Development and validation of a procedure for the quantitative determination of polysaccharides in linden flowers

封面

如何引用文章

全文:

开放存取 开放存取
受限制的访问 ##reader.subscriptionAccessGranted##
受限制的访问 订阅存取

详细

Introduction. Linden flowers are pharmacopeial medicinal plant raw material (MPRM), containing polysaccharides. Nowadays, according to the current regulatory documentation, the assessment of the content of biologically active substances (BAS) is carried out only for flavonoids. To improve the standardization of linden flowers, the development and validation of the spectrophotometric procedure of polysaccharides determination with anthrone reagent is proposed to be relevant.

Objective: To develop and validate a procedure for the quantitative determination of polysaccharides in linden flowers.

Material and methods. In the development and validation of the procedure we used the method of differential spectrophotometry based on the complexation reaction of linden hydrolysate sugars with an anthrone reagent. The resulting complex has an absorption maximum of 625±2 nm, the reference standard (RS) of glucose was used as a comparison solution. The influence of extraction conditions on the yield of polysaccharides from raw materials was studied: the size of raw material particles, the ratio of raw material and extractant, the duration of extraction, as well as the selection of optimal conditions for the complexation reaction. Validation of the procedure was carried out according to the indicators: specificity, linearity and representativeness, trueness, repeatability, intermediate precision (reproducibility).

Results. The optimal parameters of polysaccharides extraction from raw material were determined (three-stage extraction with distilled water on a water bath, the ratio “raw material – extractant” – 1:30 for 30 minutes, the size of raw material particles – 2,0 mm). The conditions of complex formation reaction were selected (ratio “extract – complexing agent” – 1:2, complexing agent is anthrone reagent, appearance of stable coloring of the solution in 25 minutes). During the validation of the developed procedure, it was found that the validation characteristics are within the criteria of acceptability. In the analysis of linden flowers, it was found that the content of reducing sugars in the polysaccharide composition was 1,9–3,1%.

Conclusion. Optimal parameters of polysaccharide extraction from raw materials were determined, conditions of complex formation reaction were selected, and the procedure validation was carried out. The total content of reducing sugars in the polysaccharide composition in terms of absolutely dry raw material in linden flowers using differential spectrophotometry was determined.

作者简介

Mikhail Rodin

I.M. Sechenov First Moscow State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)

Email: rodin_m_n@staff.sechenov.ru
ORCID iD: 0000-0001-9532-6879

PhD Student, Assistant of the Pharmaceutical Natural Sciences Department at the Institute of Pharmacy named after A.P. Nelyubin

俄罗斯联邦, Москва

Dmitry Bokov

I.M. Sechenov First Moscow State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University); Federal Research Center of Nutrition and Biotechnology

Email: bokov_d_o@staff.sechenov.ru
ORCID iD: 0000-0003-2968-2466

PhD in Pharmaceutical Sciences, Associate Professor of the Pharmaceutical Natural Sciences Department at the Institute of Pharmacy named after A.P. Nelyubin; Researcher of the Laboratory of Chemistry of Food Products

俄罗斯联邦, Moscow; Moscow

Sabina Kakhramanova

I.M. Sechenov First Moscow State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University); Scientific Centre for Expert Evaluation of Medical Products

Email: ksd113@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8160-7829

1st Professional Category Expert of the Herbal and Homeopathic Products Laboratory at the Testing Centre for Evaluation of Medical Products’ Quality

俄罗斯联邦, Moscow; Moscow

Irina Samylina

I.M. Sechenov First Moscow State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University)

编辑信件的主要联系方式.
Email: samylina_i_a@staff.sechenov.ru
ORCID iD: 0000-0002-4895-0203

Doctor of Pharmaceutical Sciences, Corresponding Member of the RAS, Professor of the Pharmaceutical Natural Sciences Department at Institute of Pharmacy named after A.P. Nelyubin

俄罗斯联邦, Moscow

参考

  1. Государственная Фармакопея Российской Федерации, XV изд., том II, ФС.2.5.0024. «Липы цветки». [Электронное издание]. Режим доступа: https://pharmacopoeia.regmed.ru/pharmacopoeia/izdanie-15/2/2-3/lipy-tsvetki/ [Дата обращения 2 августа, 2024]. [The State Pharmacopoeia of The Russian Federation, XV ed., volume II, PM.2.5.0024. «Linden flowers». [Electronic edition]. Access mode: https://pharmacopoeia.regmed.ru/pharmacopoeia/izdanie-15/2/2-3/lipy-tsvetki/ [Accessed 2 August, 2024] (in Russian)].
  2. Родин М.Н., Боков Д.О., Лазарева Н.Б. Исследование профиля флавоноидов цветков липы. Фармация. 2024; 73 (3): 10–4. doi: 10.29296/25419218-2024-03-02. [Rodin M.N., Bokov D.O., Lazareva N.B. Study of flavonoids profile of linden flowers. Farmatsiya. 2024; 73 (3): 10–4. doi: 10.29296/25419218-2024-03-02 (in Russian)].
  3. State Register of Medicinal Remedies Retrieved from: https://grls.minzdrav.gov.ru/Default.aspx
  4. Дьякова Н.А., Сливкин А.И., Гапонов С.П. и др. Особенности накопления восстанавливающих сахаров цветками липы сердцевидной (Tilia cordata Miller, 1768) в Воронежской области. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2021; 10 (4): 147–53. doi: 10.33380/2305-2066-2021-10-4-147-153. [Dyakova N.A., Slivkin A.I., Gaponov S.P., Bobina E.A., Shishorina L.A. Accumulation of Reducing Sugars by Small-leaved Linden Flowers (Tilia cordata Miller, 1768) in the Voronezh Region of Russia. Drug development & registration. 2021; 10 (4): 147–53. doi: 10.33380/2305-2066-2021-10-4-147-153 (in Russian)].
  5. Kosakowska O.K., Baczek K., Przybył J.L. et al. Intraspecific variability in the content of phenolic compounds, essential oil and mucilage of small-leaved lime (Tilia cordata Mill.) from Poland. Industrial Crops and Products. 2015; 78: 58–65. doi: 10.1016/j.indcrop.2015.10.002.
  6. Попов Д.М., Зарубина Н.В. Сравнительное качественное и количественное определение углеводов в цветках и листьях липы сердцевидной. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2013; 2: 50–3. [Popov D.M., Zarubina N.V. Comparative qualitative and quantitative determination of carbohydrates in flowers and leaves of small-leaved lime. Drug development & registration. 2013; 2: 50–3 (in Russian)].
  7. Chinou I. Assessment report on Tilia cordata Miller, Tilia platyphyllos Scop., Tilia x vulgaris Heyne or their mixtures, flos. European Medicines Agency/Science Medicines Health. 2012.
  8. Государственная Фармакопея Российской Федерации, XIV изд., том IV. [Электронное издание]. Режим доступа: https://femb.ru/record/pharmacopea14 [Дата обращения 2 августа, 2024]. [The State Pharmacopoeia of The Russian Federation, XIV ed., volume IV. [Electronic edition]. Access mode: https://femb.ru/record/pharmacopea14 [Accessed 2 August, 2024] (in Russian)]
  9. Боровикова Н.А., Попов Д.М., Селезенев Н.Г. Исследование водных извлечений из корневищ с корнями девясила, цветков липы и листьев подорожника. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2013; 3: 62–8. [Borovikova N.A., Popov D.M., Selezenev N.G. Study of aqueous extracts of elecampane rhizomes with roots, linden flowers and plantain leaves. Drug development & registration. 2013; 3: 62–8 (in Russian)].
  10. Попов Д.М., Боровикова Н.А., Селезенев Н.Г. Метод ВЭЖХ и определение углеводов в лекарственном растительном сырье. Фармация. 2014; 1: 3–5. [Popov D.M., Borovikova N.A., Selezenev N.G. HPLC method and determination of carbohydrates in medicinal plant raw materials. Farmatsiya. 2014; 1: 3–5 (in Russian)].
  11. Жаркова Т.А., Ляшенко А.О. Фармакогностичское исследование листьев липы сердцевидной, произрастающей в Московской области. Природные соединения и здоровье человека. 2023; 41–6. [Zharkova T.A., Lyashenko A.O. Pharmacognostic study of small-leaved lime leaves growing in the Moscow region. Natural compounds and human health. 2023; 41–6 (in Russian)].
  12. Кахраманова С.Д., Боков Д.О., Самылина И.А. Количественное определение полисахаридов в лекарственном растительном сырье. Фармация. 2020; 69 (8): 5–12. doi: 10.29296/25419218-2020-08-01. [Kakhramanova S.D., Bokov D.O., Samylina I.A. Quantification of polysaccharides in medicinal plant raw materials. Farmatsiya. 2020; 69 (8): 5–12. doi: 10.29296/25419218-2020-08-01 (in Russian)].
  13. Государственная Фармакопея Российской Федерации, XV изд., том I, ОФС.1.2.3.0019. «Определение сахаров спектрофотометрическим методом». [Электронное издание]. Режим доступа: https://pharmacopoeia.regmed.ru/pharmacopoeia/izdanie-15/1/1-2/1-2-3-metody-kolichestvennogo-opredeleniya/opredelenie-sakharov-spektrofotometricheskim-metodom/ [Дата обращения 2 августа, 2024]. [The State Pharmacopoeia of The Russian Federation, XV ed., volume I, GPM.1.2.3.0019. «Determination of sugars by spectrophotometric method». [Electronic edition]. Access mode: https://pharmacopoeia.regmed.ru/pharmacopoeia/izdanie-15/1/1-2/1-2-3-metody-kolichestvennogo-opredeleniya/opredelenie-sakharov-spektrofotometricheskim-metodom/ [Accessed 2 August, 2024] (in Russian)].
  14. Государственная Фармакопея Российской Федерации, XV изд., том I, ОФС.1.1.0013. «Статистическая обработка результатов физических, физико-химических и химических испытаний». [Электронное издание]. Режим доступа: https://pharmacopoeia.regmed.ru/pharmacopoeia/izdanie-15/1/1-1/statisticheskaya-obrabotka-rezultatov-fizicheskikh-fiziko-khimicheskikh-i-khimicheskikh-ispytaniy/ [Дата обращения 2 августа, 2024]. [The State Pharmacopoeia of The Russian Federation, XV ed., volume I, GPM.1.1.0013. «Statistical processing of the results of physical, physicochemical and chemical tests». [Electronic edition]. Access mode: https://pharmacopoeia.regmed.ru/pharmacopoeia/izdanie-15/1/1-1/statisticheskaya-obrabotka-rezultatov-fizicheskikh-fiziko-khimicheskikh-i-khimicheskikh-ispytaniy/ [Accessed 2 August, 2024] (in Russian)].
  15. Государственная Фармакопея Российской Федерации, XV изд., том I, ОФС.1.1.0012. «Валидация аналитических методик». [Электронное издание]. Режим доступа: https://pharmacopoeia.regmed.ru/pharmacopoeia/izdanie-15/1/1-1/validatsiya-analiticheskikh-metodik/ [Дата обращения 2 августа, 2024]. [The State Pharmacopoeia of The Russian Federation, XV ed., volume I, GPM.1.1.0012. «Validation of analytical procedures». [Electronic edition]. Access mode: https://pharmacopoeia.regmed.ru/pharmacopoeia/izdanie-15/1/1-1/validatsiya-analiticheskikh-metodik/ [Accessed 2 August, 2024] (in Russian)].
  16. Тринеева О.В., Сливкин А.И., Воропаева С.С. Разработка и валидация методики количественного определения флавоноидов в листьях крапивы двудомной. Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2014; 1: 138–44. [Trineeva O.V., Slivkin A.I., Voropayeva S.S. Development and validation of the method of quantitative determination of flavonoids in stinging nettle leaves. Vestnik Voronezhskogo Gosudarstvennogo Universiteta. Seriya: Khimiya. Biologiya. Farmatsiya. 2014; 1: 138–44 (in Russian)].
  17. Тринеева О.В., Сливкин А.И. Определение суммы полисахаридов и простых сахаров в листьях крапивы двудомной. Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2017; 1: 164–9. [Trineeva O.V., Slivkin A.I. Determination of the sum of polysaccharides and simple sugars in the leaves of stinging nettle. Vestnik Voronezhskogo Gosudarstvennogo Universiteta. Seriya: Khimiya. Biologiya. Farmatsiya. 2017; 1: 164–9 (in Russian)].
  18. Барсукова Ю.Н., Мельникова О.А., Мельников М.Ю. Разработка и валидация методики спектрофотометрического определения кислоты аминокапроновой в многокомпонентном гемостатическом средстве. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2018; 1: 76–83. [Barsukova Yu.N., Melnikova O.A., Melnikov M.Yu. Development and validation of spectrophotometric techniques of determination of aminocaproic acid in a multi-component hemostatic agent. Drug development & registration. 2018; 1: 76–83 (in Russian)].
  19. Джавахян М.А., Токарева М.Г., Прожогина Ю.Э., Каленикова Е.И. Разработка капсул «Седофлав», стандартизация и валидация методики количественного определения суммы флавоноидов. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2020; 9 (3): 118–27. doi: 10.33380/2305-2066-2020-9-3-118-127. [Dzhavakhyan M.A., Tokareva M.G., Prozhogina Yu.E., Kalenikova E.I. Pharmaceutical Development of «Sedoflav» Capsules, Standardization and Validation of Flavonoids Assay Methods. Drug development & registration. 2020; 9 (3): 118–27. doi: 10.33380/2305-2066-2020-9-3-118-127 (in Russian)].
  20. Кутателадзе Г.Р., Федосеева Л.М. Исследования по разработке и валидации методики количественного определения флавоноидов в щавеля кислого траве, заготовленной на территории Алтайского края. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2019; 8 (2): 80–6. doi: 10.33380/2305-2066-2019-8-2-80-86. [Kutateladze G.R., Fedoseeva L.M. Research in the Development and Validation of the Method of Quantitative Determination of Flavonoids in the Common Sorrel Herba, Gathered in the Altai Territory. Drug development & registration. 2019; 8 (2): 80–6. doi: 10.33380/2305-2066-2019-8-2-80-86 (in Russian)].
  21. Тринеева О.В., Казьмина М.А., Сливкин А.И. Разработка и валидация методики определения суммы свободных и связанных простых сахаров в плодах облепихи крушиновидной. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2017; 1: 138–43. [Trineeva O.V., Kazmina M.A., Slivkin A.I. Development and validation of methods for determining the amount of free and related simple sugars in the fruit of sea buckthorn. Drug development & registration. 2017; 1: 138–43 (in Russian)].

补充文件

附件文件
动作
1. JATS XML
下载
2. Fig. 1. Absorption spectra (1 – aqueous extract from linden flowers; 2 – RS of glucose)

下载 (198KB)
索引源数据
3. Fig. 2. Influence of the concentration of complexing agent on the results of determination of reducing sugars in the extract

下载 (171KB)
索引源数据
4. Fig. 3. Influence of the finesse of MPRM on the yield of polysaccharides in the extract

下载 (137KB)
索引源数据
5. Fig. 4. Effect of extraction time on the content of reducing sugars in the extract

下载 (158KB)
索引源数据
6. Fig. 5. Graph of dependence of optical density on glucose concentration

下载 (219KB)
索引源数据

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».