei (Boettger, 1892) (Sauria: Lacertidae) from the West Azerbaijan Province, Iran // Asian Herpetol. Research. 2011. V. 2. № 4. P. 216–222. https://doi.org/10.3724/sp.j.1245.2011.00216
  6. Moritz C., Uzzel T., Spolsky C. et al. The maternal ancestry and approximate age of parthenogenetic species of Caucasian rock lizards (Lacerta: Lacertidae) // Genetica. 1992. V. 87. P. 53–62. https://doi.org/10.1007/bf00128773
  7. Freita, S., Rocha S., Campos J. et al. Parthenogenesis through the ice ages: A biogeographic analysis of the parthenogenetic rock lizards (genus Darevskia) // Mol. Phylogenet. Evol. 2016. V. 102. P. 117–127. https://doi.org/10.1016/j.ympev.2016.05.035
  8. Bobyn M.L., Darevsky I.S., Kupriyanova L.A. Allozyme variation in populations of Lacerta raddei and Lacerta nairensis from Armenia // Amphibia–Reptilia. 1996. V. 17. P. 233–246. https://doi.org/10.1163/156853896X00414
  9. Yanchukov A., Tarkhnishvili D., Erdolu M. et al. Precise paternal ancestry of hybrid unisexual ZW lizards (genus Darevskia: Lacertidae: Squamata) revealed by Z-linked genomic markers // Biol. J. Linnean Society. 2022. V. 136. № 2. P. 293 – 305. https://doi.org/10.1093/biolinnean/blac023
  10. Carretero M.A., García-Muñoz E., Argaña E. et al. Parthenogenetic Darevskia lizards mate frequently if they have the chance: A quantitative analysis of copulation marks in a sympatric zone // J. Nat. History. V. 52. № 7–8. P. 405–413. https://doi.org/10.1080/00222933.2018.1435832
  11. Гирнык А.Е., Вергун А.А., Рысков А.П. Идентификация гибридных особей скальных ящериц Darevskia armeniaca×Darevskia valentini на основе микросателлитного генотипирования // Генетика. 2023. T. 59. № 6. С. 723–727. https://doi.org/10.31857/S0016675823060073
  12. Омельченко А.В., Гирнык А.Е., Осипов Ф.А. и др. Генетическая дифференциация природных популяций ящериц комплекса Darevskia raddei по данным микросателлитного маркирования геномов // Генетика. 2016. Т. 52. № 2. С. 260–264. https://doi.org/10.1134/S1022795416020083
  13. Ochkalova S., Korchagin V., Vergun A. et al. First genome of rock lizard Darevskia valentini involved in formation of several parthenogenetic species // Genes. 2022. V. 13. № 9. https://doi.org/10.3390/genes13091569
  14. Thiel T., Michalek W., Varshney R. et al. Exploiting EST databases for the development and characterization of gene-derived SSR-markers in barley (Hordeum vulgare L.) // Theor Appl Genet. 2003. V. 106. № 3. P. 411–422. https://doi.org/10.1007/s00122-002-1031-0
  15. Quinlan A.R., Hall I.M. BEDTools: A flexible suite of utilities for comparing genomic features // Bioinformatics. 2010. V. 26. № 6. P. 841–842. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btq033
  16. Untergasser A., Cutcutache I., Koressaar T. et al. Primer3 – new capabilities and interfaces // Nucl. Acids Res. 2012. V. 40. № 15. P. 115. https://doi.org/10.1093/nar/gks596
  17. Koressaar T., Remm M. Enhancements and modifications of primer design program Primer3 // Bioinformatics. 2007. V. 23. № 10. P. 1289–1291. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btm091
  18. Camacho C., Coulouris G., Avagyan V. et al. BLAST+: architecture and applications // BMC Bioinformatics. 2009. V. 10. P. 421. https://doi.org/10.1186/1471-2105-10-421
  19. Jombart T. adegenet: A R package for the multivariate analysis of genetic markers // Bioinformatics. 2008. V. 24. № 11. P. 1403–1405. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btn129
  20. Jombart T., Ahmed I. adegenet 1.3-1: New tools for the analysis of genome-wide SNP data // Bioinformatics. 2011. V. 27. № 21. P. 3070–3071. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btr521
  21. R Core Team. R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing. Vienna, Austria, 2022. https://www.R-project.org/
  22. Goudet J. Hierfstat, a package for R to compute and test hierarchical F-statistics // Mol. Ecol. Notes. 2005. V. 5. № 1. P. 184–186. https://doi.org/10.1111/j.1471-8286.2004.00828.x
  23. Paradis E. pegas: An R package for population genetics with an integrated–modular approach // Bioinformatics. 2010. V. 26 № 3. P. 419–420. https://doi.org/ 10.1093/bioinformatics/btp696
  24. Kamvar Z.N., Tabima J.F., Grünwald N.J. Poppr: An R package for genetic analysis of populations with clonal, partially clonal, and/or sexual reproduction // PeerJ. 2014. https://doi.org/10.7717/peerj.281
  25. Nei M. Molecular Evolutionary Genetics, N. Y. Chichester, West Sussex: Columbia Univ. Press, 1987. 514 p. https://doi.org/10.7312/nei-92038
  26. Hedrick P.W. A standardized genetic differentiation measure // Evolution. 2005. V. 59. № 8. P. 1633–1638. https://doi.org/10.1111/j.0014-3820.2005.tb01814.x
  27. Meirmans P.G, Hedrick P.W. Assessing population structure: FST and related measures // Mol. Ecol. Resources. 2011. V. 11. № 1. P. 5–18. https://doi.org/10.1111/j.1755-0998.2010.02927.x
  28. Jombart T., Devillard S. and Balloux F. Discriminant analysis of principal components: A new method for the analysis of genetically structured populations // BMC Genetics. 2010. V. 11. № 94. https://doi.org/10.1186/1471-2156-11-94
  29. Kamvar Z.N., Brooks J.K., Grunwald N.J. New R tools for analyzing genome-wide population genetic data with a focus on clonality // Front. Genet. 2015. V. 6. https://doi: 10.3389/fgen.2015.00208
  30. Spangenberg V., Kolomiets O., Stepanyan I. et al. Evolution of the parthenogenetic rock lizard hybrid karyotype: Robertsonian translocation between two maternal chromosomes in Darevskia rostombekowi // Chromosoma. 2020. V. 129. № 3–4. P. 275–283. https://doi: 10.1007/s00412-020-00744-7
  31. Гречко В.В., Банникова А.А., Косушкин С.А. и др. Молекулярно-генетическое разнообразие комплекса ящериц Darevskia raddei (Lacertidae: Sauria): ранние этапы видообразования // Мол. биология. 2007. Т. 41. № 5. С. 839–851. https://doi.org/10.1134/S0026893307050093
  32. Spangenberg V., Arakelyan M., Galoyan E. et al. Extraordinary centromeres: Differences in the meiotic chromosomes of two rock lizards species Darevskia portschinskii and Darevskia raddei // PeerJ 2019. https://doi.org/10.7717/peerj.6360
  33. Cota L.G., Moreira P.A. Brandão M.M. et al. Structure and genetic diversity of Anacardium humile (Anacardiaceae): A tropical shrub // Genet. and Mol. Research. 2017. V. 16. № 3. P. 1–13. http://dx.doi.org/10.4238/gmr16039778
  34. Валяева А.А., Мартиросян И.А. Генетический полиморфизм локуса du47g в популяциях скальных ящериц Darevskia raddei Армении // Актуальные вопросы зоологии, экологии и охраны природы. 2021. Вып. 3. С. 30–34.

补充文件

附件文件
动作
1. JATS XML
下载
2. Fig. 1. The number of homozygous individuals at the microsatellite locus sc12962 in the samples of D. raddei and D. valentini.

下载 (11KB)
索引源数据
3. Fig. 2. The frequency of null alleles at each locus in the D. raddei and D. valentine samples.

下载 (15KB)
索引源数据
4. Fig. 3. An unrooted phylogenetic tree of D. raddei populations, built on the basis of genetic distances along It with bootstrap support in 100 iterations.

下载 (3KB)
索引源数据
5. Fig. 4. Index of the association ( ) of subspecies of D. raddei. a – without division into subspecies; b – D. R. raddei; c – D. R. nairensis.

下载 (29KB)
索引源数据
6. Fig. 5. Index of association () of population groups D. R. raddei GG (a) and D. R. raddei TT (b).

下载 (21KB)
索引源数据
7. Fig. 6. Clustering of individuals of D. raddei and D. valentini species based on discriminant analysis of the main components. a – the number of clusters K = 3; b – the number of clusters K = 4.

下载 (27KB)
索引源数据
8. Table 1. Localities of biological material collection. N is the number of samples
下载 (1MB)
索引源数据

版权所有 © Russian Academy of Sciences, 2024

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».