Определение В-клеточной клональности методом пцр: какой электрофоретический метод лучше?

Цель исследования. Сравнить диагностическую эффективность определения В-клеточной клональности при использовании разных электрофоретических методов. Материалы и методы. Исследован материал 89 пациентов (48 - с В-клеточными лимфомами, 11 - с В-клеточными лимфомами в ремиссии, 24 - с реактивными процессами, 6 - с лимфогранулематозом и Т-клеточными лимфомами) и 10 здоровых доноров. Клональностъ определяли по реаранжировкам генов тяжелой цепи иммуноглобулина (Ig). Использовали оригинальный набор праймеров к FR2 области гена иммуноглобулина. В качестве электрофоретических методов использовали агарозный электрофорез и метод SSCP (анализ конформационного полиморфизма одноцепочечных фрагментов ДНК в полиакриламидном геле). Результаты. Клональность выявляется при наличии более 5,9% клональных клеток от общего количества мононуклеаров или более 20% клональных клеток от общего количества В-лимфоцитов в образце. В нашей работе выявляемость В-клональности при В-клеточных опухолях составила 87,5% (42 из 48 случаев). Ложноотрицательные пробы были дополнительно исследованы при помощи наборов праймеров к FR1- и FR3-областям, однако клональность не была выявлена. Среди реактивных процессов, не B-клеточных опухолей и здоровых доноров клональность была выявлена в 1 случае из 41, у пациента с острой респираторной вирусной инфекцией. Результаты агарозного электрофореза и SSCP-анализа полностью совпали. Заключение. Определение B-клеточной клональности с помощью агарозного электрофореза показало себя как простой, надежный, недорогой и воспроизводимый метод дифференциальной диагностики опухолевой и реактивной лимфопролиферации. Данный метод не подходит для подтверждения ремиссии опухоли или оценки минимальной остаточной болезни в связи с его низкой чувствительностью.

клональность В-клеточная, перестройки генов тяжелых цепей иммуноглобулинов, молекулярная диагностика, лимфом