Моделирование процессов трансэндотелиального транспорта ЛПНП и миграции макрофагов
- Авторы: Чередниченко В.Р.1, Хованцева У.С.1, Кузьмин В.В.2, Чертович Н.Ф.2, Маркин А.М.3
-
Учреждения:
- ГНЦ РФ ФГБНУ «Российский научный центр хирургии имени академика Б.В. Петровского»
- ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»
- ГНЦ РФ ФГБНУ «Российский научный центр хирургии имени академика Б.В. Петровского»»
- Выпуск: Том 27, № 3 (2024)
- Страницы: 499-504
- Раздел: КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
- URL: https://journal-vniispk.ru/1028-7221/article/view/267516
- DOI: https://doi.org/10.46235/1028-7221-16678-MTP
- ID: 267516
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Атеросклероз можно рассматривать как многофакторный процесс, включающий различные патологические механизмы, такие как воспаление, модификация липопротеинов, накопление холестерина, дисфункция эндотелия, окислительный стресс и, в конечном счете, образование атеросклеротической бляшки. Основными участниками развития данного заболевания являются эндотелиальные клетки, лейкоциты и гладкомышечные клетки интимы. Эндотелий взрослого человека содержит гетерогенные клетки, включая типичные эндотелиальные клетки (ТЭК) и гигантские многоядерные варианты ЭК (МВЭК). Процесс пропускания молекул называется трансэндотелиальным транспортом (ТЭТ).
Цель данной работы: моделирование процессов трансэндотелиального транспорта липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) и миграции моноцитов с использованием различных вариантов эндотелиальных клеток.
В настоящем исследовании использовали клеточную линию эндотелиальных клеток (ЭК) человека (EA.hy926). Многоядерные варианты эндотелиальных клеткок (МВЭК) получали путем обработки ЭК 50%-ным раствором полиэтиленгликоля 6000. Для исследования трансцитоза ЛПНП и миграции моноцитов использовали планшеты со вставками (0,4 или 3,0 мкм диаметр пор, соответственно), формирующими двухуровневую систему. Скорость пропускания ЛПНП оценивали путем измерения количества холестерина в верхней и нижней камере через каждые 2, 5 и 24 часа. Для измерения количества холестерина использовали модифицированный метод Фолча. Содержание холестерина корректировали по общему уровню белка в лунке, измеренному методом Лоури. Миграцию макрофагов оценивали прямым подсчетом количества клеток.
Содержание интернализованного холестерина в МВЭК было статистически значимо выше, чем в ЭК, в то время как скорость транспорта ЛПНП не различалась. Скорость прохождения макрофагами эндотелиального барьера, сформированного МВЭК, была выше в точках 2 и 5 часов, однако через 24 часа количество мигрировавших клеток не отличалось.
Обнаружено, что скорость трансэндотелиального транспорта для типичных и многоядерных вариантов эндотелиальных клеток статистически не различается через 2, 5 и 24 часа. Хоть наличие МВЭК не виляет на транспорт липопротеидов в субэндотелиальный слой, тот факт, что многоядерные клетки аккумулируют липидные капли активнее, чем типичные ЭК, может указывать на важное значение в патогенезе атеросклероза. Скорость миграции макрофагов спустя 2 и 5 часов была выше для МВЭК, чем для ТЭК, тогда как незрелые макрофаги в течение 24 часов не мигрировали через эндотелиальный барьер.
Полный текст
Открыть статью на сайте журналаОб авторах
В. Р. Чередниченко
ГНЦ РФ ФГБНУ «Российский научный центр хирургии имени академика Б.В. Петровского»
Автор, ответственный за переписку.
Email: cherednichenko_vadim@bk.ru
младший научный сотрудник отдела патологической морфологии лаборатории клеточной и молекулярной патологии сердечно-сосудистой системы
Россия, МоскваУ. С. Хованцева
ГНЦ РФ ФГБНУ «Российский научный центр хирургии имени академика Б.В. Петровского»
Email: cherednichenko_vadim@bk.ru
младший научный сотрудник отдела патологической морфологии лаборатории клеточной и молекулярной патологии сердечно-сосудистой системы
Россия, МоскваВ. В. Кузьмин
ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»
Email: cherednichenko_vadim@bk.ru
студент биотехнологического факультета
Россия, МоскваН. Ф. Чертович
ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»
Email: cherednichenko_vadim@bk.ru
инженер-исследователь отдела патологической морфологии лаборатории клеточной и молекулярной патологии сердечно-сосудистой системы
Россия, МоскваА. М. Маркин
ГНЦ РФ ФГБНУ «Российский научный центр хирургии имени академика Б.В. Петровского»»
Email: cherednichenko_vadim@bk.ru
младший научный сотрудник отдела патологической морфологии лаборатории клеточной и молекулярной патологии сердечно-сосудистой системы
Россия, МоскваСписок литературы
- Челомбитько М.А., Шишкина В.С., Ильинская О.П., Каминный А.И., Павлунина Т.О., Самовилова Н.Н., Грачева Е.В., Тарарак Э.М., Проказова Н.В. Цитофлуориметрическое изучение мембранных рафтов на субпопуляциях моноцитов человека при атеросклерозе // Acta Naturae, 2014. № 4 (23). С. 86-94. [Chelombitko M.A., Shishkina V.S., Ilyinskaya O.P., Kaminny A.I., Pavlunina T.O., Samovilova N.N., Gracheva E.V., Tararak E.M., Prokazova N.V. Cytofluorimetric study of membrane rafts on subpopulations of human monocytes in atherosclerosis. Acta Naturae = Acta Naturae, 2014, no. 4 (23). pp. 86-94. (In Russ.)]
- Folch J., Lees M., Sloane Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues. J. Biol. Chem., 1957. no. 1 (226), pp. 497-509.
- Kiseleva D., Kolmogorov V., Cherednichenko V., Khovantseva U., Bogatyreva A., Markina Y., Gorelkin P., Erofeev A., Markin A. Effect of LDL Extracted from human plasma on membrane stiffness in living endothelial cells and macrophages via scanning ion conductance microscopy. Cells, 2024, Vol 13, no. 4, 358. doi: 10.3390/cells13040358.
- Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951, Vol. 193, no. 1. pp. 265-275.
- Nikiforov N.G., Zlenko D.V., Orekhova V.A., Melnichenko A.A., Orekhov A.N. Local Accumulation of Lymphocytes in the Intima of Human Aorta Is Associated with Giant Multinucleated Endothelial Cells: Possible Explanation for Mosaicism of Atherosclerosis. Int. J. Mol. Sci., 2022, Vol, 23. no. 3, 1059. doi: 10.3390/ijms23031059.
- Shirinsky V.P., Antonov AS, Birukov KG, Sobolevsky AV, Romanov YA, Kabaeva NV, Antonova GN, Smirnov VN. Mechano-chemical control of human endothelium orientation and size. J. Cell Biol., 1989, Vol. 109, no. 1, pp. 331-339.
- Sun X., Belkin N., Feinberg M.W. Endothelial microRNAs and atherosclerosis. Curr. Atheroscler. Rep.. 2013, Vol. 12, no. 15, 372. doi: 10.1007/s11883-013-0372-2.
- Tabas I., Bornfeldt K.E. Macrophage phenotype and function in different stages of atherosclerosis. Circ. Res., 2016, Vol. 118, no. 4, pp. 653-667.
- Tokunaga O., Satoh T., Yamasaki F., Wu L. Multinucleated variant endothelial cells (MVECs) in human aorta: chromosomal aneuploidy and elevated uptake of LDL. Semin. Thromb. Hemost., 1998, Vol. 24, no. 3, pp. 279-284.
- Tokunaga O., Fan J.L., Watanabe T. Atherosclerosis- and age-related multinucleated variant endothelial cells in primary culture from human aorta. Am. J. Pathol., 1989, Vol. 135, no. 6, pp 967-976.
Дополнительные файлы
