Исследование продуктивности и свойств штамма Weizmannia coagulans, способного синтезировать L-молочную кислоту

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Исследования продуцентов L-молочной кислоты на сегодняшний день представляются весьма актуальными в связи с широкими сферами ее применения. Целью проведенного исследования являлся подбор параметров культивирования термофильного штамма-продуцента L-молочной кислоты Weizmannia coagulans, выделенного из молока. В ходе работы выявлено, что продуктивность штамма зависит от температуры культивирования, скорости перемешивания, рН среды, использованного нейтрализующего агента и концентрации глюкозы. По результатам культивирования в колбах и ферментере установлено, что за 56 часов штамм способен продуцировать до 80,4 г/л молочной кислоты при соответствующей средней продуктивности 1,44 г/(л×ч) с конверсией порядка 99%. Самыми оптимальными параметрами для получения наибольших показателей были температура 50 °С, рН среды 6,5, перемешивание 150 об/мин. Показано, что данный штамм не ингибируется высокими концентрациями глюкозы, а, напротив, демонстрирует большую продуктивность при концентрации глюкозы в среде 100–120 г/л. Среди нейтрализующих агентов, используемых для корректировки рН, выбран Са(ОН)2, который в наименьшей степени влияет на размер клеток продуцента в процессе ферментации и побочные продукты использования которого наименее токсичны. Полученные результаты показывают, что данный штамм требует дальнейших исследований его особенностей метаболизма и генетической модификации для повышения продуктивности, снижения ингибирующего эффекта целевого продукта на метаболизм продуцента и получения повышенных титров молочной кислоты за короткое время ферментации.

Об авторах

Н. Л. Ертилецкая

Сибирский государственный университет науки и технологий им. М.Ф. Решетнёва

Email: natalya.ertiletskaya@gmail.com

А. А. Суханова

Сибирский государственный университет науки и технологий им. М.Ф. Решетнёва

Email: shumilova.ann@mail.ru

А. Н. Бояндин

Сибирский государственный университет науки и технологий им. М.Ф. Решетнёва

Email: boyandin@biopolymer.pro

А. А. Середа

Сибирский государственный университет науки и технологий им. М.Ф. Решетнёва

Email: nensi.sereda@mail.ru

С. Н. Сырцов

Сибирский государственный университет науки и технологий им. М.Ф. Решетнёва

Email: kaideil@list.ru

Ю. А. Прокопчук

Сибирский государственный университет науки и технологий им. М.Ф. Решетнёва

Email: batori_bloody@mail.ru

Список литературы

  1. Abedi E., Hashemi S.M.B. Lactic acid production – producing microorganisms and substrates sources-state of art // Heliyon. 2020. Vol. 6, no. 10. P. e04974. doi: 10.1016/j.heliyon.2020.e04974.
  2. Ojo A.O., de Smidt O. Lactic acid: a comprehensive review of production to purification // Processes. 2023. Vol. 11, no. 3. P. 688. doi: 10.3390/pr11030688.
  3. Kim J., Kim Y.-M., Lebaka V.R., Wee Y.-J. Lactic acid for green chemical industry: recent advances in and future prospects for production technology, recovery, and applications // Fermentation. 2022. Vol. 8, no. 11. P. 609. doi: 10.3390/fermentation8110609.
  4. Komesu A., Oliveira J.A.R.d., Martins L.H.d.S., Wolf Maciel M.R., Maciel Filho R. Lactic acid production to purification: a review // BioResources. 2017. Vol. 12, no. 2. P. 4364–4383. doi: 10.15376/biores.12.2.Komesu.
  5. Auras R., Harte B., Selke S. An overview of polylactides as packaging materials // Macromolecular Bioscience. 2004. Vol. 4, no. 9. P. 835–864. doi: 10.1002/mabi.200400043.
  6. Tian X., Liu X., Zhang Y., Chen Y., Hang H., Chu J., et al. Metabolic engineering coupled with adaptive evolution strategies for the efficient production of high-quality L-lactic acid by Lactobacillus paracasei // Bioresource Technology. 2021. Vol. 323. P. 124549. doi: 10.1016/j.biortech.2020.124549.
  7. Kuo Y.-C., Yuan S.-F., Wang C.-A., Huang Y.-J., Guo G.-L., Hwang W.-S. Production of optically pure L-lactic acid from lignocellulosic hydrolysate by using a newly isolated and D-lactate dehydrogenase gene-deficient Lactobacillus paracasei strain // Bioresource Technology. 2015. Vol. 198. P. 651–657. doi: 10.1016/j.biortech.2015.09.071.
  8. Romanova M.V., Dolbunova A.N., Epishkina Y.M., Evdokimova S.A., Kozlovskiy M.R., Kuznetsov A.Y., et al. A thermophilic L-lactic acid producer of high optical purity: isolation and identification // Foods and Raw Materials. 2024. Vol. 12, no. 1. Р. 101–109. doi: 10.21603/2308-4057-2024-1-591.
  9. Okano K., Uematsu G., Hama S., Tanaka T., Noda H., Kondo A., et al. Metabolic engineering of Lactobacillus plantarum for direct L-lactic Acid production from raw corn starch // Biotechnology Journal. 2018. Vol. 13, no. 5. P. 1700517. doi: 10.1002/biot.201700517.
  10. Liu T., Xu X., Liu Y., Li J., Du G., Lv X., et al. Engineered microbial cell factories for sustainable production of L-lactic acid: a critical review // Fermentation. 2022. Vol. 8, no. 6. P. 279. doi: 10.3390/fermentation8060279.
  11. Kwan T.H., Vlysidis A., Wu Z., Hu Y., Koutinas A., Lin C.S.K. Lactic acid fermentation modelling of Streptococcus thermophilus YI-B1 and Lactobacillus casei Shirota using food waste derived media // Biochemical Engineering Journal. 2017. Vol. 127. P. 97–109. doi: 10.1016/j.bej.2017.08.012.
  12. Park I., Kim I., Kang K., Sohn H., Rhee I., Jin I., et al. Cellulose ethanol production from waste newsprint by simultaneous saccharification and fermentation using Saccharomyces cerevisiae KNU5377 // Process Biochemistry. 2010. Vol. 45, no. 4. P. 487–492. doi: 10.1016/j.procbio.2009.11.006.
  13. Gupta R.S., Patel S., Saini N., Chen S. Robust demarcation of 17 distinct Bacillus species clades, proposed as novel Bacillaceae genera, by phylogenomics and comparative genomic analyses: description of Robertmurraya kyonggiensis sp. nov. and proposal for an emended genus Bacillus limiting it only to the members of the Subtilis and Cereus clades of species // International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. 2020. Vol. 70, no. 11. Р. 5753–5798. doi: 10.1099/ijsem.0.004475.
  14. Konuray G., Erginkaya Z. Potential use of Bacillus coagulans in the food industry // Foods. 2018. Vol. 7, no. 6. P. 92. doi: 10.3390/foods7060092.
  15. De Clerck E., Rodriguez-Diaz M., Forsyth G., Lebbe L., Logan N.A., De Vos P. Polyphasic characterization of Bacillus coagulans strains, illustrating heterogeneity within this species, and emended description of the species // Systematic and Applied Microbiology. 2004. Vol. 27, no. 1. P. 50–60. doi: 10.1078/0723-2020-00250.
  16. Bischoff K.M., Liu S., Hughes S.R., Rich J.O. Fermentation of corn fiber hydrolysate to lactic acid by the moderate thermophile Bacillus coagulans // Biotechnology Letters. 2010. Vol. 32. P. 823–828. doi: 10.1007/s10529-010-0222-z.
  17. Michelson T., Kask K., Jõgi E., Talpsep E., Suitso I., Nurk A. L(+)-Lactic acid producer Bacillus coagulans SIM-7 DSM 14043 and its comparison with Lactobacillus delbrueckii ssp. lactis DSM 20073 // Enzyme and Microbial Technology. 2006. Vol. 39, no. 4. P. 861–867. doi: 10.1016/j.enzmictec.2006.01.015.
  18. Zhou X., Ye L., Wu J.C. Efficient production of L-lactic acid by newly isolated thermophilic Bacillus coagulans WCP10-4 with high glucose tolerance // Applied Microbiology and Biotechnology. 2013. Vol. 97. P. 4309–4314. doi: 10.1007/s00253-013-4710-7.
  19. Ye L., Zhou X., Hudari M.S.B., Li Z., Wu J.С. Highly efficient production of L-lactic acid from xylose by newly isolated Bacillus coagulans C106 // Bioresource Technology. 2013. Vol. 132. P. 38–44. doi: 10.1016/j.biortech.2013.01.011.
  20. Maas R.H.W., Bakker R.R., Jansen M.L.A., Visser D., de Jong E., Eggink G., et al. Lactic acid production from lime-treated wheat straw by Bacillus coagulans: neutralization of acid by fed-batch addition of alkaline substrate // Applied Microbiology and Biotechnology. 2008. Vol. 78. P. 751–758. doi: 10.1007/s00253-008-1361-1.
  21. Пат. № 2650669, Российская Федерация, C12N 1/19, C12P 7/56, C12R 1/85. Штамм Schizosaccharomyces pombe – продуцент молочной кислоты / Л.Н. Борщевская, Т.Л. Гордеева, М.М. Вустин, М.А. Великая, А.Н. Калинина, С.П. Синеокий. Заявл. 21.12.2016; опубл. 16.04.2018. Бюл. № 11.
  22. Суханова А.А., Ертилецкая Н.Л., Бояндин А.Н., Сырцов С.Н., Середа А.А., Прокопчук Ю.А.. Исследование характеристик роста штаммов-продуцентов молочной кислоты с использованием глюкозного сиропа в качестве источника углерода // Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология. 2023. Т. 13. N 2. С. 245–254. doi: 10.21285/2227-2925-2023-13-2-245-254. EDN: HIUHAE.
  23. Zhang F., Liu J., Han X., Gao C., Ma C., Tao F., et al. Kinetic characteristics of long-term repeated fed-batch (LtRFb) L-lactic acid fermentation by a Bacillus coagulans strain // Engineering in Life Sciences. 2020. Vol. 20, no. 12. P. 562–570. doi: 10.1002/elsc.202000043.
  24. Aragno M. Responses of microorganisms to temperature // Physiological plant ecology I: responses to the physical environment / eds O.L. Lange, P.S. Nobel, C.B. Osmond, H. Ziegler. Berlin – Heidelberg: Springer, 1981. P. 339–369. doi: 10.1007/978-3-642-68090-8_12.
  25. Chen Y., Sun Y., Liu Z., Dong F., Li Y., Wang Y. Genomescale modeling for Bacillus coagulans to understand the metabolic characteristics // Biotechnology and Bioengineering. 2020. Vol. 117, no. 11. P. 3545–3558. doi: 10.1002/bit.27488.
  26. Chen Y., Dong F., Wang Y. Systematic development and optimization of chemically defined medium supporting high cell density growth of Bacillus coagulans // Applied Microbiology and Biotechnology. 2016. Vol. 100. P. 8121– 8134. doi: 10.1007/s00253-016-7644-z.
  27. De Oliveira R.A., Schneider R., Rossell C.E.V., Filho R.M., Venus J. Polymer grade L-lactic acid production from sugarcane bagasse hemicellulosic hydrolysate using Bacillus coagulans // Bioresource Technology Reports. 2019. Vol. 6. P. 26–31. doi: 10.1016/j.biteb.2019.02.003.
  28. Abdel-Rahman M.A., Tashiro Y., Sonomoto K. Recent advances in lactic acid production by microbial fermentation processes // Biotechnology Advances. 2013. Vol. 31, no. 6. P. 877–902. doi: 10.1016/j.biotechadv.2013.04.002.
  29. Åkerberg C., Hofvendahl K., Zacchi G., Hahn-Hägerdal B. Modelling the influence of pH, temperature, glucose and lactic acid concentrations on the kinetics of lactic acid production by Lactococcus lactis ssp. lactis ATCC 19435 in whole-wheat flour // Applied Microbiology and Biotechnology. 1998. Vol. 49. P. 682–690. doi: 10.1007/s002530051232.
  30. Lund P.A., De Biase D., Liran O., Scheler O., Mira N.P., Cetecioglu Z., et al. Understanding how microorganisms respond to acid pH is central to their control and successful exploitation // Frontiers in Microbiology. 2020. Vol. 11. P. 556140. doi: 10.3389/fmicb.2020.556140.
  31. Juturu V., Wu J.C. Microbial production of lactic acid: the latest development // Critical Reviews in Biotechnology. 2016. Vol. 36, no. 6. P. 967–977. doi: 10.3109/07388551.2015.1066305.
  32. Guan N., Liu L. Microbial response to acid stress: mechanisms and applications // Applied Microbiology and Biotechnology. 2020. Vol. 104. P. 51–65. doi: 10.1007/s00253-019-10226-1.
  33. Tian W., Qin J., Lian C., Yao Q., Wang X. Identification of a major facilitator superfamily protein that is beneficial to L-lactic acid production by Bacillus coagulans at low pH // BMC Microbiology. 2022. Vol. 22. P. 310. doi: 10.1186/s12866-022-02736-2.
  34. Chen Y., Sun Y., Liu Z., Dong F., Li Y., Wang Y. Genomescale modeling for Bacillus coagulans to understand the metabolic characteristics // Biotechnology and Bioengineering. 2020. Vol. 117, no. 11. P. 3545–3558. doi: 10.1002/bit.27488.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML


Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».